3D打印的β-磷酸三钙结合低频脉冲电磁场对大鼠颅骨缺损修复效果的研究
发布时间：2021-11-06 20:29
创伤、感染、肿瘤和先天性疾病等原因可以导致骨缺损,骨缺损的治疗往往需要自体骨移植或者异体骨移植,而这些治疗方法有一定的缺陷。3D打印技术结合生物材料的骨组织工程在一定程度上可以弥补这些缺陷,对骨缺损的治疗具有重大意义。另外,低频脉冲电磁场（pulse electromagnetic fields,PEMFs）也可以促进骨再生,但目前缺少PEMFs治疗骨缺损的研究。两者的结合可能为骨缺损治疗提供一种新的方法。目的:1.研究以β-磷酸三钙为原料的3D打印支架与PEMFs对大鼠脂肪干细胞（rat adipose stem cells,rADSCs）增殖与成骨分化的影响。2.研究β-TCP支架和PEMFs照射两者的结合对大鼠颅骨临界缺损修复的影响。方法:1.利用3D打印技术按照设计方案定制β-TCP支架。2.3D打印的β-TCP支架做扫描电子显微镜观察其表面形貌。3.将rADSCs种植于β-TCP支架上培养24,48,72h后,对其进行活/死细胞染色实验来评价β-TCP支架的生物相容性和细胞毒性。4.rADSCs分别在四种不同的培养条件下培养1,4,7d后,使用细胞计数试剂盒-8（The Ce...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１脉冲电磁场（ｐｕｌｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ?ｆｉｅｌｄｓ，?ＰＥＭＦｓ）发生装置的组成：电源发生器，线??
第一章大鼠脂肪干细胞的原代培养及在Ｐ－磷酸三钙和低频脉冲电磁场作用下其增殖和成骨分化的效果??１－２）。支架的结构有规律地布置，直径为１７０±１０—，规律排列的棒状结构形成??了边长为２１９±１７ｐｍ的方形孔隙。由３Ｄ打印技术生产的Ｐ－ＴＣＰ支架完全相互贯??通，其孔隙率达到１００％。这种特性可以为细胞提供大量的粘附区域。当用作移??植物时，高孔隙度支架也为骨细胞爬行、生长和形成血管提供了空间。??
第一章大鼠脂肪干细胞的原代培养及在Ｐ－磷酸三钙和低频脉冲电磁场作用下其增殖和成骨分化的效果??ｍｍ??图１－３在普通培养基中培养２４、４８或７２ｈ的ｒＡＤＳＣｓ的ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ细胞染色，活细胞被??染成绿色，死细胞被染成红色。在低倍率视野中，２４、４８和７２ｈ的活／死ｒＡＤＳＣｓ比值分别??为４．３６（ａ，１０９／２５）、５．８１（ｂ，３４３／５９）和７．６０（ｃ，２５１／３３），活细胞密度随培养时间的延长而增??大。在高倍率视野中，活细胞在早期（ｂ）呈现伸展的状态，而在后期⑴表现出细长的状态。??Ｆｉｇ．?１－３?ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｒＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｎ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ?ｉｎ?ｏｒｄｉｎａｒｙ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｏｒ?２４，?４８，?ｏｒ??７２?ｈ．?Ｌｉｖｅ?ｃｅｌｌｓ?ａｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｇｒｅｅｎ，?ａｎｄ?ｄｅａｄ?ｃｅｌｌｓ?ａｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｒｅｄ．?Ｉｎ?ｔｈｅ?ｌｏｗ－ｐｏｗｅｒ?ｆｉｅｌｄ?ｏｆ?ｖｉｓｉｏｎ，??ｔｈｅ?ｒａｔｉｏｓ?ｏｆ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?ｒＡＤＳＣｓ?ａｔ?２４，?４８，?ａｎｄ?７２?ｈ?ａｒｅ?４．３６?（ａ，?１０９／２５），?５．８１?（ｂ，?３４３／５９），?ａｎｄ?７．６０??（ｃ，?２５１／３３），?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｌｉｖｉｎｇ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｃｒｅａｓｅｓ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｕｌｔｕｒｅ??ｔｉｍｅ．?Ｉｎ?ｔｈｅ?ｈｉｇｈ－ｐｏｗｅｒ?ｆｉｅｌｄ?ｏｆ?ｖｉｓｉｏｎ，?ｔｈｅ?ｌｉｖｉｎｇ?ｃｅｌｌｓ?ｅｘｈｉｂｉｔ?ａ?ｓｔａｔｅ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]3D打印聚醚醚酮及其复合材料修复骨缺损的应用现况[J]. 林柳兰,周建勇. 中国组织工程研究. 2020(10)
[2]下肢骨肉瘤切除后大段骨缺损患者的3D打印假体复合β-TCP生物陶瓷重建[J]. 鲁亚杰,龙作尧,李明辉,陈国景,李靖,付军,卢建熙,王臻. 中国骨与关节杂志. 2019(01)
[3]脉冲电磁场促进成骨细胞成熟分化依赖于初级纤毛-PI3K/AKT途径[J]. 任茜,周建,王鸣刚,陈克明. 北京大学学报(医学版). 2019(02)
[4]关节镜微骨折术联合自体脂肪干细胞移植治疗膝关节软骨损伤[J]. 李军最,黄克,李林,李兴艳,张波,胡敏,梁红锁,蔡敏,杜勇军,马鸳霞. 中国现代医药杂志. 2018(07)
[5]生物陶瓷在骨组织工程中的应用进展[J]. 卢陈佩,王旭东,沈国芳. 中国组织工程研究. 2017(22)
[6]Masquelet技术治疗骨缺损的研究进展[J]. 杨建成,王涛. 临床医药文献电子杂志. 2017(55)
[7]自体脂肪干细胞移植在创面愈合的研究进展[J]. 丁世超,张培华. 海南医学. 2017(07)
[8]羟基磷灰石/磷酸三钙生物材料植入小鼠体内的血管化过程[J]. 程丽佳,鄢硕,时政,方依婷,朱江. 生物医学工程学杂志. 2017(01)
[9]脉冲电磁场协同多孔钛合金对兔长骨缺损修复效果的微观结构分析[J]. 景达,佟世超,翟明明,李小康,申广浩,罗二平. 高电压技术. 2014(12)
[10]改良Illizarov技术治疗下肢感染性骨缺损[J]. 高辉,肖树军,陈雷,李传福,吴学东,韩丹. 中国骨伤. 2006(11)
本文编号：3480474
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１脉冲电磁场（ｐｕｌｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ?ｆｉｅｌｄｓ，?ＰＥＭＦｓ）发生装置的组成：电源发生器，线??
第一章大鼠脂肪干细胞的原代培养及在Ｐ－磷酸三钙和低频脉冲电磁场作用下其增殖和成骨分化的效果??１－２）。支架的结构有规律地布置，直径为１７０±１０—，规律排列的棒状结构形成??了边长为２１９±１７ｐｍ的方形孔隙。由３Ｄ打印技术生产的Ｐ－ＴＣＰ支架完全相互贯??通，其孔隙率达到１００％。这种特性可以为细胞提供大量的粘附区域。当用作移??植物时，高孔隙度支架也为骨细胞爬行、生长和形成血管提供了空间。??
第一章大鼠脂肪干细胞的原代培养及在Ｐ－磷酸三钙和低频脉冲电磁场作用下其增殖和成骨分化的效果??ｍｍ??图１－３在普通培养基中培养２４、４８或７２ｈ的ｒＡＤＳＣｓ的ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ细胞染色，活细胞被??染成绿色，死细胞被染成红色。在低倍率视野中，２４、４８和７２ｈ的活／死ｒＡＤＳＣｓ比值分别??为４．３６（ａ，１０９／２５）、５．８１（ｂ，３４３／５９）和７．６０（ｃ，２５１／３３），活细胞密度随培养时间的延长而增??大。在高倍率视野中，活细胞在早期（ｂ）呈现伸展的状态，而在后期⑴表现出细长的状态。??Ｆｉｇ．?１－３?ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｒＡＤＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｏｎ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ?ｉｎ?ｏｒｄｉｎａｒｙ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｏｒ?２４，?４８，?ｏｒ??７２?ｈ．?Ｌｉｖｅ?ｃｅｌｌｓ?ａｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｇｒｅｅｎ，?ａｎｄ?ｄｅａｄ?ｃｅｌｌｓ?ａｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｒｅｄ．?Ｉｎ?ｔｈｅ?ｌｏｗ－ｐｏｗｅｒ?ｆｉｅｌｄ?ｏｆ?ｖｉｓｉｏｎ，??ｔｈｅ?ｒａｔｉｏｓ?ｏｆ?ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ?ｒＡＤＳＣｓ?ａｔ?２４，?４８，?ａｎｄ?７２?ｈ?ａｒｅ?４．３６?（ａ，?１０９／２５），?５．８１?（ｂ，?３４３／５９），?ａｎｄ?７．６０??（ｃ，?２５１／３３），?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｌｉｖｉｎｇ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｃｒｅａｓｅｓ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｕｌｔｕｒｅ??ｔｉｍｅ．?Ｉｎ?ｔｈｅ?ｈｉｇｈ－ｐｏｗｅｒ?ｆｉｅｌｄ?ｏｆ?ｖｉｓｉｏｎ，?ｔｈｅ?ｌｉｖｉｎｇ?ｃｅｌｌｓ?ｅｘｈｉｂｉｔ?ａ?ｓｔａｔｅ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]3D打印聚醚醚酮及其复合材料修复骨缺损的应用现况[J]. 林柳兰,周建勇. 中国组织工程研究. 2020(10)
[2]下肢骨肉瘤切除后大段骨缺损患者的3D打印假体复合β-TCP生物陶瓷重建[J]. 鲁亚杰,龙作尧,李明辉,陈国景,李靖,付军,卢建熙,王臻. 中国骨与关节杂志. 2019(01)
[3]脉冲电磁场促进成骨细胞成熟分化依赖于初级纤毛-PI3K/AKT途径[J]. 任茜,周建,王鸣刚,陈克明. 北京大学学报(医学版). 2019(02)
[4]关节镜微骨折术联合自体脂肪干细胞移植治疗膝关节软骨损伤[J]. 李军最,黄克,李林,李兴艳,张波,胡敏,梁红锁,蔡敏,杜勇军,马鸳霞. 中国现代医药杂志. 2018(07)
[5]生物陶瓷在骨组织工程中的应用进展[J]. 卢陈佩,王旭东,沈国芳. 中国组织工程研究. 2017(22)
[6]Masquelet技术治疗骨缺损的研究进展[J]. 杨建成,王涛. 临床医药文献电子杂志. 2017(55)
[7]自体脂肪干细胞移植在创面愈合的研究进展[J]. 丁世超,张培华. 海南医学. 2017(07)
[8]羟基磷灰石/磷酸三钙生物材料植入小鼠体内的血管化过程[J]. 程丽佳,鄢硕,时政,方依婷,朱江. 生物医学工程学杂志. 2017(01)
[9]脉冲电磁场协同多孔钛合金对兔长骨缺损修复效果的微观结构分析[J]. 景达,佟世超,翟明明,李小康,申广浩,罗二平. 高电压技术. 2014(12)
[10]改良Illizarov技术治疗下肢感染性骨缺损[J]. 高辉,肖树军,陈雷,李传福,吴学东,韩丹. 中国骨伤. 2006(11)
本文编号：3480474
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