双缓释PDGF-bb、BMP-6的nHA/Gel-GMS支架复合BMMSCs修复大鼠颅骨临界骨缺损的实验研究

发布时间：2022-02-25 05:55

　　目的:颌面部的骨组织损伤和缺损不仅会直接造成颜面部畸形而影响美观,还会导致病患在发音、语言、咀嚼以及呼吸等方面出现一定程度的功能障碍。目前,临床治疗当中所采用的自体或异体组织移植虽有较好疗效,但却仍旧存在不可忽视的弊端。因此,骨组织工程的提出为解决这一临床问题提供了新的思路。骨组织工程学是将组织修复材料和具有生物活性的物质进行结合,借由生物因子等发挥作用来促使骨组织修复。目前,骨组织工程己逐渐发展成为通过对细胞支架材料与生物活性因子联合使用,促进骨组织的修复、再生,最终使缺损的骨组织得以修复或重建。此种方法的优点在于不受限于供体的来源,不具有免疫排斥问题,修复重建后的组织可以替代原有组织,并具有较为理想的功能。纳米羟基磷灰石（nHA）晶体的粒径处于1-100nm范围内,具有良好的表面能与量子效应,且在降解性和生物活性方面亦性能优良,更加易于和骨组织发生整合,加强骨的机械性能与骨传导特性。以nHA晶粒植入机体内部不会对机体造成病理性损害,并且能够通过相互连通的孔隙来促进组织液微循环,从而促使新生骨质与周围组织发生结合。明胶（Gel）来自于生物体的本身,是胶原在发生了部分水解后所产生的变性... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 纳米羟基磷灰石/明胶-明胶微球支架的构建及其理化性质
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 实验方法
    3 结果
        3.1 GMS与 nHA/Gel-GMS支架的形态、结构观察
        3.2 支架的孔隙率与孔径测定
        3.3 支架的吸水率测定
        3.4 支架的压缩强度测定
        3.5 支架的降解率分析
    4 讨论
    5 结论
第二部分 nHA/Gel-GMS支架的体外细胞相容性及体内生物安全性检测
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 实验方法
    3 结果
        3.1 大鼠BMMSCs的体外分离培养
        3.2 大鼠BMMSCs的表面标志物鉴定
        3.3 大鼠BMMSCs的成骨诱导分化鉴定
        3.4 大鼠BMMSCs的成脂诱导分化鉴定
        3.5 nHA/Gel-GMS支架的体外细胞相容性检测
            3.5.1 体外细胞毒性试验
            3.5.2 接种于支架的BMMSCs黏附率测定
            3.5.3 接种于支架的BMMSCs增殖情况
            3.5.4 细胞-支架复合体的扫描电镜观察
            3.5.5 LSCM观察支架内细胞生长情况
        3.6 nHA/Gel-GMS支架的体内生物安全性检测
            3.6.1 溶血试验
            3.6.2 皮内反应试验
            3.6.3 热原试验
            3.6.4 急性全身毒性试验
            3.6.5 植入局部反应试验
            3.6.6 亚慢性全身毒性试验
    4 讨论
    5 结论
第三部分 PDGF、BMP-6/nHA/Gel-GMS支架体外促成骨及修复颅骨临界性骨缺损的实验研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 实验方法
    3 结果
        3.1 载因子支架中PDGF、BMP-6 的体外释放情况
        3.2 细胞接种支架后体外成骨效果及相关蛋白表达
        3.3 大鼠临界骨缺损模型的建立
        3.4 术后影像学检测分析
        3.5 术后组织学检测
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述 骨组织工程研究进展
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞膜片复合自体髂骨移植修复牙槽嵴裂[J]. 沈悦,马海英,张彦升,王娟,时炳正.  中国组织工程研究. 2014(50)
[2]骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的培养方法及生物学特性鉴定[J]. 吴玉琼,江凌勇,张鹏,代庆刚,房兵.  中国口腔颌面外科杂志. 2013(01)
[3]纳米羟基磷灰石及其复合材料技术进展[J]. 殷宪国.  硫磷设计与粉体工程. 2012(02)
[4]可注射性壳聚糖基温敏性凝胶的制备及其生物相容性[J]. 闫继红,孙海梅,尚宏伟,张立新,路欣.  吉林农业大学学报. 2011(05)
[5]胶原及明胶基天然高分子复合材料研究进展[J]. 裴莹,郑学晶,汤克勇.  高分子通报. 2010(02)
[6]乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的研究进展[J]. 凌友,黄岳山,梁常艳.  中国组织工程研究与临床康复. 2008(10)
[7]羟基磷灰石/壳聚糖生物复合材料的制备研究进展[J]. 徐挺,何狄,周银银,汪涛.  生物骨科材料与临床研究. 2008(01)
[8]作为细胞微载体的明胶基缓释微球的制备[J]. 王忆娟,刘守信,房喻,黄沙,金岩,姜宇.  高等学校化学学报. 2007(09)
[9]胶原-壳聚糖复合材料的制备及生物安全性检测[J]. 邱长虹,翟弘峰,姜华,史弘道.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(18)
[10]纤维蛋白粘合剂与羟基磷灰石复合人工骨的实验研究[J]. 田卫东,李声伟,邓楠,郑晓辉,陈伟辉.  中国口腔种植学杂志. 1998(04)



本文编号：3643823