环糊精聚合物结合核酸探针检测小分子和DNA的研究

发布时间：2017-05-11 09:00

  本文关键词：环糊精聚合物结合核酸探针检测小分子和DNA的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：环糊精聚合物由于具有协同效应、交联剂效应、邻基效应及多价结合效应，表现出比环糊精单体更强的客体分子识别能力。将环糊精聚合物应用于分析检测，可望增强检测信号，提高检测灵敏度。基于环糊精聚合物的荧光增强效应，本论文发展了基于环糊精聚合物和核酸探针的复合荧光探针，，包括以下三部分内容： 1.制备了四种环糊精聚合物，包括线型β-环糊精聚合物（L-β-CDP）、线型γ-环糊精聚合物（L-γ-CDP）、吊铃状β-环糊精聚合物（P-β-CDP）、吊铃状γ-环糊精聚合物（P-γ-CDP），这些环糊精聚合物能够与双标芘DNA链（dPy-DNA）形成复合物探针。考察了这些探针用于金刚烷胺检测的可行性，结果表明，四种复合物探针中，P-γ-CDP/dPy-DNA复合物探针对金刚烷胺的检测灵敏度最高，可用于金刚烷胺的定量检测。该方法检测下限为0.1mmol/L，同时表现出良好的特异性。 2.基于胆固醇和双标芘DNA链与吊铃状β-环糊精聚合物的竞争结合作用，以及环糊精聚合物的荧光增强效应，发展了一种检测胆固醇的荧光开关探针。双标芘DNA链与吊铃状β-环糊精聚合物形成复合物探针，荧光得到显著增强；当胆固醇存在时，胆固醇与环糊精聚合物竞争结合，双标芘DNA链被释放出来，使得复合物探针的荧光被部分猝灭，从而实现对胆固醇的高灵敏检测。该方法检测下限为0.1μmol/L，特异性好。 3.基于线型β-环糊精聚合物的荧光增强效应发展了一种DNA检测的新方法。线型β-环糊精聚合物能够与双标芘DNA链形成复合物探针，荧光得到显著增强；当体系中存在目标链时，目标链与双标芘DNA链竞争结合，破坏复合物探针，使得复合物探针的荧光被部分猝灭，荧光强度降低。基于这一机理，实现了肿瘤相关基因p53DNA的定量检测。该工作为环糊精聚合物在检测DNA方面的应用提供了新的思路。
【关键词】：环糊精聚合物 核酸探针 胆固醇 金刚烷胺 p53DNA
【学位授予单位】：湖南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318;R3411
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 本文所用英文缩略词表11-12
• 第1章 绪论12-23
• 1.1 环糊精及环糊精聚合物的概念12-14
• 1.2 环糊精聚合物的制备14-15
• 1.2.1 线型环糊精聚合物的制备14
• 1.2.2 吊铃状环糊精聚合物的制备14
• 1.2.3 项链状环糊精聚合物的制备14-15
• 1.3 环糊精聚合物的性能15-16
• 1.3.1 协同效应15
• 1.3.2 邻基效应15
• 1.3.3 交联剂效应15-16
• 1.3.4 多价结合效应16
• 1.4 环糊精聚合物在生物医学方面的应用16-22
• 1.4.1 环糊精聚合物在分析检测方面的应用16-20
• 1.4.2 环糊精聚合物在分离纯化方面的应用20
• 1.4.3 环糊精聚合物在基因载体方面的应用20-21
• 1.4.4 环糊精聚合物在药物运输方面的应用21-22
• 1.5 本论文拟开展的工作22-23
• 第2章 基于环糊精聚合物的金刚烷胺检测研究23-37
• 2.1 前言23
• 2.2 实验部分23-29
• 2.2.1 试剂和仪器23-26
• 2.2.2 线型环糊精聚合物的合成26
• 2.2.3 吊铃状环糊精聚合物的合成26-27
• 2.2.4 环糊精聚合物的表征27-28
• 2.2.5 环糊精聚合物荧光增强效应的考察28
• 2.2.6 复合物探针检测金刚烷胺可行性的考察28
• 2.2.7 金刚烷胺检测灵敏度与特异性的考察28-29
• 2.3 结果与讨论29-36
• 2.3.1 金刚烷胺检测原理29-30
• 2.3.2 环糊精聚合物的合成30-31
• 2.3.3 环糊精聚合物的表征31-32
• 2.3.4 环糊精聚合物荧光增强效应的考察32-33
• 2.3.5 复合物探针检测金刚烷胺可行性的考察33-34
• 2.3.6 金刚烷胺的检测34-35
• 2.3.7 特异性考察35-36
• 2.4 小结36-37
• 第3章 基于吊铃状环糊精聚合物的荧光增强效应检测胆固醇37-49
• 3.1 前言37-38
• 3.2 实验部分38-40
• 3.2.1 试剂和仪器38-39
• 3.2.2 复合物探针检测胆固醇可行性的考察39-40
• 3.2.3 实验条件的优化40
• 3.2.4 胆固醇的定量检测40
• 3.2.5 特异性考察40
• 3.3 结果与讨论40-48
• 3.3.1 胆固醇检测原理40-41
• 3.3.2 复合物探针用于检测胆固醇可行性的考察41-44
• 3.3.3 实验条件的优化44-47
• 3.3.4 胆固醇的定量检测47
• 3.3.5 特异性考察47-48
• 3.4 小结48-49
• 第4章 基于线型环糊精聚合物的荧光增强效应检测 p53 DNA49-57
• 4.1 前言49
• 4.2 实验部分49-51
• 4.2.1 试剂和仪器49-50
• 4.2.2 DNA 检测可行性的考察50
• 4.2.3 实验条件的优化50-51
• 4.2.4 不同长度 cDNA 对复合物影响51
• 4.2.5 DNA 检测及特异性考察51
• 4.3 结果与讨论51-55
• 4.3.1 DNA 检测原理51-52
• 4.3.2 DNA 检测的可行性52-53
• 4.3.3 实验条件的优化53-54
• 4.3.4 不同长度 cDNA 对复合物影响54-55
• 4.3.5 DNA 检测55
• 4.4 小结55-57
• 结论57-58
• 参考文献58-68
• 致谢68

【参考文献】

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  本文关键词：环糊精聚合物结合核酸探针检测小分子和DNA的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：356887