零下非结冰保存人工肝用永生化肝细胞
发布时间：2021-11-03 10:27
肝功能衰竭是多种因素引起的严重肝功能损害,现有的病因治疗及一般支持治疗疗效甚微,病死率高达80%。目前肝移植被认为是急慢性肝功能衰竭晚期最有效的治疗方法,但是肝移植存在供体严重不足、手术复杂风险大、患者需要终身免疫抑制治疗及费用昂贵等缺点,导致众多患者在等待供肝期间死亡。而生物人工肝支持系统（Bioatificial liver support system, BLASS）的发展为肝功能衰竭的治疗开辟了新的途径：一方面部分患者急性肝功能衰竭是可逆的,通过BLASS短期有效的肝功能支持,患者肝脏可望通过残存的正常肝细胞代偿增生而恢复功能；另一方面对于不可逆的急慢性肝功能衰竭患者,也可以通过BLASS的体外肝功能支持,为最终的肝移植赢得宝贵的待肝时间,BLASS起到了“肝功能衰竭-肝移植”的桥梁作用。目前作为BLASS生物材料的体外培养的肝细胞需要达到以下3方面的要求：①质量（Quality）要求：肝细胞应具备体内肝细胞清除毒素、生物转化及合成、分泌等主要功能。②数量（Quantity）要求：肝细胞数量至少达到109个数量级,才能达到BLASS的临床支持要求。③快速临床应用（Ready t...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同溶液的降温曲线及冰点:蒸馏水的冰点是O℃冰点是一1℃，零下非结冰温度是0℃一Cl)℃，图1一IB;L02C图1一IA;UW液的肝细胞悬液的冰点为
followingthreegrouPs(Mean士SD，n=6)2.3不同低温保存时间细胞凋亡率各组不同时间点细胞凋亡率见表1一2和图1一3、图1一11。新鲜细胞(未低温保存)凋亡率为:1.73%士0.20%，随低温保存时间延长，各组细胞凋亡率呈上升趋势沪<0.001)，时间和温度对细胞凋亡率无交互影响(介0.101)。24h，各组细胞凋亡率无差异(介a71乃;48h，各组细胞凋亡率无差异(介0.110);72h，各组细胞凋亡率显著升高，但一0.8℃组细胞凋亡率显著低于O℃组及4℃组(介0.01乃。
n=6)2.5不同低温保存时间细胞ALT释放各组不同时间点反应细胞损伤程度的谷丙转氨酶(ALT)释放见表1一4和图1一5。新鲜细胞(未低温保存)ALT释放为:3.83U/L士O.48U/L，随低温保存时间延长，各组细胞ALT释放呈上升趋势(P<0.O口1)，温度和时间对ALT释放的影响不存在交互效应(介0.0抖。24h，各组细胞ALT释放无差异(介as刃);48h，一0.8℃组细胞ALT释放同4OC组相比，开始出现差异(介0.00习:72h，各组细胞A耳释放显著升高，但一0.8℃组细胞ALT释放显著低于0℃组及4℃组(P<0.o0I)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究[J]. 龚独辉,潘明新,姚坤厚,夏武政,康玉占,汪艳,高毅. 广东医学. 2009(04)
[2]慢性肝衰竭患者预后的影响因素[J]. 高艳颖,韩涛,阚志超. 世界华人消化杂志. 2008(29)
[3]Fas/FasL在急性胰腺炎肝损伤中的作用[J]. 张晓华,袁柏思,朱人敏. 世界华人消化杂志. 2008(15)
[4]黄芪提取物对冷冻保存原代人胎肝细胞的保护作用[J]. 汪艳,朱应乾,林敬明,张忠义,高毅. 中药材. 2007(12)
[5]移植肝的保存[J]. 卢思聪,吕凌,张峰. 世界华人消化杂志. 2007(26)
[6]肝功能衰竭诊疗指南[J]. 中华传染病杂志. 2006(06)
[7]人工肝治疗对重型肝病患者生存期的影响[J]. 张晶,段钟平,何金秋,张伦理,陈士彬,邹春毅,辛绍杰,武文芳,马斌荣,陈煜,孔明,刘梅,韩大康. 中华肝脏病杂志. 2006(09)
[8]Detection of PERV by polymerase chain reaction and its safety in bioartificial liver support system[J]. Hai-Hui Wang Department of Endocrine Diseases.Southwestern Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,ChinaYing-Jie Wang Hong-Ling Liu Jun Liu Yan-Ping Huang Hai-Tao Guo Yu-Ming Wang,Institute of Infectious Diseases,Southwestern Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China. World Journal of Gastroenterology. 2006(08)
[9]苦参碱对L-02人肝细胞系液氮下冻存复苏后功能的影响[J]. 朱应乾,高毅,汪燕. 世界华人消化杂志. 2005(07)
[10]体外培养人胎肝细胞与永生化L-02肝细胞的生物学性状比较[J]. 孔炜伟,滕皋军. 中华放射学杂志. 2004(02)
本文编号：3473529
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同溶液的降温曲线及冰点:蒸馏水的冰点是O℃冰点是一1℃，零下非结冰温度是0℃一Cl)℃，图1一IB;L02C图1一IA;UW液的肝细胞悬液的冰点为
followingthreegrouPs(Mean士SD，n=6)2.3不同低温保存时间细胞凋亡率各组不同时间点细胞凋亡率见表1一2和图1一3、图1一11。新鲜细胞(未低温保存)凋亡率为:1.73%士0.20%，随低温保存时间延长，各组细胞凋亡率呈上升趋势沪<0.001)，时间和温度对细胞凋亡率无交互影响(介0.101)。24h，各组细胞凋亡率无差异(介a71乃;48h，各组细胞凋亡率无差异(介0.110);72h，各组细胞凋亡率显著升高，但一0.8℃组细胞凋亡率显著低于O℃组及4℃组(介0.01乃。
n=6)2.5不同低温保存时间细胞ALT释放各组不同时间点反应细胞损伤程度的谷丙转氨酶(ALT)释放见表1一4和图1一5。新鲜细胞(未低温保存)ALT释放为:3.83U/L士O.48U/L，随低温保存时间延长，各组细胞ALT释放呈上升趋势(P<0.O口1)，温度和时间对ALT释放的影响不存在交互效应(介0.0抖。24h，各组细胞ALT释放无差异(介as刃);48h，一0.8℃组细胞ALT释放同4OC组相比，开始出现差异(介0.00习:72h，各组细胞A耳释放显著升高，但一0.8℃组细胞ALT释放显著低于0℃组及4℃组(P<0.o0I)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究[J]. 龚独辉,潘明新,姚坤厚,夏武政,康玉占,汪艳,高毅. 广东医学. 2009(04)
[2]慢性肝衰竭患者预后的影响因素[J]. 高艳颖,韩涛,阚志超. 世界华人消化杂志. 2008(29)
[3]Fas/FasL在急性胰腺炎肝损伤中的作用[J]. 张晓华,袁柏思,朱人敏. 世界华人消化杂志. 2008(15)
[4]黄芪提取物对冷冻保存原代人胎肝细胞的保护作用[J]. 汪艳,朱应乾,林敬明,张忠义,高毅. 中药材. 2007(12)
[5]移植肝的保存[J]. 卢思聪,吕凌,张峰. 世界华人消化杂志. 2007(26)
[6]肝功能衰竭诊疗指南[J]. 中华传染病杂志. 2006(06)
[7]人工肝治疗对重型肝病患者生存期的影响[J]. 张晶,段钟平,何金秋,张伦理,陈士彬,邹春毅,辛绍杰,武文芳,马斌荣,陈煜,孔明,刘梅,韩大康. 中华肝脏病杂志. 2006(09)
[8]Detection of PERV by polymerase chain reaction and its safety in bioartificial liver support system[J]. Hai-Hui Wang Department of Endocrine Diseases.Southwestern Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,ChinaYing-Jie Wang Hong-Ling Liu Jun Liu Yan-Ping Huang Hai-Tao Guo Yu-Ming Wang,Institute of Infectious Diseases,Southwestern Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China. World Journal of Gastroenterology. 2006(08)
[9]苦参碱对L-02人肝细胞系液氮下冻存复苏后功能的影响[J]. 朱应乾,高毅,汪燕. 世界华人消化杂志. 2005(07)
[10]体外培养人胎肝细胞与永生化L-02肝细胞的生物学性状比较[J]. 孔炜伟,滕皋军. 中华放射学杂志. 2004(02)
本文编号：3473529
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