基于细胞膜片技术构建血管化组织工程移植物的研究

发布时间：2023-04-19 18:52

　　目的:本研究采用细胞膜片技术(CST)培养血管化干细胞膜片,将其包裹到聚四氟乙烯管的外面,构建血管化组织工程(TE)移植物,并将该移植物埋植到SD大鼠背部皮下,观察此移植物与宿主血管吻合情况并评估体内血管形成能力,为器官移植出现血液供应不足时提供一种新的血管化策略。材料和方法:(1)成人骨髓间质干细胞(hMSCs)的培养及传代:复苏hMSCs并培养,观察hMSCs的形态,采用MTT实验探究hMSCs的生长趋势;(2)hMSCs膜片的制备及表征:将hMSCs种植于培养皿中,连续培养14天形成hMSCs膜片,通过H&E染色和SEM等方法对其表征;(3)血管化干细胞膜片和血管化组织工程移植物的构建及其表征:通过连续培养hMSCs 14天构建细胞膜片,于膜片上种植人脐静脉内皮细胞(HUVECs),形成血管化干细胞膜片,将其包裹到聚四氟乙烯管的外面,构建血管化TE移植物。利用SEM、CD31免疫荧光染色、拉伸实验等方法对其表征;(4)血管化组织工程移植物的体内实验:将血管化TE移植物hMSC/HUVEC植入到SD大鼠背部皮下,以管状hMSCs膜片作为对照,2周、4周后分别进行H&...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词
第一章 绪论
    1.1 CST在组织工程血管化中的研究进展
    1.2 MSC和EC在组织工程血管化中的应用
    1.3 利用CST构建血管化组织工程移植物的研究进展
    1.4 研究目的、意义和内容
第二章 hMSCs的培养和hMSCs膜片的构建及表征
    2.1 材料和方法
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验设备
        2.1.3 成人骨髓间质干细胞(hMSCs)的复苏
        2.1.4 hMSCs的传代培养及生长情况分析
        2.1.5 hMSCs膜片的构建及表征
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 hMSCs形态和生长分析
        2.2.2 hMSCs膜片的大体观
        2.2.3 hMSCs膜片的表征
    2.3 小结
第三章 血管化干细胞膜片和移植物的构建及表征
    3.1 材料和方法
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 实验设备
        3.1.3 人脐静脉内皮细胞的复苏
        3.1.4 人脐静脉内皮细胞的传代和培养
        3.1.5 hMSCs膜片的培养
        3.1.6 血管化干细胞膜片的培养
        3.1.7 血管化干细胞膜片的免疫荧光染色
        3.1.8 血管化干细胞膜片SEM检测
        3.1.9 血管化组织工程移植物的构建和拉伸试验
        3.1.10 血管化组织工程移植物细胞外基质的评估
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 人脐静脉内皮细胞形态观察
        3.2.2 血管化干细胞膜片的培养
        3.2.3 血管化干细胞膜片免疫荧光染色
        3.2.4 血管化干细胞膜片SEM检测
        3.2.5 血管化组织工程移植物的的构建和力学性能测试
        3.2.6 血管化组织工程移植物细胞外基质的评估
    3.3 小结
第四章 血管化组织工程移植物的体内研究
    4.1 材料和方法
        4.1.1 实验试剂
        4.1.2 实验设备
        4.1.3 体外构建血管化组织工程移植物
        4.1.4 血管化组织工程移植物的体内移植
        4.1.5 H&E染色和CD31免疫荧光染色
        4.1.6 统计分析
    4.2 结果与讨论
        4.2.1 大体观
        4.2.2 H&E染色
        4.2.3 免疫荧光
    4.3 小结
第五章 全文总结
参考文献
致谢
在学期间的研究成果
病例报告



本文编号：3794021