纳米二氧化硅对淋巴管内皮细胞增殖、迁移及管状结构形成的影响

发布时间：2023-04-22 16:33

　　目的:研究纳米二氧化硅(silica nanoparticles,SiNPs)对人淋巴管内皮细胞(human lymphatic endothelial cells,HLECs)增殖、迁移及管状结构生成的影响,初步探讨SiNPs对淋巴管增生的影响及机制。方法:制作SiNPs混悬液,并用透射电子显微镜观察其形貌特征,纳米粒度分析仪测量溶液中SiNPs的粒径。常规培养HLECs,用粒径为30nm的SiNPs对HLECs进行干预。实验共分为四组:对照组,10μg/m L SiNPs组,20μg/m L SiNPs组,40μg/m L SiNPs组。采用细胞增殖实验检测SiNPs对HLECs增殖能力的影响。Transwell迁移实验检测SiNPs对HLECs迁移能力的影响。Matrigel基质胶实验检测SiNPs对HLECs管状结构形成能力的影响。RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)技术检测细胞中血管内皮生长因子C(Vascular Endothelial Growth Factor C,VEGF-C)、血管内皮生长因子...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一章 材料与方法
    1 细胞系
    2 实验试剂及耗材
    3 实验使用的主要仪器
    4 纳米二氧化硅的表征
        4.1 纳米二氧化硅混悬液的制备
        4.2 透射电子显微镜(TEM)检测及粒径分析
    5 细胞培养
        5.1 淋巴管内皮细胞的复苏
        5.2 细胞传代
        5.3 细胞计数
        5.4 细胞冻存
    6 细胞增殖实验
    7 细胞迁移能力测定
    8 细胞成管实验
    9 RT-PCR技术检测各组不同浓度SiNPs干预后的HLECs中 VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达情况
        9.1 细胞总RNA的提取及浓度的测定
        9.2 反转录合成cDNA
        9.3 PCR 引物的设计
        9.4 RT-PCR 扩增
        9.5 结果分析
    10 Western Blot检测相关蛋白表达
        10.1 试剂的配制
        10.2 操作步骤
    11 统计学处理
第二章 实验结果
    1 SiNPs电镜下形态及粒径分布结果
    2 细胞形态学观察
    3 细胞活性检测
    4 不同浓度SiNPs对 HLECs迁移能力的影响
    5 SiNPs对 HLECs管样结构形成的影响
    6 qRT-PCR法检测不同浓度SiNPs干预HLECs后 VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的含量
    7 Western印迹检测不同浓度SiNPs干预HLECs后 VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3蛋白的含量(VEGF-C/GAPDH、 VEGF-D/GAPDH、VEGFR-3/GAPDH比值)
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读硕士期间研究成果
附录 (缩略词表)
致谢



本文编号：3798009