人体红细胞的水凝胶微纤维封装低温保存研究

发布时间：2022-01-06 00:33

　　低温保存技术发展至今已成功在理论和实践中取得了进展。人体红细胞的长期低温保存对调节血液供需平衡,正常开展输血工作和保存稀有血型有着重要作用。迄今为止,人体红细胞的低温保存方法发展已较为成熟并成功应用于临床,主要包括4℃低温冷藏和高甘油（Gly）慢速冷冻保存。低温冷藏法的存储时间太短,冷链运输成本高,不适合在特殊地区使用。慢速冷冻法需使用高浓度的Gly作为低温保护剂（CPA）,增加了临床操作的复杂度和难度,对红细胞的低温保存和输血带来了诸多不便。因此,寻找一种低温保存红细胞的新方法来降低CPA浓度具有探究价值。在此课题中:（一）利用低甘油快速冷冻保存法进行红细胞低温保存,探究CPA的种类和浓度对红细胞低温保存的影响。实验结果表明,添加海藻糖（Tre）可以提高红细胞的存活率。（二）使用已广泛应用于低温保存研究中的海藻酸盐水凝胶,提出基于水凝胶微纤维封装技术的红细胞低温保存新方法。实验结果表明,在使用超低浓度甘油（≤5%（w/v））作为CPA时,基于水凝胶微纤维封装技术的保存方法可以提高红细胞存活率。使用5%Gly+0.3 mol/L Tre作为CPAs时,红细胞存活率可提高到约80%。此外... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．３红细胞存储病变［２５］??１．１．２常见的水凝胶材料??

］和普朗克尼［５９，?６０］等。??０?ｄ?？??＇?＇？一、?—、??ｔｖｍｅｔｒ＊、ｊ?＼?／????＇ＶＰ??ｉ?＿?＇秩?ＡＰｐ？ｃ．＿ｓ?广寸‘－厂一??＼?ｏｆＡＩｕｉｉｉａｒｃ?／?—??ｐＪＺ、６６—?＾）＝二零??？ｎ＾ｔｕ＾ｄ?Ｉ．Ｖ—?？一??＼?＇、：：：、?暴＇＾??、?Ｃｔｔｅｉｍ??八、??｝＞？？?＼?＾?ｙｍｍｍ?＼??｜?｜?Ｉ??一?＇?＿Ｊ?■，＇ｔ＾ｊ??ｗ??■Ｐ?ａ??＊ｗｆｃ？ｒ？??图１．４基于海藻酸盐的水凝胶的应用［６１］??海藻酸盐水凝胶因为可以使细胞固定化，所以具有很高的适用性。海藻酸盐??水凝胶的各种应用如图１．４所示。海藻酸盐是一种天然的多糖，通常从海藻中提??取，因此产量丰厚，生物相容性好，常被作为封装细胞的水凝胶材料［３６］。在保??持细胞活力和功能的生理条件下，它可与某一些＋２或＋３价的离子（例如：Ｃａ２＋，??Ｂａ２＋和Ｓｒ２—等）交联配制成具有高含水量的不同软弹性的海藻酸盐水凝胶［６２］。??通常情况下，交联可以直接在室温中进行，交联过程较为温和，交联剂对细胞毒??性也比较小，因此得到的水凝胶是具有良好生物相容性的，可以专用于特定的生??物医学和细胞应用［６３］。尤其对于基于微囊化技术的低温保存，各种海藻酸盐水??凝胶胶囊在包裹活细胞，聚集体和组织等物质上展示出了很高的效率，与传统方??６??

ｗａｒ?＇们丨?ｕｒｙ??￥＃＊ｔｅｃ１ｋｍ?ａｎｆｌ?ｊｏｋｉｎｇ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ｝?ｆｅＰｅｃｔ－ｖｅ?４?ｕｆＫｆｏｆｗｌ?＿＿＿?ＪＺ￣￣￣７￣ＴＺＺ７??０ｐａｍｔｔａ，ｔ，〇ｎ?ｍｏｔｉｏｎ?ｏｔ?ＣＰＡ?ｒ＾Ｃ二ｍｏｏｔ?｜?［?ｒｅｗａ＾＾ｐ??＾?Ｒｅｍｏｖａｉ?ｏ＊?ＣＰＡ??（ｂ）?Ｔｗｏ?Ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?Ｃｒｙｏｉｎｊｕｒｉｅｓ??３７?°Ｃ?０?°Ｃ?＾??．ｆ、Ｏｓｍｏｔｉｃ?Ｉｎｊｕｒｙ??？?Ｆｒｅｅｚｉｎｇ?：??图１．５?（ａ）低温保存的步骤及对低温损伤的优化［７］，?（ｂ）两种低温保存损伤机制［６６］。??由于细胞低温损伤的存在，低温保存不只是将生物材料直接放置在低温环境??中，而是需要一些特殊的化学试剂来辅助保存以减小低温损伤，即ＣＰＡ。低温保??存的一般步骤是：１）在降温前将ＣＰＡ与细胞混合进行预处理；２）将细胞按程??序降温至所需低温开始保存；３）解冻复温保存的细胞；４）从解冻后的细胞去除??ＣＰＡ［７，?７１］。细胞的冷冻过程在ＣＰＡ存在的情况下发生改变，来控制水输送、成??核和冰晶的生长速度［１１］。ＣＰＡ的保护作用可能存在于整个低温保存过程中。因??此，使用适当的ＣＰＡ对于提高样品低温保存后的生存能力极其关键丨１１］。ＣＰＡ根??据是否可以扩散到细胞内部，而分成两大类．？渗透性ＣＰＡ和非渗透性ＣＰＡ。??渗透性ＣＰＡ可以通过扩散进入细胞内部，一般只有渗透到胞内的渗透性ＣＰＡ??才会在低温保存过程中对细胞产生保护作用。常见的渗透性ＣＰＡ有：二甲亚砜、??甘油、丙三醇、乙二醇等。不同的渗透性ＣＰＡ有不同的细胞保护机制，常见的??作用机制如下

【参考文献】：
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博士论文
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本文编号：3571354