透明质酸键合分枝状低分子量聚乙烯亚胺作为siRNA载体的研究

发布时间：2021-11-08 08:53

　　通过构建透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺的低毒性siRNA载体,探究其转染si RNA的效果。利用核磁共振氢谱确定透明质酸与低分子量聚乙烯亚胺嫁接形成复合物的结构,并通过MTT方法检测其对细胞的毒性。采用凝胶电泳法确定siRNA与复合载体的结合比,利用粒度仪对其粒径大小、带电量等进行表征,并通过透射电子显微镜观察其形态。通过复合载体在B16F1细胞内,观察其基因沉默效率。结果表明:当siRNA与复合载体的质量比为1∶20时,其表面带电量约为+0. 3 m V,粒子直径约为113. 7 nm,形态均匀呈球形,分散均匀。其对细胞毒性远远小于高分子量聚乙烯亚胺,但转染效果较好。因此,透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺是一种低毒、高效的新型非病毒载体。 

【文章来源】：重庆理工大学学报(自然科学). 2020,34(04)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

HA、PEI、HA+PEI和PEI-HA的核磁共振氢谱

MTT法检测PEI 2K-HA与PEI 25K-HA的细胞毒性结果显示(见图2):PEI 2K-HA与PEI 25K-HA对细胞均具有毒性，并且随着用量的增加，毒性也逐渐增加;但是，在不同浓度水平下，PEI 2K-HA对细胞的毒性均明显小于PEI 25K-HA对细胞的毒性;且当浓度低于50μ/m L时，PEI 2K-HA几乎无细胞毒性。因此，需要进一步对PEI 2K-HA进行表征，检测其用作基因载体的特性。2.3 凝胶电泳法检测si RNA/PEI 2K-HA结合的结果

凝胶电泳法检测si RNA与PEI 2K-HA复合物的结合结果显示(见图3),si RNA与PEI 2K-HA复合物在质量比为1∶5、1∶10和1∶20这3种条件下均能够完全结合。因此，需要进一步表征3种质量比时的其他性能指标，来确定si RNA与PEI2K-HA复合物的最佳结合比。2.4 si RNA/PEI 2K-HA复合物的表征结果

【参考文献】：
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本文编号：3483408