BSA改性DBM支架的制备及细胞黏附性能研究

发布时间：2021-11-18 17:15

　　研究目的:1.采用不同浓度的牛血清白蛋白（BSA）对牛脱钙骨基质（DBM）进行表面修饰,制备具有BSA涂层的DBM支架材料,观察各组支架表征并对其性能进行分析;2.无菌环境下,小鼠成纤维细胞（L929）与BSA改性前后的DBM支架共培养,观察细胞在支架表面的生长情况,测定支架材料对细胞增殖活性的影响;3.L929细胞与支架材料在无菌环境下共培养一定时间后,测定BSA改性前后的DBM支架对细胞的黏附能力,探寻适宜的BSA浓度。研究方法:1.取牛松质骨体外脱脂脱钙后制得DBM支架材料作为对照组,使用浓度为10 mg/ml、20 mg/ml、30 mg/ml、40 mg/ml 的BSA溶液处理DBM,冷冻干燥法制备的具有BSA涂层的支架作为实验组。扫描电子显微镜下观察支架的表面形貌,傅里叶变换红外光谱分析BSA的结合情况,并对支架的孔隙率、降解速率、接触角进行测定。2.复苏L929细胞,将生长情况良好的细胞接种到无菌DBM支架及具有BSA涂层的支架内,共培养3d,扫描电镜下观察细胞在支架内生长情况,MTT法检测BSA改性前后的支架对细胞增殖活性的影响。3.将L929细胞接种到改性前后的DBM... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１扫描电镜下支架表面形态??Ｆｉｇ?２．１?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ??

２．４．３支架的孔隙率??？?各组支架的孔隙率测定结果如图２．３。ＤＢＭ支架内部三维多孔结构相互交??联，胶原网架有效空间大，孔隙率达（６９．２８±２．４６）?％。使用ＢＳＡ对ＤＢＭ支架??修饰后，随着ＢＳＡ浓度的增加，支架的孔隙率逐渐降低，各组支架的孔隙率分??别为（５１．０８±１．５３）?％，（４６．２０±０．９９）?％，?（４０．８３±１．２３）?％，?（３４＿２８士２．７３）?％。??在骨组织工程中，支架孔隙率大小可以控制氧气及营养成分输送的速度和效率，??材料孔隙率适当降低不影响细胞的定植，但孔隙率过低影响支架整体负载细胞??的能力，提示利用ＢＳＡ对支架改性时，蛋白浓度不宜过高，应低于４０ｍｇ／ｍｌ。??１４??

Ｆｉｇ?２．３?Ｐｏｒｏｓｉｔｙ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ??２．４．４支架的亲水性??ＤＢＭ支架及具有ＢＳＡ涂层的各组ＤＢＭ支架的静态接触角见图２．４?（Ａ）。??ＤＢＭ支架改性前，表面接触角大于９０°；不同浓度的ＢＳＡ处理后ＤＢＭ支架表??面接触角均小于９０°。每组随机取３个平行样进行测定，结果见图２．４?（Ｂ）。??对照组ＤＢＭ支架材料的接触角为１２４．５２°±９．３５°，各实验组接触角分别为??６８．９４。±２．０３。，６５．８１。±２．６９。，７０．５。±０．４７。，６９．２６。±６．９１。。与对照组?ＤＢＭ?支架??相比，ＢＳＡ处理的实验组接触角差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），各个实验组??两两比较，接触角大小无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＢＳＡ涂层可以改??进ＤＢＭ支架的亲水性，与ＢＳＡ的浓度大小无关。??（ａ）?（ｂ）?（Ｃ）??（ｄ）?（ｅ）??图２．４?（Ａ）支架材料的表面接触角??１５??

【参考文献】：
期刊论文
[1]富血小板血浆的制备现状及研究进展[J]. 吕敏,裴国献,刘勇,靳宇飞,李富航,白建萍.  现代生物医学进展. 2013(13)
[2]骨髓间充质干细胞与同种异体脱钙骨基质组合生长因子诱导向软骨细胞分化[J]. 徐斌,宣涛,徐洪港,王浩.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(21)
[3]富血小板血浆和脱钙骨基质促进牵拉成骨矿化过程的实验研究[J]. 倪明,唐佩福,王岩,李刚.  中国修复重建外科杂志. 2011(06)

硕士论文
[1]锌掺杂的羟基磷灰石复合物（聚乳酸或石墨烯）制备与模拟研究[D]. 巫剑波.深圳大学 2017



本文编号：3503289