基于信号放大的酶生物传感器的构建及生物医学应用研究

发布时间：2024-03-13 21:42

　　维持基因组的稳定性和完整性对于所有生物至关重要。DNA损伤能导致基因组不稳定、机体早衰、发育障碍、甚至癌症。DNA修复酶是一类参与DNA损伤修复的酶,其主要功能是特异性识别由各种内在或外在因素导致的DNA损伤,并利用各种修复途径修复这些损伤。DNA修复酶的异常表达与衰老、心血管疾病、人体免疫缺陷、神经退行性疾病和癌症密切相关,可作为疾病和癌症诊断的重要生物标志物。检测DNA修复酶的传统方法包括酶联免疫吸附法、基于放射性标记的凝胶电泳法、质谱法、高效液相色谱法和基于PCR的扩增法等。这些方法存在灵敏度差、放射性污染、仪器复杂昂贵、分析时间长、操作步骤繁琐等局限性,限制了这些方法的临床应用。因此,迫切需要发展简单、快捷、超灵敏检测DNA修复酶的新方法。本论文以端粒酶、尿嘧啶DNA糖基化酶(uracil DNA glycosylase,UDG)、人烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(human alkyladenine DNA glycosylase,hAAG)和人8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(human 8-oxoG DNA glycosylase 1,hOGG1)为研究模型,结合等温扩增技术、荧光...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1碱基切除修复途径示意图[31]

山东师范大学博士学位论文5图1-1碱基切除修复途径示意图[31]DNA糖基化酶分为两类：（1）单功能DNA糖基化酶和（2）双功能DNA糖基化酶[43]。单功能DNA糖基化酶能够切除损伤碱基，生成脱嘌呤/脱嘧啶（apurinic/apyrimidinic,AP）位点。双功能DNA糖....

图1-2端粒酶作用机制示意图[89]

山东师范大学博士学位论文8图1-2端粒酶作用机制示意图[89]。1.3酶的检测方法由于DNA修复酶在癌症诊断和治疗方面具有潜在应用价值，一系列检测DNA修复酶的方法相继开发出来[52,107-116]。端粒酶的检测方法包括端粒重复扩增法（telomericrepeatamplif....

图1-3基于血红素-石墨烯纳米材料的比色法检测端粒酶活性的示意图[124]

山东师范大学博士学位论文9刘松琴课题组发展了一种基于血红素-石墨烯纳米材料(H-GNs)对端粒酶活性进行无标签定量的比色分析法[124]。如图1-3所示，制备的H-GNs在高盐浓度溶液中分散性可调，其分散性随NaCl浓度的增加而降低。另外，它的分散性受溶液中所含的单链或者双链DN....

图1-4引物修饰的AuNPs比色法检测端粒酶活性的示意图[127]

山东师范大学博士学位论文10曲晓刚课题组发展了基于引物修饰的金纳米颗粒（AuNPs）可视化检测端粒酶活性的方法（图1-4）[127]。当无端粒酶存在时，端粒酶引物修饰的AuNPs在盐溶液中聚集，溶液颜色发生变化。当端粒酶存在时，端粒酶使引物延伸，阻止了AuNPs的聚集，溶液颜色不....

本文编号：3927608