定向冷冻明胶支架的原位细菌纤维素培养及支架中的细胞行为
发布时间：2022-01-02 08:21
本文以明胶（G）为原料,采用定向冷冻干燥法制备出定向明胶支架,通过原位培养技术在支架引入细菌纤维素（BC）纳米纤维网络,构筑出兼具微米多孔和纳米纤维结构的BC基定向微/纳支架,并使用场发射扫描电镜（FE-SEM）、激光共聚焦显微镜（CLSM）等对支架的微观结构生物学性能进行了表征。结果表明:与非定向支架的多孔结构相比,定向支架具有径向多孔和轴向通道结构,呈现各向异性,这种通道结构有利于氧气和营养物质的输送,能有效促进细胞生长。
【文章来源】：合成技术及应用. 2020,35(02)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
原位培养法制备定向G/BC支架的示意图
在扫描电镜下对原位培养前的明胶支架进行观察,结果如图2所示。从图2(a)和(b)中可以看到,非定向明胶支架为均匀多孔结构,孔径大小在 100～300 μm范围内,符合组织工程支架的基本要求。从图2(c)和(d)中可以看到,定向明胶支架的表面为多孔结构,截面为通道结构,呈现出明显的各向异性。这是因为在传统的冷冻干燥法中,不存在温度梯度,各个方向上冰晶的生长都是一致的,干燥后得到的孔洞结构具有各向同性,而定向冷冻干燥法对冷冻环境进行了改变,形成某特定方向上的温度梯度,使得晶核朝指定方向生长,干燥后得到的孔洞结构具有各向异性。在扫描电镜下对原位培养7天后的G/BC复合支架进行观察,结果如图3所示。从图3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架内的BC纳米纤维主要集中分布在孔洞内壁上,这是由于BC上的羟基可以与明胶支架上氨基形成氢键,从而提高BC纳米纤维在明胶支架表面的粘附性,但因为支架的连通性较差,BC长入的深度也较浅[13]。从图3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片层间也分布有BC纳米纤维,这是因为定向支架具有径向多孔和轴向通道结构,这种各向异性的结构一方面能够给木醋杆菌提供丰富的吸附位点,另一方面还可以为木醋杆菌的生物发酵提供充足的氧气和营养物质运输通道,有利于它的生长、迁移和繁衍,从而促进BC的长入。
在扫描电镜下对原位培养7天后的G/BC复合支架进行观察,结果如图3所示。从图3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架内的BC纳米纤维主要集中分布在孔洞内壁上,这是由于BC上的羟基可以与明胶支架上氨基形成氢键,从而提高BC纳米纤维在明胶支架表面的粘附性,但因为支架的连通性较差,BC长入的深度也较浅[13]。从图3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片层间也分布有BC纳米纤维,这是因为定向支架具有径向多孔和轴向通道结构,这种各向异性的结构一方面能够给木醋杆菌提供丰富的吸附位点,另一方面还可以为木醋杆菌的生物发酵提供充足的氧气和营养物质运输通道,有利于它的生长、迁移和繁衍,从而促进BC的长入。2.2.2 细胞在不同G/BC复合支架的增殖行为分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同孔径聚乳酸-壳聚糖-明胶支架对成纤维细胞粘附效果的研究[J]. 刘冰,钟代琴,王永兰,靳趁心,姚芳莲. 口腔医学研究. 2013(02)
[2]细菌纤维素/明胶支架材料在成骨细胞体外培养中的应用[J]. 刘继光,王艳萍,李慕勤,王静,万怡灶,王佳琦. 中国体视学与图像分析. 2011(03)
本文编号：3563836
【文章来源】：合成技术及应用. 2020,35(02)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
原位培养法制备定向G/BC支架的示意图
在扫描电镜下对原位培养前的明胶支架进行观察,结果如图2所示。从图2(a)和(b)中可以看到,非定向明胶支架为均匀多孔结构,孔径大小在 100～300 μm范围内,符合组织工程支架的基本要求。从图2(c)和(d)中可以看到,定向明胶支架的表面为多孔结构,截面为通道结构,呈现出明显的各向异性。这是因为在传统的冷冻干燥法中,不存在温度梯度,各个方向上冰晶的生长都是一致的,干燥后得到的孔洞结构具有各向同性,而定向冷冻干燥法对冷冻环境进行了改变,形成某特定方向上的温度梯度,使得晶核朝指定方向生长,干燥后得到的孔洞结构具有各向异性。在扫描电镜下对原位培养7天后的G/BC复合支架进行观察,结果如图3所示。从图3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架内的BC纳米纤维主要集中分布在孔洞内壁上,这是由于BC上的羟基可以与明胶支架上氨基形成氢键,从而提高BC纳米纤维在明胶支架表面的粘附性,但因为支架的连通性较差,BC长入的深度也较浅[13]。从图3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片层间也分布有BC纳米纤维,这是因为定向支架具有径向多孔和轴向通道结构,这种各向异性的结构一方面能够给木醋杆菌提供丰富的吸附位点,另一方面还可以为木醋杆菌的生物发酵提供充足的氧气和营养物质运输通道,有利于它的生长、迁移和繁衍,从而促进BC的长入。
在扫描电镜下对原位培养7天后的G/BC复合支架进行观察,结果如图3所示。从图3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架内的BC纳米纤维主要集中分布在孔洞内壁上,这是由于BC上的羟基可以与明胶支架上氨基形成氢键,从而提高BC纳米纤维在明胶支架表面的粘附性,但因为支架的连通性较差,BC长入的深度也较浅[13]。从图3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片层间也分布有BC纳米纤维,这是因为定向支架具有径向多孔和轴向通道结构,这种各向异性的结构一方面能够给木醋杆菌提供丰富的吸附位点,另一方面还可以为木醋杆菌的生物发酵提供充足的氧气和营养物质运输通道,有利于它的生长、迁移和繁衍,从而促进BC的长入。2.2.2 细胞在不同G/BC复合支架的增殖行为分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同孔径聚乳酸-壳聚糖-明胶支架对成纤维细胞粘附效果的研究[J]. 刘冰,钟代琴,王永兰,靳趁心,姚芳莲. 口腔医学研究. 2013(02)
[2]细菌纤维素/明胶支架材料在成骨细胞体外培养中的应用[J]. 刘继光,王艳萍,李慕勤,王静,万怡灶,王佳琦. 中国体视学与图像分析. 2011(03)
本文编号：3563836
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