丝素肽的制备及其对细胞的作用研究
发布时间：2021-12-22 02:14
丝素蛋白是一种天然高分子纤维蛋白,从蚕茧中提取获得,含有丰富的氨基酸,具备良好的生物相容性、亲和性和可降解性能等。丝素肽是由丝素蛋白水解所得,水解过程使其结构发生了破坏,其有效价值得以充分体现。随着丝素肽的应用的不断开发,应用愈加广泛,不同领域对丝素肽的要求也不尽相同。本课题以均分子量作为指标制备不同的丝素肽,以体外培养细胞系人肝癌细胞HepG2作为模型,对三组丝素肽可能产生的对细胞的作用影响及相关机制进行初步研究,为以后工业大规模生产丝素肽提供检测指标,也为其应用方向选择提供思路。本课题首先对丝素蛋白和丝素肽的细胞毒性进行初步研究,结果显示丝素蛋白无细胞毒性,而酶解后的丝素肽具有一定的抑制细胞生长作用。为了进一步探究丝素肽对细胞的作用,采用卷式膜制得均分子量不同的三组丝素肽SFPⅠ、SFPⅡ、SFPⅢ（Mn=1531Da、1398Da和1134Da）为后续研究做准备。采用MTT细胞毒性实验检测三组丝素肽对HepG2细胞的活力影响,同时选出合适的受试浓度做后续研究;细胞凋亡检测采用Hoechst 33258荧光染色和流式Annexin V/PI双染法,凋亡因子含量测定和荧光定量PCR检...
【文章来源】：重庆理工大学重庆市
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
荧光显微镜观察SF(A)与SFP（B）处理后HepG2细胞Fig.2.2FluorescencemicroscopeobservationofHepG2cellstreatedwithSF(A)andSFP(B)
采用考马斯亮蓝染色液室温染色 30min，然后条带后取出并拍照。透色谱法检测丝素肽分子量样品 SFPⅠ、SFPⅡ、SFPⅢ分别溶解于蒸馏水中，配制成，然后过滤。流动相为 0.1N NaNO3+0.06%NaN3水溶液 0.6mL/min，柱温 35℃。与讨论量不同的三组丝素肽为制得的均分子量不同的三组丝素肽 SFPⅠ、SFPⅡ、SF
图 3.2 三组丝素肽 SDS-PAGE 电泳图S-PAGE electrophoresis of three groups of silk fib 蛋白凝胶电泳图（图 3.2）可知，制得的子量区间。SFP Ⅰ在 17KD 以下分子量区间 以下的分子量区间范围均有分布，而 SFP确实制得了均分子量不同的三组丝素肽。分子量的测定C）是测定分子量和其分布最常用的快速有。其色谱柱内填充的是多孔性填料（凝胶孔和通道。当分析的样品通过溶剂进入色，较大的分子只进入较大孔中，而较小的分，不同大小的分子就得到了分离，较大的分
【参考文献】：
期刊论文
[1]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[2]组织工程支架材料:特征及在组织工程中的应用[J]. 葛振,邹刚,刘毅,张骏,李豫皖,董立明. 中国组织工程研究. 2018(26)
[3]MTT法检测夏枯消瘤丸含药血清对人肺癌A549细胞的实验研究[J]. 王素娟,王恺,侯燕琳. 山西中医学院学报. 2018(01)
[4]骨髓间充质干细胞移植对丙烯酰胺中毒大鼠脊髓组织细胞凋亡的影响[J]. 孙经淞,周雪颖,曲淑贤,步同静,李双月. 中国组织工程研究. 2018(05)
[5]多肽类药物抗肿瘤药理研究进展[J]. 王美飒,阎昭. 天津医科大学学报. 2017(04)
[6]抗病毒多肽药物的研究进展[J]. 徐君,周长林,窦洁. 药物生物技术. 2017(03)
[7]再生丝素蛋白纤维及其在生物医用材料中的研究进展[J]. 吴惠英. 丝绸. 2017(03)
[8]凝胶渗透色谱法测定含氟聚合物的相对分子质量及其分布[J]. 李俊玲,李慧,宋亦兰,徐晓玲,王雯霞,庹洪,李斌,陈立义. 有机氟工业. 2017(01)
[9]抗肿瘤多肽药物的作用机制及研究进展[J]. 王淑静,刘欢,赵建凯,任爽,孙薇薇,张文君,张家宁,张寒. 药学研究. 2016(12)
[10]丝素肽对过氧化氢致A549细胞损伤的修复作用[J]. 朱震,王小娟,邓晗依,李春春,银华,安艳. 环境与职业医学. 2016(03)
硕士论文
[1]周村水库藻类特征及其在混合胁迫条件下的生长衰亡规律[D]. 赵洪.扬州大学 2014
[2]蚕丝蛋白肽抗肿瘤与抗氧化作用研究[D]. 黄慧明.山东农业大学 2012
[3]丝素肽的酶法制备及其生物活性的研究[D]. 罗美琪.华南理工大学 2012
[4]基于制备环境的家蚕丝胶蛋白分子形态构象与生物学性能研究[D]. 张瑶琴.重庆理工大学 2011
本文编号：3545589
【文章来源】：重庆理工大学重庆市
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
荧光显微镜观察SF(A)与SFP（B）处理后HepG2细胞Fig.2.2FluorescencemicroscopeobservationofHepG2cellstreatedwithSF(A)andSFP(B)
采用考马斯亮蓝染色液室温染色 30min，然后条带后取出并拍照。透色谱法检测丝素肽分子量样品 SFPⅠ、SFPⅡ、SFPⅢ分别溶解于蒸馏水中，配制成，然后过滤。流动相为 0.1N NaNO3+0.06%NaN3水溶液 0.6mL/min，柱温 35℃。与讨论量不同的三组丝素肽为制得的均分子量不同的三组丝素肽 SFPⅠ、SFPⅡ、SF
图 3.2 三组丝素肽 SDS-PAGE 电泳图S-PAGE electrophoresis of three groups of silk fib 蛋白凝胶电泳图（图 3.2）可知，制得的子量区间。SFP Ⅰ在 17KD 以下分子量区间 以下的分子量区间范围均有分布，而 SFP确实制得了均分子量不同的三组丝素肽。分子量的测定C）是测定分子量和其分布最常用的快速有。其色谱柱内填充的是多孔性填料（凝胶孔和通道。当分析的样品通过溶剂进入色，较大的分子只进入较大孔中，而较小的分，不同大小的分子就得到了分离，较大的分
【参考文献】：
期刊论文
[1]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[2]组织工程支架材料:特征及在组织工程中的应用[J]. 葛振,邹刚,刘毅,张骏,李豫皖,董立明. 中国组织工程研究. 2018(26)
[3]MTT法检测夏枯消瘤丸含药血清对人肺癌A549细胞的实验研究[J]. 王素娟,王恺,侯燕琳. 山西中医学院学报. 2018(01)
[4]骨髓间充质干细胞移植对丙烯酰胺中毒大鼠脊髓组织细胞凋亡的影响[J]. 孙经淞,周雪颖,曲淑贤,步同静,李双月. 中国组织工程研究. 2018(05)
[5]多肽类药物抗肿瘤药理研究进展[J]. 王美飒,阎昭. 天津医科大学学报. 2017(04)
[6]抗病毒多肽药物的研究进展[J]. 徐君,周长林,窦洁. 药物生物技术. 2017(03)
[7]再生丝素蛋白纤维及其在生物医用材料中的研究进展[J]. 吴惠英. 丝绸. 2017(03)
[8]凝胶渗透色谱法测定含氟聚合物的相对分子质量及其分布[J]. 李俊玲,李慧,宋亦兰,徐晓玲,王雯霞,庹洪,李斌,陈立义. 有机氟工业. 2017(01)
[9]抗肿瘤多肽药物的作用机制及研究进展[J]. 王淑静,刘欢,赵建凯,任爽,孙薇薇,张文君,张家宁,张寒. 药学研究. 2016(12)
[10]丝素肽对过氧化氢致A549细胞损伤的修复作用[J]. 朱震,王小娟,邓晗依,李春春,银华,安艳. 环境与职业医学. 2016(03)
硕士论文
[1]周村水库藻类特征及其在混合胁迫条件下的生长衰亡规律[D]. 赵洪.扬州大学 2014
[2]蚕丝蛋白肽抗肿瘤与抗氧化作用研究[D]. 黄慧明.山东农业大学 2012
[3]丝素肽的酶法制备及其生物活性的研究[D]. 罗美琪.华南理工大学 2012
[4]基于制备环境的家蚕丝胶蛋白分子形态构象与生物学性能研究[D]. 张瑶琴.重庆理工大学 2011
本文编号：3545589
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3545589.html
