猪脂肪源基质水凝胶促进游离移植脂肪存活的实验研究
发布时间:2022-08-23 18:33
研究背景:外伤、手术、先天发育异常等均可导致软组织缺损或缺失。游离脂肪移植因填充物(脂肪)来源广泛,兼具填充与形态塑造的效果,是软组织缺损填充修复最常用的技术之一[1-3]。然而,游离脂肪移植过程中成熟脂肪细胞的物理损伤或组织/血管再生不足可导致部分脂肪细胞无法存活[4,5],相关文献报道游离脂肪移植体积保留率在10%-85%之间[6-9]。移植物体积保留率是决定游离脂肪填充术手术效果最重要的因素之一,促进游离移植脂肪存活进而提高体积保留率是目前游离脂肪移植亟需解决的问题[10]。近年来,已有研究尝试使用生物材料提供和改善细胞存活和诱导原位脂肪再生的局部微环境[11-14]。水凝胶类生物材料富含水,可促进更好的氧气和营养物质交换[15]。以水凝胶作为细胞/组织载体,可通过减少组织损伤提高移植组织存活率。部分研究证实,与常规的组织/细胞移植相比,基于水凝胶生物材料(例如胶原蛋白和透明质酸)的组织/细胞移植具有更好的组织存活率[15-18]
【文章页数】:109 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促进游离移植脂肪存活的体外实验研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源
2.主要试剂和仪器
实验方法
1.ADSCs原代培养
2.猪脂肪组织无细胞基质水凝胶的制备
3.人源性脂肪颗粒的制备
4.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs增殖的影响
5.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs成脂分化的影响
6.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs的 VEGF分泌的影响
7.体外常氧及低氧条件下,HAPA对游离脂肪存活及凋亡的影响
结果
1.HAPA促进低氧条件下ADSCs增殖
2.低氧条件下HAPA仍具有对ADSCs成脂诱导特性
3.HAPA促进低氧条件下VEGF的分泌
4.低氧条件下游离脂肪组织及HAPA/脂肪复合物中细胞的存活及凋亡情况
5.体外常氧、低氧条件下HAPA对游离脂肪中细胞的HIF-1α基因表达水平的调控
6.体外常氧、低氧条件下HAPA对游离脂肪中细胞的HIF-1α蛋白表达影响。
讨论
结论
参考文献
第二部分:HAPA及 ADSCS促进游离移植脂肪存活的动物实验研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源与实验动物
2.主要材料和仪器
实验方法
1.动物模型制作
2.实验分组及实验流程图示意图
3.实验步骤
4.动物处死及取材
5.术后超声、大体观测及移植物体积保留率比较
6.移植脂肪组织组织学评价
7.统计学方法
结果
1.大体观察及体积测量结果
2.超声及大体观察结果
3.HE染色结果分析
4.围脂肪蛋白(Perilipin A)染色结果
5.CD31免疫组化染色结果
6.Ki67及TUNEL染色结果
讨论
结论
参考文献
第三部分:HAPA辅助脂肪移植的HAPA/脂肪体积比优化的体内研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源与实验动物
2.主要材料和仪器
实验方法
1.移植材料准备与动物模型制作
2.实验步骤及方法
3.术后超声、大体观测及移植物体积保留率比较
4.移植物组织学染色及分析结果
5.统计学方法
结果
1.大体观察及体积测量结果
2.超声观察结果
3.HE染色结果分析
4.CD31免疫组化染色结果
5.围脂肪蛋白染色(Perilipin A)结果
讨论
结论
参考文献
课题综述水凝胶材料在脂肪组织工程的应用
参考文献
在读间科研成果简介
致谢
本文编号:3678271
【文章页数】:109 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促进游离移植脂肪存活的体外实验研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源
2.主要试剂和仪器
实验方法
1.ADSCs原代培养
2.猪脂肪组织无细胞基质水凝胶的制备
3.人源性脂肪颗粒的制备
4.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs增殖的影响
5.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs成脂分化的影响
6.常氧及低氧条件下,HAPA对 ADSCs的 VEGF分泌的影响
7.体外常氧及低氧条件下,HAPA对游离脂肪存活及凋亡的影响
结果
1.HAPA促进低氧条件下ADSCs增殖
2.低氧条件下HAPA仍具有对ADSCs成脂诱导特性
3.HAPA促进低氧条件下VEGF的分泌
4.低氧条件下游离脂肪组织及HAPA/脂肪复合物中细胞的存活及凋亡情况
5.体外常氧、低氧条件下HAPA对游离脂肪中细胞的HIF-1α基因表达水平的调控
6.体外常氧、低氧条件下HAPA对游离脂肪中细胞的HIF-1α蛋白表达影响。
讨论
结论
参考文献
第二部分:HAPA及 ADSCS促进游离移植脂肪存活的动物实验研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源与实验动物
2.主要材料和仪器
实验方法
1.动物模型制作
2.实验分组及实验流程图示意图
3.实验步骤
4.动物处死及取材
5.术后超声、大体观测及移植物体积保留率比较
6.移植脂肪组织组织学评价
7.统计学方法
结果
1.大体观察及体积测量结果
2.超声及大体观察结果
3.HE染色结果分析
4.围脂肪蛋白(Perilipin A)染色结果
5.CD31免疫组化染色结果
6.Ki67及TUNEL染色结果
讨论
结论
参考文献
第三部分:HAPA辅助脂肪移植的HAPA/脂肪体积比优化的体内研究
前言
主要材料和仪器
1.组织来源与实验动物
2.主要材料和仪器
实验方法
1.移植材料准备与动物模型制作
2.实验步骤及方法
3.术后超声、大体观测及移植物体积保留率比较
4.移植物组织学染色及分析结果
5.统计学方法
结果
1.大体观察及体积测量结果
2.超声观察结果
3.HE染色结果分析
4.CD31免疫组化染色结果
5.围脂肪蛋白染色(Perilipin A)结果
讨论
结论
参考文献
课题综述水凝胶材料在脂肪组织工程的应用
参考文献
在读间科研成果简介
致谢
本文编号:3678271
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