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基于酶催化糖肽超分子水凝胶构建新型细胞支架材料的研究

发布时间:2023-04-02 07:49
  细胞外基质(ECM)在生物体系中扮演着重要的角色,其作为具有生物力学和化学性质的生物支架,支持细胞的粘附和生长。制备出具有良好生物相容性、细胞粘附性和生物活性的仿生基质材料是目前组织工程学研究的重要方向。目前基于多肽自组装方法制备的仿ECM凝胶材料具有细胞粘附能力低和自组装条件苛刻的缺点,而糖肽作为糖蛋白和糖氨基酸之间的一类生物分子具有良好的生物稳定性,生物相容性和细胞粘附性等优点。此外,基于分子设计可以制备出具备良好自组装特性的糖肽分子,因此糖肽成为制备仿细胞外基质材料的新型构筑基元。本论文的主要研究内容是使用葡萄糖和磷酸酪氨酸和其它相关氨基酸分子制备新型糖肽分子,利用碱性磷酸酶在生理条件下可通过酶促反应形成超分子水凝胶,从而构建具有促进细胞粘附和生长的糖肽水凝胶,并探讨该糖肽水凝胶在组织工程中诱导血管化和组织修复方面的应用潜力。本论文的第一部分设计合成了一种新型糖肽分子,其在生理条件下可以由碱性磷酸酶触发凝胶化进行超分子自组装。在发生超分子自组装之后,水凝胶表面上的葡萄糖部分可作为生物分子线索,通过糖与受体之间的相互作用来促进细胞的粘附和生长。在裹入去铁胺(DFO)后,自组装形成的...

【文章页数】:88 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 多肽超分子自组装的概述
    1.2 多肽超分子自组装的研究现状
        1.2.1 两亲性多肽自组装
        1.2.2 多肽自组装的诱导因素
    1.3 糖肽超分子自组装的概述
    1.4 糖肽超分子自组装的研究现状
        1.4.1 糖肽分子制备
        1.4.2 糖肽超分子自组装的应用
    1.5 研究内容及目的
第二章 基于酶催化构建可用于诱导组织血管化的糖肽超分子自组装水凝胶
    2.1 序言
    2.2 实验部分
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 糖肽分子NapFFD(Glc)Yp的制备与表征
        2.2.4 糖肽分子的凝胶测试
        2.2.5 糖肽自组装体的透射电镜(TEM)表征
        2.2.6 糖肽自组装体的扫描电镜(SEM)表征
        2.2.7 糖肽自组装体力学性能测试
        2.2.8 糖肽自组装体的圆二色谱(CD)表征
        2.2.9 糖肽自组装体的傅里叶变换红外光谱(FTIR)表征
        2.2.10 糖肽分子的生物稳定性测试
        2.2.11 糖肽分子的细胞毒性实验
        2.2.12 糖肽水凝胶的稳定性
        2.2.13 糖肽水凝胶的生物相容性
        2.2.14 体外血管化实验
        2.2.15 体外DFO释放测试
        2.2.16 糖肽水凝胶的可注射性测试
        2.2.17 体内血管生成实验
        2.2.18 统计学分析
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 糖肽分子的表征
        2.3.2 糖肽分子自组装性能的研究
        2.3.3 糖肽水凝胶微观形貌的研究
        2.3.4 糖肽水凝胶的力学性能测试
        2.3.5 糖肽水凝胶的二级结构研究
        2.3.6 糖肽分子的生物稳定性测试
        2.3.7 糖肽分子的细胞毒性测试
        2.3.8 糖肽水凝胶的稳定性
        2.3.9 糖肽水凝胶与细胞的二维培养实验
        2.3.10 糖肽水凝胶体外诱导血管化实验
        2.3.11 糖肽水凝胶体外DFO释放测试
        2.3.12 糖肽水凝胶可注射性测试
        2.3.13 糖肽水凝胶体内诱导血管化实验
    2.4 本章小结
第三章 基于酶催发过程诱导超分子水凝胶生成及仿生矿化的研究
    3.1 序言
    3.2 实验部分
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 糖肽水凝胶的制备
        3.2.4 糖肽水凝胶中碱性磷酸酶的释放测试
        3.2.5 糖肽水凝胶的矿化
        3.2.6 矿化后糖肽水凝胶微观形貌的透射电镜(TEM)表征
        3.2.7 矿化后糖肽水凝胶的扫描电镜(SEM)和能量散色谱(EDS)表征
        3.2.8 矿化后糖肽水凝胶的力学性能测试
        3.2.9 矿化前后糖肽水凝胶的傅里叶变换红外光谱(FTIR)表征
        3.2.10 矿化前后糖肽水凝胶相组成的X射线衍射分析(XRD)表征
        3.2.11 原代骨髓间充质干细胞提取
        3.2.12 细胞相容性检测
        3.2.13 生物学活性检测
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 糖肽水凝胶的制备
        3.3.2 糖肽水凝胶对骨髓间充质干细胞的生物相容性
        3.3.3 糖肽水凝胶对骨髓间充质干细胞的生物学活性检测
        3.3.4 糖肽水凝胶中碱性磷酸酶的释放
        3.3.5 糖肽水凝胶的矿化
        3.3.6 矿化后糖肽水凝胶的微观形貌
        3.3.7 矿化后糖肽水凝胶的力学性能
        3.3.8 矿化后糖肽水凝胶的傅里叶变换红外色谱
        3.3.9 矿化后糖肽水凝胶的X射线衍射分析
        3.3.10 矿化后糖肽水凝胶对骨髓间充质干细胞的生物相容性
    3.4 本章小结
第四章 结论与展望
参考文献
硕士期间研究成果
致谢



本文编号:3778843

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