两种壳聚糖衍生物在转基因领域的研究

发布时间：2017-05-13 23:07

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【摘要】：壳聚糖（chitosan）是一种有着良好生物相容性、生物可降解性的天然多糖，由于其分子带有正电性，壳聚糖作为转基因载体的潜力令人瞩目。本课题根据壳聚糖的优良性质合成了两种壳聚糖衍生物，并对其进行了理化性质表征与转基因效率的研究。 使用缩水甘油基三甲基氯化铵（Glycidyl TrimethylAmmonium Chloride, GTMAC）与壳聚糖反应，合成了三种不同季铵根取代度（12.4%,28.1%,43.7%）的N-（2-羟丙基三甲基）壳聚糖（N-(2-hydroxy)propyl-3-trimethyl ammonium chitosan chloride,HTCC），，并对HTCC进行了1H NMR、FT-IR、X射线衍射以及热重分析测试。HTCC比壳聚糖的结晶性能和热稳定性均有降低。HTCC样品在溶液中能自发地包覆荧光素酶质粒（pGL3）形成微球。细胞毒性实验的结果显示三种HTCC样品的细胞毒性均远小于聚乙烯亚胺。在以Hela细胞为对象的体外转基因实验中，HTCC样品表现出比壳聚糖更高的转基因效率。HTCC的这些特点显示其发展成为一种新型安全高效的非病毒转基因载体的潜质。 以壳聚糖、乳糖酸、GTMAC为原料，先后将乳糖酸和GTMAC通过共价键结合到壳聚糖的自由氨基上，得到半乳糖基化度13.7%，季铵根取代度30.8%的双功能修饰的肝靶向壳聚糖衍生物（gal-HTCC），继而对其进行了1H NMR、FT-IR、元素分析、X射线衍射的测试。与壳聚糖相比，gal-HTCC的水溶性大为增加。gal-HTCC样品亦能在溶液中自发地包覆荧光素酶质粒（pGL3）形成微球。细胞毒性实验结果显示gal-HTCC样品的毒性亦远低于聚乙烯亚胺。在以HepG2细胞为对象的体外转基因实验中，gal-HTCC样品表现出比壳聚糖与gal-chitosan更高的转基因效率。gal-HTCC的这些特点显示其发展成为安全高效，且具有靶向性的非病毒转基因载体的潜力。
【关键词】：壳聚糖 转基因 季铵化 半乳糖基化 肝靶向性
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 绪论8-19
• 1.1 基因治疗的概述8-12
• 1.2 壳聚糖的概述12-14
• 1.3 壳聚糖及其衍生物用于转基因14-17
• 1.4 课题的意义17-19
• 第二章 季铵根修饰壳聚糖衍生物的转基因效率研究19-35
• 2.1 前言19-20
• 2.2 材料与仪器20-21
• 2.3 实验方法21-26
• 2.4 结果与分析26-33
• 2.5 本章小结33-35
• 第三章 肝靶向性双功能修饰壳聚糖衍生物的转基因效率研究35-48
• 3.1 前言35-36
• 3.2 材料与仪器36-37
• 3.3 实验方法37-40
• 3.4 结果与分析40-46
• 3.5 本章小结46-48
• 第四章 全文总结48-50
• 4.1 结论48-49
• 4.2 创新点49
• 4.3 问题与展望49-50
• 致谢50-51
• 参考文献51-56
• 附录 1 攻读学位期间发表的论文56-57
• 附录 2 主要符号和缩略词表57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 朱敦皖;张海玲;柏金根;刘文广;冷希岗;宋存先;杨健;李晓卫;金旭;宋丽萍;刘兰霞;李秀兰;张杨;姚康德;;精氨酸修饰壳聚糖提高基因转染效率的研究[J];科学通报;2007年18期

2 田华;田有勇;孙圣刚;;帕金森病基因治疗研究现状[J];临床内科杂志;2007年06期

3 赵颖;杨琰;卢实;张红菱;;壳聚糖脱乙酰度两种测定方法的比较[J];武汉工业学院学报;2009年02期

4 吴清凌;饶剑辉;周雪平;;甲壳素纤维发展历史及研究现状[J];中国纤检;2010年21期

5 张阳德 ,孙颖;一种新型的非病毒基因转运载体——纳米粒基因转运体[J];中国现代医学杂志;2003年21期

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本文编号：363815