去细胞/再细胞策略优化与衰竭器官（肝）功能替代应用研究
发布时间：2022-01-10 01:53
终末期肝病（End-stage liver disease,ESLD）是一种临床常见重大疾病,主要包括急性肝衰竭和慢性肝硬化。肝移植是唯一治疗手段。然而,肝源短缺是面临的最大难题。生物组织工程为解决这一难题提供了新方向。介于去细胞化（Decellularization）/再细胞化（Recellularization）策略可以完整保留器官（肝）骨架,故亦成为当今重要生命器官如肝、胰、心、胆、肺、肾等再造首选技术。来源于正常肝脏去细胞支架（Na?ve decellularized liver scaffold,nDLS）缺乏相关活性物质,故优化支架材料包括nDLS是目前学术界尚待解决的问题。本研究采用再生去细胞肝脏活性支架材料解决这一问题。我们研究显示,采用再生肝脏去细胞支架（Regenerative decellularized liver scaffold,rDLS）,使其拥有肝再生微环境,与nDLS相比,提高种子细胞存活、促进血流通畅和成（肝）器官潜能。1 rDLS“天然肝再生微环境”特性将正常动物肝切除30-55%体积右叶后,体内保留3-5天后,取出在体外用洗涤剂脱去细胞。与nDL...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：129 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
制备正常支架和再生支架
第 3 章 再生支架（rDLS）制备和生物学特性评估量为 7.175±0.0848 ng/mg dry weigh（P=0.019），见图 3.2 Bc，获得的 DNA 的糖凝胶电泳结果显示正常肝脏中的 DNA 可以检测 DNA 条带，而 rDLS 支架检测到 DNA 条带（图 3.2 Bd）。利用扫描电镜对 rDLS 和正常肝脏的超微结构观察，相比于正常组织（图 3.3A），可见 rDLS 呈现蜂窝状结构（图 3.3 B）数据表明，制备的 rDLS 细胞去除彻底，ECM 结构完整。rDLS 的 ECM 中有的空间进行再细胞化。
制备的 rDLS 细胞去除彻底，ECM 结构完整。rDLS 的 行再细胞化。支架完整性和细胞成分评估 A 血管树;B（a-d）H&E 染色（a） DAPI 染色和正常肝脏 DNA 含量（c）及分析（d） grity and cellular constituent assessment of rDLS.AThe vascular tree of rDL DAPI staining (b); DNAcontent of the rDLS (rD1–rD3) and nDLS (N1–N3) as deteranalysis (d).
【参考文献】：
期刊论文
[1]间充质干细胞治疗肝纤维化的现况和前景（英文）[J]. Yang GUO,Bo CHEN,Li-jun CHEN,Chun-feng ZHANG,Charlie XIANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(11)
[2]Mesenchymal stem cell therapy for cirrhosis: Present and future perspectives[J]. Young Woo Eom,Gaeun Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2015(36)
[3]人肝组织脱细胞支架的制备[J]. 郑幸龙,向俊西,吴万权,刘学民,刘雯雁,吕毅. 南方医科大学学报. 2015(07)
[4]口服二乙基亚硝胺诱导建立同系小鼠肝硬化模型[J]. 谭嘉鑫,游逾,曾林立,赖洁娟,张玉君,别平,白莲花. 现代医药卫生. 2015(06)
[5]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[6]Hepatic inflammation and progressive liver fibrosis in chronic liver disease[J]. Albert J Czaja. World Journal of Gastroenterology. 2014(10)
[7]巨噬细胞在肝纤维化中的调控作用[J]. 刘新,娄金丽,孙桂珍. 北京医学. 2014(03)
[8]干细胞移植治疗肝硬化的研究进展[J]. 刘囡,冯义朝,胡丹琼. 延安大学学报(医学科学版). 2012(04)
[9]MSCs分化为功能性肝细胞的研究进展[J]. 张国尊,李春生,张晓岚. 世界华人消化杂志. 2012(14)
[10]自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化研究进展[J]. 刘卫,朱斌. 实用肝脏病杂志. 2011(05)
本文编号：3579836
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：129 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
制备正常支架和再生支架
第 3 章 再生支架（rDLS）制备和生物学特性评估量为 7.175±0.0848 ng/mg dry weigh（P=0.019），见图 3.2 Bc，获得的 DNA 的糖凝胶电泳结果显示正常肝脏中的 DNA 可以检测 DNA 条带，而 rDLS 支架检测到 DNA 条带（图 3.2 Bd）。利用扫描电镜对 rDLS 和正常肝脏的超微结构观察，相比于正常组织（图 3.3A），可见 rDLS 呈现蜂窝状结构（图 3.3 B）数据表明，制备的 rDLS 细胞去除彻底，ECM 结构完整。rDLS 的 ECM 中有的空间进行再细胞化。
制备的 rDLS 细胞去除彻底，ECM 结构完整。rDLS 的 行再细胞化。支架完整性和细胞成分评估 A 血管树;B（a-d）H&E 染色（a） DAPI 染色和正常肝脏 DNA 含量（c）及分析（d） grity and cellular constituent assessment of rDLS.AThe vascular tree of rDL DAPI staining (b); DNAcontent of the rDLS (rD1–rD3) and nDLS (N1–N3) as deteranalysis (d).
【参考文献】：
期刊论文
[1]间充质干细胞治疗肝纤维化的现况和前景（英文）[J]. Yang GUO,Bo CHEN,Li-jun CHEN,Chun-feng ZHANG,Charlie XIANG. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(11)
[2]Mesenchymal stem cell therapy for cirrhosis: Present and future perspectives[J]. Young Woo Eom,Gaeun Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2015(36)
[3]人肝组织脱细胞支架的制备[J]. 郑幸龙,向俊西,吴万权,刘学民,刘雯雁,吕毅. 南方医科大学学报. 2015(07)
[4]口服二乙基亚硝胺诱导建立同系小鼠肝硬化模型[J]. 谭嘉鑫,游逾,曾林立,赖洁娟,张玉君,别平,白莲花. 现代医药卫生. 2015(06)
[5]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[6]Hepatic inflammation and progressive liver fibrosis in chronic liver disease[J]. Albert J Czaja. World Journal of Gastroenterology. 2014(10)
[7]巨噬细胞在肝纤维化中的调控作用[J]. 刘新,娄金丽,孙桂珍. 北京医学. 2014(03)
[8]干细胞移植治疗肝硬化的研究进展[J]. 刘囡,冯义朝,胡丹琼. 延安大学学报(医学科学版). 2012(04)
[9]MSCs分化为功能性肝细胞的研究进展[J]. 张国尊,李春生,张晓岚. 世界华人消化杂志. 2012(14)
[10]自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化研究进展[J]. 刘卫,朱斌. 实用肝脏病杂志. 2011(05)
本文编号：3579836
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