以天然骨基质明胶/软骨细胞外基质复合山羊椎间盘细胞构建一体化组织工程椎间盘的实验研究

发布时间：2021-12-17 02:45

　　目的：探讨以骨基质明胶/软骨细胞外基质复合山羊椎间盘细胞构建一体化组织工程椎间盘的可行性。方法：1.取猪股骨,将猪股骨近端松质骨经脱钙、脱细胞处理后,制备外径为10mm、内径5mm、高3mm的骨基质明胶环；刮取猪股骨近端软骨,经研磨、脱细胞处理制成匀浆；Hoechst33258染色检测两种支架材料脱细胞情况,再将软骨匀浆注入骨基质明胶环中央,经冷冻干燥、交联后制备成一体化纤维环-髓核双相支架；扫描电镜、HE、天狼星红染色观察支架结构；检测支架的孔隙率、吸水率以及敷水状态的压缩力学性能（力学性能与正常猪尾椎间盘对比）。2.消化分离山羊纤维环细胞及髓核细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,同时对第1代细胞进行甲苯胺蓝、番红O染色以及Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色；将第1代纤维环细胞及髓核细胞分别以密度1×107个/ml接种至支架的纤维环相及髓核相上,体外培养2d,倒置显微镜、扫描电镜、组织学染色观察细胞在支架上的粘附情况,LIVE/DEAD染色观察细胞在支架上的活性；细胞支架复合物分别培养2w和4w,Real-time PCR技术检测支架中椎间盘细胞的Ⅰ、Ⅱ型胶原、聚集蛋白多糖的基因表达水平（正常... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、以骨基质明胶及软骨细胞外基质构建一体化纤维环-髓核双相支架的实验研究
    对象和方法
    结果
    讨论
    小结
二、椎间盘细胞的分离培养及一体化椎间盘支架的细胞生物相容性评估
    对象和方法
    结果
    讨论
    小结
三、以天然骨基质明胶/软骨细胞外基质复合山羊椎间盘细胞裸鼠体内异位构建组织工程椎间盘的实验研究
    对象和方法
    结果
    讨论
    小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]重组腺相关病毒介导人端粒酶逆转录酶基因转染对人髓核细胞功能的影响[J]. 吴剑宏,阮狄克,王德利,张超,何勍,王超锋,张燕,辛洪奎,顾韬,徐成,刘玥.  中国脊柱脊髓杂志. 2012(09)
[2]肺内输入骨髓间充质干细胞对肺气肿大鼠慢性炎症的调控[J]. 管小俊,宋琳,郭雪君,徐卫国.  中国呼吸与危重监护杂志. 2011(06)
[3]软骨细胞外基质与壳聚糖复合制备组织工程软骨支架及其性能研究[J]. 杨强,彭江,卢世璧,夏群,马信龙,胡永成,郭全义,汪爱媛,赵斌,张莉,许文静.  中华骨科杂志. 2011 (08)
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[5]骨髓基质干细胞与软骨脱细胞基质多孔支架异位构建组织工程化软骨的实验研究[J]. 杨强,彭江,卢世璧,郭全义,汪爱媛,姚军,赵斌,张莉,许文静.  中华骨科杂志. 2010 (04)
[6]脱矿脱细胞骨基质环支架体外构建组织工程化椎间盘纤维环[J]. 潘勇,周跃,郝勇,李长青,初同伟,张峡,王卫东,王建.  中国脊柱脊髓杂志. 2009(06)
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[8]新型脱细胞软骨基质三维多孔支架的制备[J]. 杨强,彭江,卢世璧,孙明学,黄靖香,张莉,许文静,赵斌,眭祥,姚军,袁玫.  中国修复重建外科杂志. 2008(03)
[9]天然细胞外基质及其在组织工程中的应用[J]. 刘鹤莉,顾汉卿.  透析与人工器官. 2006(03)
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本文编号：3539265