生物材料表面吸附功能性融合蛋白构建活性界面的研究

发布时间：2022-10-09 16:52

　　鉴于合成高分子材料通常生物学活性不足,通过其表面蛋白吸附构建具有细胞亲和性的活性蛋白界面的研究,已成为近年生物医用高分子材料的研究热点之一。免疫球蛋白IgG的Fc段可以通过疏水相互作用,在疏水材料表面自组装成单分子蛋白层。我们利用基因工程技术制备了人上皮钙黏素蛋白（hE-cadherin）的胞外域和人血管内皮细胞生长因子（hVEGF）分别与免疫球蛋白IgG的Fc段结构域结合为融合蛋白（hE-cad-Fc和hVEGF-Fc）。本研究初步探究了hE-cad-Fc和hVEGF-Fc作为细胞粘附因子和细胞生长因子在聚苯乙烯细胞培养板表面的吸附及其活性蛋白界面的形貌和生物学活性。结果表明,hE-cad-Fc和hVEGF-Fc各自的最佳使用浓度分别为5μg/mL和200ng/mL;hE-cad-Fc和hVEGF-Fc分别以高为（6.5±0.4）nm和（3.0±0.3）nm的纳米棒形成单分子蛋白层;且在3种不同液性环境中（PBS,DMEM/F12和DMEM/F12+10%血清）中具有良好的稳定性。进一步的细胞实验结果表明,该活性蛋白界面显著改善了聚苯乙烯培养板表面的亲水性,同时还提高了人源间充质干细... 

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【文章目录】：
1 前言
2 实验部分
    2.1 仪器和试剂
    2.2 h E-cad-Fc、h VEGF-Fc、胶原(Collagen)母液的配制
    2.3 h E-cad-Fc、h VEGF-Fc和E/VEGF-Fc的吸附行为表征
    2.4 原子力显微镜检测活性蛋白界面形貌
    2.5 不同液性环境中E/VEGF-Fc的稳定性检测
    2.6 水接触角检测
    2.7 不同基质表面h MSCs粘附特性的表征
    2.8 数据分析
3 结果与讨论
    3.1 PS培养板表面h E-cad-Fc和h VEGF-Fc的吸附
    3.2 PS培养板表面E/VEGF-Fc活性蛋白界面的形貌
    3.3 PS培养板表面E/VEGF-Fc活性蛋白界面的稳定性
    3.4 E/VEGF-Fc修饰后PS培养板表面的亲水性
    3.5 E/VEGF-Fc活性蛋白界面介导的h MSCs粘附
4 结论



本文编号：3689003