FDISCO：用于整体器官成像的组织光透明方法研究

发布时间：2023-04-01 08:01

　　生物组织的三维结构为神经科学、系统生物学的研究提供了重要的信息。光学显微成像与组织荧光标记技术结合,可以获取亚细胞分辨率的三维组织结构,但生物组织的混浊特性限制了光在组织中的穿透深度,阻碍了大体积组织或整体器官的三维成像。近年发展起来的组织光透明技术可以降低组织对光的散射,使组织“透明”化,从而实现生物组织的三维光学显微成像。目前,研究者们已经发展了多种离体组织光透明方法,广泛用于鼠脑等生物组织的三维荧光成像。然而,现有的光透明方法针对完整组织器官的透明及成像效果仍有不足,尚缺乏同时具备高效组织透明能力和高荧光保持能力的离体组织光透明方法。本文的研究工作是围绕适用于整体器官成像的组织光透明方法展开,旨在发展一种兼顾组织透明能力和荧光保持能力的高效组织光透明方法,实现整体器官的三维成像。主要内容如下:(1)新型组织光透明方法的建立:在3DISCO方法的基础上,探究透明试剂的不同温度和p H条件对增强型绿色荧光蛋白稳定性的影响,筛选利于荧光保持的条件,进而建立具备高荧光保持能力的组织光透明方法FDISCO;进一步验证了该方法对多种荧光蛋白和化学荧光染料都具有高水平的信号保持能力。(2)FD...

【文章页数】：124 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 生物组织三维整体成像概述
    1.2 实现整体器官三维成像的组织光透明方法
    1.3 存在的问题
    1.4 本文的主要内容
2 FDISCO：新型组织光透明方法的建立
    2.1 材料与方法
    2.2 基于温度与酸碱度调节的FDISCO方法的建立
    2.3 FDISCO对荧光蛋白信号保持能力的影响
    2.4 FDISCO对化学荧光染料信号保持能力的影响
    2.5 低温对其它光透明方法荧光保持能力的影响
    2.6 分析和讨论
    2.7 本章小结
3 FDISCO与其它整体器官透明方法的比较研究
    3.1 材料与方法
    3.2 FDISCO与其它整体器官透明方法透明效果的比较
    3.3 FDISCO与其它整体器官透明方法成像质量的比较
    3.4 分析与讨论
    3.5 本章小结
4 基于FDISCO的整体器官神经与血管成像
    4.1 材料与方法
    4.2 转基因小鼠的鼠脑神经结构成像
    4.3 病毒标记的鼠脑神经投射成像
    4.4 骨骼肌神经结构的三维成像
    4.5 血管网络结构的三维成像
    4.6 分析与讨论
    4.7 本章小结
5 总结与展望
    5.1 本文的主要内容与结论
    5.2 本文的主要创新点
    5.3 展望
致谢
参考文献
附录1 攻读博士学位期间发表的论文
附录2 本文使用的英文缩写



本文编号：3776767