高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料的制备与性能研究

发布时间：2017-05-19 15:27

  本文关键词：高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料的制备与性能研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目前,以猪皮为原料制备胶原基质敷料用于皮肤损伤修复已成为研究热点。但传统方法制得的脱细胞真皮基质(ADM)存在渗透性差、抗菌性能低、生物相容性差等缺点,这严重限制了脱细胞真皮基质敷料在临床的广泛应用。 针对上述不足,本论文结合临床对创面敷料的要求以及猪皮的结构特点,以组织工程原理为指导,在前期实验室研究和目前最新研究成果基础上,采用新的工艺处理盐腌猪皮,彻底去除毛根鞘等纤维间质,提高胶原基质渗透性,复合羧甲基壳聚糖和硫酸软骨素等天然多糖,并用戊二醛交联,改善敷料的抗菌性能和生物活性,得到高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料。本文的重点研究内容和结果如下： (1)首先对脱细胞真皮基质制备工艺进行研究,研究表明：经角蛋白酶处理得到的脱细胞真皮基质的透水汽性能和孔隙率要优于传统方法制得的基质的性能,因此,在脱细胞真皮基质的制备过程中,要增加角蛋白酶处理,具体工艺路线为： 盐腌猪皮→浸水→脱脂→碱膨胀→消除碱膨胀→角蛋白酶处理→二次酶处理→PBS液清洗→封装 (2)角蛋白酶用量对脱细胞真皮基质的透水汽性能、孔隙率和拉伸强度有一定影响：随着角蛋白酶用量的增加,基质的透水汽性能、孔隙率不断提高,拉伸强度有所降低,但降低幅度不大,能够在一定程度上维持胶原纤维结构的稳定,这表明角蛋白酶处理技术基本实现了改善脱细胞真皮基质透水气性能和渗透性的预期目的。从保证基质的机械性能和成本考虑,将角蛋白酶的用量定为0.3%。 (3)在脱细胞真皮基质上复合羧甲基壳聚糖,研究羧甲基壳聚糖对基质抗菌性能的影响,为制备抗菌敷料提供可靠依据。抑菌实验结果表明：与常规基质相比,复合羧甲基壳聚糖后基质的抑菌率增加,这说明基质的抗菌性能得到一定程度改善,羧甲基壳聚糖对基质的抗菌性能有重要影响。 (4)在脱细胞真皮基质上交联复合天然多糖,研究交联复合对基质拉伸强度、体外降解时间等理化性能的影响。实验结果表明：交联复合羧甲基壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素后,基质的拉伸强度、透水汽速率、体外降解时间和孔隙率增加。 (5)根据以上(1)、(2)、(3)、(4)的研究结果和组织工程学原理,结合敷料的性能要求,制备了高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料,并对敷料的主要性能做相关检测。结果表明：经戊二醛交联后的敷料颜色微黄,毛孔可见,表面平细光滑,柔软有弹性,无肉眼可见杂物；扫描电镜观察显示：胶原纤维的网状结构疏松,多孔结构丰富,适合细胞增殖和血管化；拉伸强度为10.66MPa,约是纯胶原膜的5倍,拉伸强度较好,能够满足临床对敷料的要求。透水汽速率为3640g·m-2·24h-1左右,说明具有较好的透水汽性能；孔隙率为81.00%左右,适合创面恢复；体外降解时间为24.33h左右；pH值6.5-7.5,符合相关敷料标准；抑菌实验表明,敷料具有一定的抗菌性能,能有效减少创面感染。 本研究制备的高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料渗透性好、具有一定的抗菌性能和生物活性,基本满足临床对敷料的要求,有望用于临床,促进创面愈合,为之后的应用研究奠定基础。
【关键词】：脱细胞真皮基质 敷料 制备 抗菌
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 符号说明12-13
• 第一章 绪论13-29
• 1.1 概述13-17
• 1.2 皮肤损伤与创面修复17-19
• 1.2.1 皮肤损伤17-18
• 1.2.2 创面修复的过程和特点18-19
• 1.3 医用创面敷料的研究进展19-26
• 1.3.1 医用敷料的产生发展19
• 1.3.2 理想医用创面敷料的性能标准19-20
• 1.3.3 合成高分子材料敷料20-21
• 1.3.4 无机材料敷料21
• 1.3.5 复合材料敷料21-23
• 1.3.6 天然材料敷料23-26
• 1.4 本论文的研究内容26-27
• 1.4.1 角蛋白酶处理对敷料主要性能的影响26-27
• 1.4.2 复合羧甲基壳聚糖对敷料抗菌性能的影响27
• 1.4.3 复合透明质酸和硫酸软骨素对敷料性能的影响27
• 1.5 本论文的研究目的和意义27-29
• 第二章 异种猪脱细胞真皮基质的制备工艺研究29-45
• 2.1 概述29-30
• 2.2 脱细胞真皮基质的制备方法选择与论证30-33
• 2.2.1 浸水30
• 2.2.2 脱脂30-31
• 2.2.3 碱膨胀31
• 2.2.4 消除碱膨胀31
• 2.2.5 角蛋白酶处理31-32
• 2.2.6 二次酶处理32
• 2.2.7 PBS缓冲液洗32-33
• 2.2.8 灭菌33
• 2.3 实验部分33-37
• 2.3.1 实验药品33-34
• 2.3.2 实验仪器34-35
• 2.3.3 取样标记35
• 2.3.4 制备方法35-36
• 2.3.5 检测方法36-37
• 2.4 结果与讨论37-44
• 2.4.1 工艺探索和性能比较37-41
• 2.4.2 角蛋白酶用量对材料性能的影响41-44
• 2.5 本章小结44-45
• 第三章 在脱细胞真皮基质上复合生物多糖对其性能的影响45-57
• 3.1 概述45
• 3.2 方法选择与论证45-49
• 3.2.1 羧甲基壳聚糖复合45-46
• 3.2.2 戊二醛交联46-47
• 3.2.3 硫酸软骨素47-48
• 3.2.4 透明质酸48-49
• 3.3 实验部分49-51
• 3.3.1 实验药品49
• 3.3.2 实验仪器49-50
• 3.3.3 实验方法50
• 3.3.4 检测方法50-51
• 3.4 实验内容、结果与讨论51-55
• 3.4.1 工艺探索和性能比较51-53
• 3.4.2 多糖复合对材料性能的影响53-55
• 3.5 本章小结55-57
• 第四章 高性能脱细胞真皮基质抗菌敷料性能表征57-65
• 4.1 概述57
• 4.2 实验部分57-59
• 4.2.1 实验仪器、药品和材料57
• 4.2.2 实验方法57-58
• 4.2.3 检测方法58-59
• 4.3 结果和讨论59-62
• 4.3.1 性状观察59-60
• 4.3.2 扫描电镜观察60-61
• 4.3.3 厚度检测61
• 4.3.4 拉伸强度61
• 4.3.5 透水汽性能61
• 4.3.6 孔隙率61-62
• 4.3.7 体外降解时间62
• 4.3.8 抑菌率62
• 4.3.9 pH值62
• 4.4 小结62-65
• 第五章 总结65-67
• 第六章 本课题后续工作建议67-69
• 参考文献69-79
• 致谢79-80
• 学位论文评阅及答辩情况表80

【参考文献】

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本文编号：379085