钙化界面层的构建及其在骨软骨缺损一体化修复中的研究

发布时间：2023-03-12 01:02

　　研究背景:膝关节软骨病变是影响几乎所有年龄段的人的疾病,严重影响着全人类生活质量。导致骨软骨损伤的病因很多,例如创伤、疾病或老化等。在解剖结构上,关节软骨和硬骨两者紧密相连,生物学功能上也相互影响。骨软骨界面是介于透明软骨与软骨下骨之间的连接面。天然的连接面是由软骨钙化区构成,其结构薄而致密,起着隔离软骨层和软骨下骨层的作用,同时又将二者有机地整合在一起。骨软骨缺损同时累及软骨层和软骨下骨层时,两者不同的力学性能和组织结构凸显了钙化界面的重要性,在维护软骨和软骨下骨的正常功能上,骨软骨界面的存在是必需的。因此,理想的复合骨软骨支架应模拟正常骨软骨组织结构,所以在制备复合支架时应当构建出钙化层的结构,进而更好地促进骨软骨组织缺损的修复。骨软骨一体化支架再生将成为科研和临床的热点议题。因此,本研究主要包括以下内容:1软骨层支架工艺构建,筛选出适合软骨细胞表型与功能的水凝胶支架;2开发具有钙化层的一体化支架;3体外评估一体化支架的特征及钙化界面层的屏蔽作用。方法:在本研究中,我们选取具有良好的生物相容性的海藻酸钠和壳聚糖水凝胶用于构建具有钙化层的一体化复合支架。首先进行软骨支架工艺的优化,筛...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
引言
1 仪器与试剂
    1.1 主要实验仪器
    1.2 主要实验试剂
2 实验方法
    2.1 软骨细胞提取与培养
    2.2 细胞活性检测
    2.3 细胞形态学表征
    2.4 细胞死活染色
    2.5 细胞骨架染色
    2.6 逆转录酶聚合酶链反应
    2.7 糖胺聚糖含量测定
    2.8 胶原蛋白II含量测定
    2.9 细胞共培养的染色方法
    2.10 Transwell进行细胞共培养
    2.11 水凝胶支架制备方法
    2.12 水凝胶支架力学检测
    2.13 SEM表征水凝胶支架
    2.14 microCT表征水凝胶支架
    2.15 CLSM表征水凝胶支架
    2.16 统计学方法
3 实验结果
    3.1 软骨细胞的提取与表征
    3.2 G含量对水凝胶支架力学性能的影响
    3.3 水凝胶支架G含量对软骨细胞形态和功能的影响
        3.3.1 软骨细胞在水凝胶支架上的粘附行为
        3.3.2 软骨细胞在水凝胶支架上的骨架形态
        3.3.3 软骨细胞在水凝胶支架上的增殖能力
        3.3.4 软骨细胞在水凝胶支架上的功能表达
    3.4 成骨细胞、血管内皮细胞对软骨细胞功能的影响
    3.5 软骨下骨-软骨一体化水凝胶支架的制备与表征
        3.5.1 一体化水凝胶支架的制备和形态学表征
        3.5.2 一体化水凝胶支架中钙化界面层的表征
        3.5.3 钙化界面层的隔离效应
4 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3760616