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多壁碳纳米管致血管内皮功能障碍的作用研究

发布时间:2021-11-21 18:53
  目的多壁碳纳米管(MWCNTs)是一种新型的纳米纤维材料,具有优异的导电、导热和力学性能,已广泛应用于蓄电池、船舶、航天器和运动器材等多个领域。此外,MWCNTs特殊的中空结构使得空腔管体容纳生物特异性分子及药物成为可能,良好的生物相容性使其可与蛋白质、核酸、脂质等生物分子相结合;这些特点决定了其可作为药物载体,在生物医药领域也有着巨大的应用前景。因MWCNTs应用前景广泛,人类接触或使用MWCNTs相关产品的机会大大增加,其是否会对人体健康造成危害必然会受到社会的高度关注。目前,对MWCNTs有害效应的研究多集中于职业暴露导致的呼吸系统毒性,而对其它器官或组织的毒性关注不够。作为药物载体,心血管系统是最易受到MWCNTs直接暴露的器官。所以,本研究通过体内和体外实验相结合的方式,分别通过整体动物实验和体外实验系统,考察MWCNTs致血管内皮功能障碍的作用,并探究VEGF在这一损伤效应中的作用。此可明确MWCNTs对心血管系统的毒性效应,探索其作用机制,为MWCNTs产品的安全性评价和风险评估提供科学依据,具有重要的科学意义。材料与方法1、受试物:MWCNTs,长度10-20μm,直径... 

【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

多壁碳纳米管致血管内皮功能障碍的作用研究


简明技术路线图

电镜图,细胞,活力,直径


海军军医大学硕士学位论文-18-图2.细胞内MWCNTs透射电镜图(A-C)对照组细胞,(D-F)经直径10-50nmMWCNTs处理的HUVECs细胞,(G-I)经直径50nm以上MWCNTs处理的HUVECs细胞。(二)MWCNTs对HUVEC细胞活力的影响为考察MWCNTs对内皮细胞的损伤作用,对照组HUVECs使用完全培养基,实验组HUVECs的培养基中,MWCNTs浓度分别设置为0.1,1,10和100μg/mL,按照以上条件处理24小时、48小时、96小时后,分别通过CCK-8法、LDH法和Calcein-AM/PI三种方法检测细胞活力。CCK-8kit检测结果如图3所示,与对照组细胞相比,两种直径MWCNTs处理组的HUVECs细胞活力均有下降。经双因素方差分析(two-wayANOVA)检验后发现,直径10-50nmMWCNTs浓度(P<0.001)、作用时间(P<0.001)和两者的交互作用(P<0.001)在影响细胞活力的效应上均有显著性;多重比较发现,只有100μg/mLMWCNTs组细胞活力与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);直径>50nm

活力,细胞,浓度


多壁碳纳米管致血管内皮功能障碍的作用研究-19-MWCNTs组在浓度(P<0.001)、作用时间(P<0.001)上对细胞活力的影响效应具有显著性,但二者并不存在交互作用(P=0.15),多重比较发现四个浓度MWCNTs对细胞活力的影响均具有显著性(P<0.01,此处分析方法为双因素方差分析,故无法在图中标出相应P值)。图3.MWCNTs对HUVECs细胞活力的影响(A)经不同浓度直径10-50nmMWCNTs处理后,细胞活力呈浓度(P<0.001)、时间依赖性下降(P<0.001),两因素具有交互作用(P<0.001),(B)经不同浓度直径>50nmMWCNTs处理后,细胞活力呈浓度(P<0.001)、时间依赖性下降(P<0.001),两因素间不具有交互作用(P=0.15)。考虑到静脉注射进入体内的MWCNTs,对血管内皮造成的暴露持续时间较短,所以在明确了MWCNTs在浓度和作用时间两个方面造成的活力损伤效应均具有统计学意义后,为了找到MWCNTs能够造成HUVECs活力下降的较短作用时间和较低作用浓度,将上述实验结果按照作用时间划分,对各时间点的影响作用进行单独分析后发现,与对照组细胞相比,直径10-50nmMWCNTs在浓度达到10μg/mL情况下作用24小时后,即可造成HUVECs细胞活力的下降(P<0.001),同浓度下直径>50nmMWCNTs对细胞活力的影响作用也具有显著性(P<0.01)(图4)。图4.不同浓度MWCNTs对HUVECs细胞活力的影响(A)直径10-50nmMWCNTs处理组,(B)直径>50nmMWCNTs处理组。(n=6,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.005,****P<0.0001)

【参考文献】:
期刊论文
[1]Toxicity of Multi-Walled Carbon Nanotubes,Graphene Oxide,and Reduced Graphene Oxide to Zebrafish Embryos[J]. LIU Xiao Tong,MU Xi Yan,WU Xiao Li,MENG Li Xuan,GUAN Wen Bi,MA Yong Qiang,SUN Hua,WANG Cheng Ju,LI Xue Feng.  Biomedical and Environmental Sciences. 2014(09)



本文编号:3510052

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