基于还原型氧化石墨烯荧光探针的核糖核酸酶检测分析
发布时间：2022-01-20 22:17
核糖核酸酶A（RNase A）是一种广泛应用于酶学、生物化学、结构生物学等领域研究的工具酶,同时,这种具有有效杀伤肿瘤细胞和抑制HIV-1病毒复制能力的核酸酶可直接作为多种疾病的治疗药物;核糖核酸酶H（RNase H）是一种特异性切割RNA/DNA双链中的核糖核苷酸的核酸内切酶,在调节免疫防御过程及维持真核生物基因组稳定方面具有重要意义。因此,开展两种相关性核酸酶的活性监测不仅能对酶动力学进行分析而且能对酶与疾病之间的关系进行揭示。本论文基于还原型氧化石墨烯（rGO）尺寸小、分散性好、猝灭能力强这些优点,开展了简单、特异、灵敏的核糖核酸酶检测体系构建及其应用研究。主要内容如下:1.基于rGO荧光纳米探针的RNase A酶活性分析方法建立和应用。首先,我们基于rGO和荧光探针构建了一个RNase A活性检测平台。结果表明:该体系的最适还原型氧化石墨烯浓度为8μg/mL,最适反应温度与时间分别为37℃和35 min。体系中RNase A活性的检测下限为0.05 pg/μL。为了验证该方法在实际中的应用性,我们利用该方法考察了不同价态的重金属离子对RNase A活性影响。结果表明:重金属离子...
【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
直接电化学法监测核糖核酸酶活性的原理图
图 1.1 直接电化学法监测核糖核酸酶活性的原理图[35]ato 等人利用金电极和循环伏安法构成的电极传感器来检测该金电极上附着一段核酸序列，包括固定部分、核糖核酸酶点以及与之相邻的作为电化学活性位点的二茂铁脱氧核糖溶液中该传感器电极的电流响应随酶浓度的增加而降低。这测范围为 1.0×10-11~1.0×10-6g/mL，比已有的电化学生物传是，它仍有不直观、信号小等缺点。
图 1.3 基于阳离子聚噻吩衍生物的比色法检测核糖核酸酶 H 活性的原理图[37究表明，带负电荷的单链 DNA 能有效地稳固纳米粒子对抗盐溶特点，2011 年 Xiaoji Xie 等人发展了一种利用纳米金的比色法检性[38]。其原理为：当缓冲液中的 DNA-RNA 双链底物与 HIV-1 R产生单链 DNA 和单链 RNA 片段。之后再将金纳米颗粒加入，切所获得的单链 DNA 和 RNA 片段能够附着在金纳米颗粒的表
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化石墨烯保护的核酸分子探针及其在生物分析中的应用[J]. 崔亮,张薇婷,林晖,朱志,杨朝勇. 厦门大学学报(自然科学版). 2014(05)
[2]Reduced Graphene Oxide Mediated SnO2 Nanocrystals for Enhanced Gas-sensing Properties[J]. Yanhong Chang,Yunfeng Yao,Bin Wang,Hui Luo,Tianyi Li,Linjie Zhi. Journal of Materials Science & Technology. 2013(02)
[3]荧光探针技术在两亲分子有序组合体研究中的应用[J]. 高莉宁,夏慧芸,陈华鑫,邓娟利. 化学通报. 2012(08)
[4]中华眼镜蛇毒核糖核酸酶的分离纯化及其特殊生物学活性[J]. 陶凤云,赵伟,林强,马润宇. 中国生化药物杂志. 2010(03)
[5]中国林蛙卵核糖核酸酶的分离纯化及其抗肿瘤作用[J]. 陶凤云,赵伟,林强,马润宇. 中国生物工程杂志. 2010(05)
[6]人类核糖核酸酶P的研究进展[J]. 宁容,张文军,李红枝. 国际药学研究杂志. 2008(04)
[7]蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽的研究进展[J]. 孔祥辉,张介驰,马庆芳,韩增华,张丕奇,杨志兴. 菌物研究. 2008(02)
[8]核糖核酸酶研究进展[J]. 钱敏,李关荣,鲁成. 蚕业科学. 2004(02)
[9]核糖核酸酶及其在胰腺癌诊断中的应用[J]. 景在平,仲剑平. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 1989(03)
硕士论文
[1]重组核糖核酸酶A的表达和复性研究[D]. 肖文楚.天津大学 2009
本文编号：3599618
【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
直接电化学法监测核糖核酸酶活性的原理图
图 1.1 直接电化学法监测核糖核酸酶活性的原理图[35]ato 等人利用金电极和循环伏安法构成的电极传感器来检测该金电极上附着一段核酸序列，包括固定部分、核糖核酸酶点以及与之相邻的作为电化学活性位点的二茂铁脱氧核糖溶液中该传感器电极的电流响应随酶浓度的增加而降低。这测范围为 1.0×10-11~1.0×10-6g/mL，比已有的电化学生物传是，它仍有不直观、信号小等缺点。
图 1.3 基于阳离子聚噻吩衍生物的比色法检测核糖核酸酶 H 活性的原理图[37究表明，带负电荷的单链 DNA 能有效地稳固纳米粒子对抗盐溶特点，2011 年 Xiaoji Xie 等人发展了一种利用纳米金的比色法检性[38]。其原理为：当缓冲液中的 DNA-RNA 双链底物与 HIV-1 R产生单链 DNA 和单链 RNA 片段。之后再将金纳米颗粒加入，切所获得的单链 DNA 和 RNA 片段能够附着在金纳米颗粒的表
【参考文献】：
期刊论文
[1]氧化石墨烯保护的核酸分子探针及其在生物分析中的应用[J]. 崔亮,张薇婷,林晖,朱志,杨朝勇. 厦门大学学报(自然科学版). 2014(05)
[2]Reduced Graphene Oxide Mediated SnO2 Nanocrystals for Enhanced Gas-sensing Properties[J]. Yanhong Chang,Yunfeng Yao,Bin Wang,Hui Luo,Tianyi Li,Linjie Zhi. Journal of Materials Science & Technology. 2013(02)
[3]荧光探针技术在两亲分子有序组合体研究中的应用[J]. 高莉宁,夏慧芸,陈华鑫,邓娟利. 化学通报. 2012(08)
[4]中华眼镜蛇毒核糖核酸酶的分离纯化及其特殊生物学活性[J]. 陶凤云,赵伟,林强,马润宇. 中国生化药物杂志. 2010(03)
[5]中国林蛙卵核糖核酸酶的分离纯化及其抗肿瘤作用[J]. 陶凤云,赵伟,林强,马润宇. 中国生物工程杂志. 2010(05)
[6]人类核糖核酸酶P的研究进展[J]. 宁容,张文军,李红枝. 国际药学研究杂志. 2008(04)
[7]蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽的研究进展[J]. 孔祥辉,张介驰,马庆芳,韩增华,张丕奇,杨志兴. 菌物研究. 2008(02)
[8]核糖核酸酶研究进展[J]. 钱敏,李关荣,鲁成. 蚕业科学. 2004(02)
[9]核糖核酸酶及其在胰腺癌诊断中的应用[J]. 景在平,仲剑平. 国外医学.临床生物化学与检验学分册. 1989(03)
硕士论文
[1]重组核糖核酸酶A的表达和复性研究[D]. 肖文楚.天津大学 2009
本文编号：3599618
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