体积排阻高效液相色谱法测定酸溶性Ⅰ型胶原蛋白含量的研究

发布时间：2022-09-21 17:44

　　目的 建立酸溶性I型胶原蛋白含量测定的体积排阻高效液相色谱法（size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC）并进行方法确认，为快速、准确测定酸溶性I型胶原蛋白含量提供技术参考。方法 通过优化流动相组成、流速及柱温等因素来改善峰形，提高柱效，确定最佳检测条件，采用含DAD检测器的Agilent 1260高效液相色谱仪进行检测，检测波长为210 nm，外标法定量并进行方法学研究。结果 选择300 mmol/L磷酸钠-150 mmol/L氯化钠（pH=6.0）为流动相，设定流速为0.4 mL/min，柱温为20℃时，酸溶性I型胶原蛋白在体积排阻色谱柱Agilent Bio SEC-5（300?，4.6 mm×300 mm,5μm）（1?=0.1 nm）上的分离能获得最佳柱效。方法学研究结果表明，酸溶性I型胶原蛋白在1.5～120.0μg/mL范围内，与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9），定量限为0.6μg/mL。用建立的方法连续进样6次，检测供试品溶液的I型胶原蛋白含量，相对标准偏差（relative s... 

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【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 仪器和设备
    1.2 试剂与材料
    1.3 溶液的制备
        1.3.1 对照品溶液
        1.3.2 供试品溶液
    1.4 色谱条件
    1.5 检测方法
2 结果与分析
    2.1 检测波长的确定
    2.2 实验条件的优化
        2.2.1 流动相组成优化
        2.2.2 流速的优化
        2.2.3 柱温的优化
    2.3 系统适用性
    2.4 线性范围
    2.5 定量限
    2.6 重复性实验
    2.7 回收率实验
    2.8 稳定性实验
    2.9 样品测定
3 讨论与结论


【参考文献】：
期刊论文
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[2]胶原蛋白-明胶复合支架材料修复周围神经缺损[J]. 刘天丹,张保朝,郝明亮.  中国组织工程研究. 2017(02)
[3]胶原蛋白提取工艺和临床应用进展[J]. 王译伟,陈治梁.  绿色科技. 2016(02)
[4]胶原蛋白海绵的性质及其临床应用(英文)[J]. 蔡敏倩,王晓杰,李校堃.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(12)
[5]胶原蛋白凝胶促皮肤创面修复的临床研究[J]. 马慧军,贾赤宇,魏蓉,杨扬,张大艳.  中国美容医学. 2011(02)
[6]猪皮胶原蛋白的提取与应用浅析[J]. 蓝蔚青,李燕,周培根.  肉类研究. 2006(03)
[7]胶原蛋白的应用[J]. 张慧君,罗仓学,张新申,宋秘钊,蒋小萍.  皮革科学与工程. 2003(06)
[8]Ⅰ型胶原蛋白与骨质疏松症研究进展[J]. 李梅,孟迅吾,周学瀛.  国外医学(内分泌学分册). 2000(01)



本文编号：3680387