基于长余辉纳米探针的细胞表面聚糖分析方法的构建及应用

发布时间：2022-07-08 14:25

　　细胞表面聚糖作为细胞的重要结构和功能分子之一,参与细胞粘附、细胞识别、信号转导等一系列重要的生命活动。细胞表面糖链的表达以及特定糖链的改变与细胞的生理状态和功能有着极其密切的联系,糖链的结构异常与许多重大疾病（如癌症）的发生和发展息息相关。因此发展高灵敏和高特异性的细胞表面聚糖检测方法,对于了解细胞表面糖基化异常与肿瘤的关系,进一步理解糖基化在恶性肿瘤发生发展过程中的作用以及开发新的治疗方法和药物筛选等方面有着极其重要的意义。本工作中我们构建了一种基于长余辉纳米探针的新型分析平台,并将此平台进一步应用于探究细胞表面糖链的种类和表达水平与肿瘤及类神经细胞分化之间的关系,为进一步理解糖基化与肿瘤的发生以及与细胞分化之间的联系提供一定的现实和理论依据。本论文主要分为以下两个研究内容:（1）长余辉纳米探针的构建及其在前列腺肿瘤细胞表面糖链分析中的应用本工作我们采用水热法合成了具有近红外长余辉性质的Cr3+掺杂的镓酸锌纳米粒子(ZnGa₂O₄:Cr³⁺,ZGC)。首先,通过3-氨基丙基-三乙氧基硅烷（APTES）硅烷化和NHS-P... 

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写符号对照表
第1章 绪论
    1.1 细胞表面聚糖
        1.1.1 细胞表面聚糖的定义和特点
        1.1.2 细胞表面聚糖的功能
    1.2 细胞表面聚糖的识别方法
        1.2.1 凝集素识别法
        1.2.2 硼酸识别法
        1.2.3 生物正交技术
    1.3 细胞表面聚糖的检测方法
        1.3.1 质谱法
        1.3.2 电化学法
        1.3.3 荧光法
    1.4 长余辉发光材料的简介
    1.5 长余辉发光材料的合成方法
        1.5.1 高温固相法
        1.5.2 溶胶-凝胶法
        1.5.3 燃烧法
        1.5.4 共沉淀法
        1.5.5 水热法
    1.6 长余辉纳米材料的应用
        1.6.1 生物检测分析
        1.6.2 生物医学成像
    1.7 本文选题意义及主要研究内容
        1.7.1 选题意义
        1.7.2 主要研究内容
第2章 实验所需试剂与仪器
    2.1 实验所需的主要试剂
    2.2 实验所需的主要仪器
        2.2.1 透射电子显微镜
        2.2.2 X射线衍射仪
        2.2.3 酶联免疫检测仪
        2.2.4 荧光光谱仪
        2.2.5 激光共聚焦扫描显微镜
第3章 长余辉纳米探针的构建及其在前列腺肿瘤细胞表面糖链分析中的应用
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 长余辉纳米粒子ZGC的合成
        3.2.2 ZGC的修饰
        3.2.3 DU145和RWPE-1 细胞培养
        3.2.4 细胞的固定和预处理
        3.2.5 基于ZGC长余辉探针的DU145表面糖链检测
        3.2.6 基于TMB-HRP显色法和共聚焦显微荧光成像法的表面糖链分析
        3.2.7 DU145和RWPE-1 细胞表面糖链比较
        3.2.8 衣霉素对DU145细胞表面糖链的影响
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 实验原理
        3.3.2 ZGC的表征
        3.3.3 ZGC修饰的表征
        3.3.4 ZGC-PEG-avidin检测DU145 细胞表面糖链和HRP-TMB显色法验证性实验
        3.3.5 共聚焦显微荧光成像法验证长余辉纳米探针的实验结果
        3.3.6 衣霉素对DU145细胞表面糖链的影响
        3.3.7 DU145和RWPE-1 细胞表面糖链的检测
    3.4 本章小结
第4章 基于长余辉纳米探针的类神经细胞分化过程中细胞表面糖链表达谱的研究
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 ZGC-PEG-Biotin的修饰验证
        4.2.2 ZGC-PEG-Biotin的稳定性评价
        4.2.3 低分化pc-12细胞的培养
        4.2.4 低分化pc-12细胞的固定及预处理
        4.2.5 低分化pc-12细胞细胞表面糖链的检测以及验证性实验
        4.2.6 不同分化阶段pc-12细胞表面糖链的检测
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 ZGC的功能化修饰与表征
        4.3.2 NGF处理不同时间后pc-12细胞的形态
        4.3.3 未经NGF处理的pc-12 细胞表面糖链检测和HRP-TMB显色验证法
        4.3.4 NGF处理不同时间pc-12细胞表面糖链检测
        4.3.5 NGF处理前后的pc-12细胞糖链的共聚焦显微荧光成像
    4.4 本章小结
第5章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
硕士期间科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]水热法合成Sr4Al14O25:Eu2+,Dy3+长余辉发光材料及性能研究[J]. 宋洁,徐晓,张娜,李彩霞,李强.  中国稀土学报. 2011(01)
[2]长余辉发光材料研究进展[J]. 刘应亮,雷炳富,邝金勇,石春山,孟建新,满石清,谭绍早,肖勇,袁定胜,黄浪欢,张静娴.  无机化学学报. 2009(08)
[3]长余辉发光材料研究进展[J]. 孙继兵,王海容,安雅琴,崔春翔,韩丹.  稀有金属材料与工程. 2008(02)
[4]高温固相法制备硅酸盐长余辉发光材料[J]. 姜洪义,徐博.  硅酸盐学报. 2006(09)
[5]水热法合成SrAl2O4:Eu2+,Dy3+长余辉材料[J]. 李东平,缪春燕.  江西化工. 2005(01)
[6]长余辉发光材料研究进展[J]. 罗昔贤,于晶杰,林广旭,肖志强,段锦霞,肖志国.  发光学报. 2002(05)
[7]溶胶─凝胶法及其在稀土发光材料合成中的应用[J]. 林君，苏锵.  稀土. 1994(01)

硕士论文
[1]近红外长余辉纳米探针在体外检测肿瘤细胞中的应用[D]. 李金磊.华侨大学 2015
[2]长余辉发光材料的燃烧法制备及其发光性质研究[D]. 常素玲.广西大学 2006



本文编号：3657193