自组装短肽水凝胶联合hAMSCs对小鼠创面愈合的研究

发布时间：2021-12-02 02:21

　　目的:探讨人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs）在RADA和RGD短肽水凝胶中的生长状况、增殖能力、细胞周期、干性基因表达及分化,研究水凝胶联合hAMSCs对小鼠全皮层缺损创面的修复效应和机制。方法:1.对RADA和RGD水凝胶分别采用透射电镜观察短肽水凝胶微观结构、圆二色光谱和流变学分析行表征检测;2.采用两酶分步消化法分离hAMSCs,并行贴壁培养、纯化细胞至P3代建立hAMSCs与RADA和RGD水凝胶细胞支架复合体以及二维对照组模型,观察各组细胞形态;采用Live/Dead检测hAMSCs在支架中的存活情况;CCK-8检测hAMSCs在水凝胶支架中的生长增殖情况;流式细胞术检测各组细胞周期情况;采用qPCR对比分析hAMSCs于水凝胶及2D环境中培养第4天时干性、生长因子、炎性因子和成骨分化基因的mRNA表达水平。3.将C57小鼠（N=120）随机分为六组:无血清培养基（对照）组,RADA水凝胶组,RGD水凝胶组,hAMSCs移植组,RADA+hAMSCs移植组和RGD+hAMSCs移植组。造模后第4,8,... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：99 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

%的RADA和RGD水凝胶成胶图

图 1.2 自组装短肽溶液的透射电镜图（×200000）Fig 1.2 TEM images of 0.05% of self-assembling peptide in aqueous solution.（A）RADA;(B)RGD.Scale bar:100nm.2.3 圆二色谱图圆二色谱可用于检测蛋白和短肽材料的空间结构信息，RADA 和 RGD 溶液在218nm 处有负峰，在 197nm 处有一个正峰，说明这两种短肽的二级结构为β折叠，其中 RADA 中的β折叠结构比 RGD 更多。

图 1.2 自组装短肽溶液的透射电镜图（×200000）1.2 TEM images of 0.05% of self-assembling peptide in aqueous so（A）RADA;(B)RGD.Scale bar:100nm.图可用于检测蛋白和短肽材料的空间结构信息，RADA 和峰，在 197nm 处有一个正峰，说明这两种短肽的二级结的β折叠结构比 RGD 更多。

【参考文献】：
期刊论文
[1]β折叠型自组装短肽水凝胶特性及在神经组织工程中的应用前景[J]. 卫巍,刘燕飞,何洋,张玲.  中国组织工程研究. 2018(10)
[2]短肽RADA16-1自组装纤维长度与止血关系研究[J]. 李佳楠,钟小忠,王婷.  江汉大学学报(自然科学版). 2013(05)
[3]再生胰腺提取物诱导人羊膜间充质干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞[J]. 张艳梅,王佃亮,曾虹燕,王烈明,孙晋伟,张珍,东莎莎.  生物工程学报. 2012(02)



本文编号：3527532