新型ALN/HA/CS支架材料对BMSCs成软骨分化的影响

发布时间：2021-11-27 17:43

　　本文以新型阿仑膦酸钠-羟基磷灰石-壳聚糖（Alendronate-hydroxyapatite-chitosan, ALN/HA/CS）软骨支架材料为支撑,与兔骨髓间充质干细胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells、BMSCs）共培养,检测培养后不同时间成软骨分化的基因表达,从而评估ALN/HA/CS对BMSCs分化的影响。本研究进行了幼兔BMSCs的原代培养和传代培养,经传代后接种于含有ALN/HA/CS双层复合支架材料的细胞培养板中进行体外培养,对照组为HA/CS双层复合支架材料。在培养后不同时间收集细胞进行实时定量PCR检测ALP、二型胶原与一型胶原等与软骨形成相关基因表达和糖胺聚糖分泌。得到如下结果：1.成骨诱导3、5、7天,实验组ALP基因表达水平均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。成骨诱导7、14、21天,实验组BGP基因表达均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.成软骨诱导培养3、6、12天时,实验组与对照组二型胶原基因表达量与糖氨基聚糖（GAG）分泌量均无明显区别。成软骨诱导... 

【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1. 前言
    1.1 骨软骨组织工程的研究进展
        1.1.1 关节软骨的结构特点
        1.1.2 骨软骨修复的细胞来源
    1.2 骨软骨支架与功能设计
        1.2.1 支架材料的选择与设计
        1.2.2 支架生物相容性、降解性及机械力学性能
        1.2.3 支架孔结构的设计
        1.2.4 支架相关生物因子
    1.3 总结
    参考文献
2. 材料和方法
    2.1 实验材料及试剂
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂
    2.2 方法
        2.2.1 兔骨髓间充质干细胞的分离与培养
        2.2.2 ALN/HA/CS复合支架材料对骨髓间充质干细胞成软骨分化影响检测
        2.2.3 实时荧光定量PCR
    2.3 统计学分析
3. 结果
    3.1 兔BMSCs体外培养
    3.2 ALN/HA/CS支架对骨髓间充质干细胞成骨分化ALP与骨钙素(OSTEOCALCIN BGP)基因表达的影响
    3.3 ALN/HA/CS支架对骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响
4 讨论
    4.1 关节软骨结构特点与传统修复
    4.2 软骨组织工程
    4.3 新型阿仑膦酸-羟基磷灰石-壳聚糖软骨支架
    4.4 阿仑膦酸-羟基磷灰石-壳聚糖对骨髓间充质干细胞成骨、成软骨分化的影响
5 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料的研究进展[J]. 徐小燕,刘涛涛,郑军,李岩.  材料导报. 2012(15)
[2]壳聚糖抗菌生物医用膜在烧伤创面中的临床应用[J]. 袁丹波.  微生物学免疫学进展. 2012(01)
[3]成骨细胞胞内胞外碱性磷酸酶含量比较[J]. 张英,袁月,孙富丽.  中国医科大学学报. 2011(10)
[4]纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架材料复合大鼠成骨细胞培养的实验研究[J]. 徐培,陆钰,吴海珍,赵玫,汪学华,王鑫,储岚岚.  安徽医药. 2011(07)
[5]阿仑膦酸钠对大鼠成骨细胞增殖的影响[J]. 蒋四清,李锋,李光辉,陈安民.  中国矫形外科杂志. 2005(12)
[6]阿仑磷酸钠对成骨细胞增殖、分泌和成骨功能的影响[J]. 金群华,田丰年,朱建华,陆志东,陈志荣.  中华实验外科杂志. 2004(01)
[7]多孔羟基磷灰石生物陶瓷的进展[J]. 郑岳华,侯小妹,杨兆雄.  硅酸盐通报. 1995(03)
[8]自体骨髓间充质干细胞复合壳聚糖/羟基磷灰石支架修复兔膝骨软骨缺损[J]. 王文良,张华亮,初殿伟,王彦鹏,周洲,王景贵.  中华骨科杂志. 2009 (01)



本文编号：3522762