纳米细菌纤维素复合物支架用于MDCK细胞三维培养的研究

发布时间：2024-04-14 16:21

　　三维细胞培养广泛应用于生物医学研究的各个领域,三维培养支架材料的研究是其中重要方面。细菌来源的纤维素经酸水解得到纳米纤维素,电镜观察其长度为600～800 nm,直径为50～150 nm。将其分别与海藻酸钠和Matrigel复合制成三维培养支架,测试其对MDCK细胞三维培养的效果。发现单独使用海藻酸钠作为凝胶支架材料,MDCK细胞在其中生长状况较差。纳米细菌纤维素与海藻酸钠复合制成的凝胶支架,可以提高MDCK细胞的生长,形成较多细胞团。对复合物支架上形成的细胞团进行细胞核与细胞膜荧光染色后观察,细胞团呈现三维生长所特有的囊腔结构,说明纳米细菌纤维素与海藻酸钠复合物支架可以用于MDCK细胞三维培养。在复合物中添加0.5%的Matrigel制成的凝胶支架,可以明显促进MDCK细胞的三维生长。这种在复合物中添加少量Matrigel以补充细胞三维生长必需的胞外基质的方式,在应用开发上具有一定前景。研究为探索纳米细菌纤维素作为细胞三维培养支架材料提供了前期基础。

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【部分图文】：

图1纳米细菌纤维素形貌

透射电镜观察统计,经过水解处理的细菌纤维素(BC)长度截短为600～800nm的棒状,直径为50～150nm(图1)。细菌纤维素与植物纤维素(PlantCellulose)在化学组成上没有明显的区别,但BC的纤维直径更小,弹性更大,机械强度更好[9],结晶度和重合度更高,并....

图2MDCK细胞在Matrigel胶中三维生长形成的细胞团

采用经典的方法在Matrigel胶中三维培养MDCK细胞[11],即在培养小室中预先铺Matrigel,待其形成凝胶后接种MDCK细胞,细胞陷入Matrigel凝胶中进行立体生长,收集细胞团后显微镜下呈现近似球状细胞团(图2),明显不同于贴壁时的单个细胞呈现的近似三角形或梭形。2....

图3MDCK细胞在支架材料上的生长

如图4所示,随着培养时间的延长,MDCK细胞在nBC/SA复合材料中形成的细胞团的中部细胞出现死亡,选取不同对焦平面进行观察可见腔体中空的三维立体结构,说明MDCK细胞可以在该复合材料中进行三维培养,并自发形成腔体结构。图4MDCK细胞在0.5%nBC/0.5%SA复合材料....

图4MDCK细胞在0.5%nBC/0.5%SA复合材料中三维生长形成的腔状结构

图3MDCK细胞在支架材料上的生长3讨论与结论

本文编号：3954957