滚压载荷促进关节软骨体外构建的初步研究

发布时间：2021-11-17 17:30

　　目的:对兔膝关节软骨细胞进行体外琼脂糖凝胶滚压培养;探讨滚压载荷对软骨组织体外构建的可行性。方法:1细胞培养及鉴定:无菌条件下取四周龄健康新西兰白兔双膝关节软骨,应用分阶段酶消化法,分离提取软骨细胞,20%胎牛血清的HG-DMEM作为细胞培养基,在37℃、体积分数为5%的CO2及饱和湿度条件下培养,每3天换液一次。取第3代软骨细胞,进行甲苯胺蓝、番红O-固绿、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,以用作对软骨细胞的初步鉴定。2以分离提取的兔膝关节软骨细胞为种子细胞,以琼脂糖凝胶为支架,构建细胞/支架复合体。将细胞/支架共同培养48小时后,电镜观察支架内软骨细胞的黏附、生长情况。设置实验组A （8例）和对照组B （8例）,实验组滚压动态加载培养（每天定时滚压加载20min）,对照组正常体外静态培养。4周后观察标本大体形态,并对实验组和对照组进行HE染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,应用Image-pro plus对Ⅱ型胶原免疫组织化学染色切片行Ⅱ型胶原半定量分析。结果:1细胞形态学观察和鉴定:原代培养的软骨细胞贴壁较慢,24-36小时才开始贴壁变形。其外形多为多边形,胞浆丰富,胞核圆形,居中,有2-3... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
资料和方法
结果
讨论
结论
参考文献
致谢
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期刊论文
[1]兔关节软骨细胞的琼脂糖凝胶培养及其力学性质的研究[J]. 董江峰,李晓娜,陈维毅.  医用生物力学. 2007(04)
[2]力学因素在功能性软骨组织工程学中的作用[J]. 李春江,卫小春.  生物骨科材料与临床研究. 2007(03)
[3]力学生物学在骨与软骨研究中的应用[J]. 戴尅戎.  中华骨科杂志. 2006(06)
[4]兔关节软骨细胞的获取及培养[J]. 尹宝英,李裕强,张浩,温叶飞,张涌.  黑龙江畜牧兽医. 2006(05)
[5]组织工程生物反应器的生物力学[J]. 樊瑜波,陶祖莱.  医用生物力学. 2005(04)
[6]胶原酶一次消化法培养兔软骨细胞[J]. 宁旭,尚显文,尹培荣,吴承龙.  贵州医药. 2004(06)
[7]组织工程化软骨的应力-应变研究[J]. 王跃,杨志明,解慧琪,李胜富.  生物医学工程学杂志. 2001(02)
[8]生物力学与骨组织工程[J]. 王远亮,蔡绍皙.  力学进展. 1999(02)



本文编号：3501370