羟基丁酸羟基辛酸共聚物与脱细胞软骨基质复合支架的制备与体外降解性能研究
本文关键词:羟基丁酸羟基辛酸共聚物与脱细胞软骨基质复合支架的制备与体外降解性能研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:骨与软骨组织工程技术是应用生命科学和材料学相结合的原理,用生物替代物来修复人体的各种组织和器官损伤后的功能和形态,它的出现创造了修复损伤的新途径。关节软骨的损伤在临床损伤中占有相当大的比例,但是关节软骨的自我修复功能相当有限,因而损伤软骨的修复就显得相当迫切。骨与软骨组织工程作为组织工程的分支为软骨的修复提供了新的修复方式,并且也取得了一定的发展。选择合适的支架材料和制备相应的一体化复合支架,对于组织和器官修复有一定的应用意义。 本文采用聚羟基丁酸羟基辛酸混合物(PHBHOx)为主体材料,复合脱细胞软骨基质,运用溶剂浇铸-颗粒沥滤法,制备一体化复合支架,并且对复合支架的各种理化性质进行检测,选择最合适的复合比例,以达到制备骨与软骨组织工程要求的支架,同时在体外观察一体化复合支架的降解速率,模拟体内的理化环境,筛选出最适宜的一体化复合支架。 本实验取新鲜的猪的关节软骨后,用含有双抗的PBS液浸泡,放入含有[phenylmethanesulfony fluoride, PMSF]苯甲基磺酰氟的tri-HCL缓冲液,加入DNase酶和RNase酶,用D-hanks液冲洗等步骤制备ACTM。采用溶剂浇注-颗粒沥滤的方法与PHBHOx按不同浓度混合,制备出不同比例的复合支架。将各支架去污,蒸馏水充分清洗,准确称重后放入由玻璃酸钠、水和少量的葡萄糖和氨基酸组成的PH=7.4的混合溶液,使其浸过支架,密闭,放入温度为37℃的恒温水浴振荡器中,每周更换一次混合溶液。于2,4,6,8,10,12周,将样品从降解液中取出,过滤、洗涤、干燥、称重,并绘制降解失重率图。 上述实验结果显示,脱细胞软骨基质的比例不同,复合材料的完全降解时间也不同,8%含量的脱细胞软骨基质最符合软骨组织工程支架的要求,可用于骨与软骨组织工程对于软骨的修复。
【关键词】:聚羟基丁酸与羟基辛酸 脱细胞软骨基质 复合支架 体外降解速率
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R318.08
【目录】:
- 摘要6-7
- Abstract7-9
- 第一章 骨与软骨组织工程概述9-17
- 1.1 骨与软骨组织工程的建立9
- 1.2 骨与软骨组织工程三要素9-12
- 1.2.1 骨与软骨组织工程的种子细胞9-10
- 1.2.2 骨与软骨组织工程的载体支架10-11
- 1.2.3 骨与软骨组织工程的细胞调节因子11-12
- 1.3 软骨组织工程复合支架的制备技术12-15
- 1.3.1 静电纺丝技术12
- 1.3.2 溶剂绕铸-颗粒浙滤法12-13
- 1.3.3 水凝胶技术13
- 1.3.4 气体发泡技术13-14
- 1.3.5 快速成型法14
- 1.3.6 相分离-冷冻干燥法14-15
- 1.4 骨与软骨组织工程的构建情况15-17
- 第二章 脱细胞软骨基质的制备方法和理化性质17-23
- 2.1 脱细胞软骨基质制备所需材料17-18
- 2.2 脱细胞软骨基质的制备方法18-19
- 2.3 脱细胞软骨基质的观察指标19-22
- 2.3.1 肉眼观察脱细胞后关节软骨的形态19-20
- 2.3.2 脱细胞后的关节软骨的HE染色20
- 2.3.3 脱细胞后的Masson染色20-21
- 2.3.4 脱细胞软骨的甲苯胺蓝染色21-22
- 2.4 本章讨论22
- 2.5 本章小结22-23
- 第三章 PHBHOx/ACTWI复合一体化支架的制备和理化性质的研究23-30
- 3.1 —体化复合支架的材料和相应的设备23
- 3.2 —体化复合支架的制备方法23-24
- 3.3 一体化复合支架的理化性质检测方法24
- 3.4 统计学方法24
- 3.5 —体化复合支架理化性质的结果24-29
- 1.一体化复合支架的成型情况24-25
- 2.肉眼观察复合支架的外形25-26
- 3.电镜观察复合支架的电镜扫描26-27
- 4.一体化复合支架的力学性能27
- 5.复合支架的孔隙率27-28
- 6.复合支架的细胞粘附率28-29
- 3.6 本章讨论29
- 3.7 本章小结29-30
- 第四章 复合支架的体外降解30-32
- 4.1 复合支架的降解方法30
- 4.2 试验结果30-31
- 4.3 本章讨论31-32
- 结论32-33
- 参考文献(1)33-36
- 参考文献(2)36-39
- 附录39-40
- 个人简介40-41
- 致谢41
【参考文献】
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,本文编号:387350
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