人羊膜及其联合rhEGF凝胶治疗皮肤III度烧伤的实验研究

发布时间：2017-07-19 20:20

  本文关键词：人羊膜及其联合rhEGF凝胶治疗皮肤III度烧伤的实验研究

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【摘要】：目的：探讨人羊膜(human amniotic membrane, HAM)及其联合重组人表皮生长因子凝胶(recombinant human epidermal growth factor, rhEGF)治疗皮肤Ⅲ度烧伤的疗效与作用机制。方法：铜棒烫伤制备兔皮肤Ⅲ度烧伤,切痂后左侧创面分别贴敷新鲜羊膜、贴敷羊膜联合涂抹rhEGF凝胶、涂抹rhEGF凝胶,观测烧伤创面愈合率和创面痊愈时间,并行创面组织病理学检查,免疫组化染色与图像分析微小血管密度,双色免疫荧光染色观察人源细胞定植,Masson染色与图像分析检测皮肤组织纤维化程度,ELISA法检测创面组织细胞因子含量。结果：①第3d、8d和第18d,羊膜组烧伤创面愈合率分别为(35.78±6.75)%、(71.21±6.63)%和(96.65±1.42)%,羊膜联合rhEGF凝胶组与羊膜组愈合率相当,rhEGF凝胶组则为(23.75±3.57)%、(63.33±4.18)%和(92.79±1.80)%,前2组愈合率高于rhEGF凝胶组,3组不同处理方案创面愈合率明显高于对照组(P0.05或P0.01)。羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组创面分别于18.40±1.26d和18.00±1.83d达痊愈,rhEGF凝胶组20.20±1.69d痊愈,3组痊愈所需时间均显著低于对照组22.13士1.25d(P0.05),羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组创面痊愈时间较对照组显著缩短(P0.05)。②HE染色病理学检查,发现羊膜组、羊膜联合rhEGF组创面炎症反应减轻,更早的进入细胞增殖与创面修复,再生皮肤组织结构完整、附属器官丰富清晰。羊膜、羊膜联合rhEGF组,真皮层纤维化比率(8.80±1.65)%、(8.50±1.70)%低于正常皮肽(11.51±2.89)%和对照组及rhEGF组(P0.05或P0.01)；羊膜及羊膜联合rhEGF组皮下组织层纤维化比例(16.48±1.86)%、(16.02±2.56)%高于正常组,但明显低于对照组及rhEGF组(26.74±3.49%)、(26.70±3.27)%(P0.01)。③第8d,羊膜组与羊膜联合rhEGF组创面组织中,未检测到表达人细胞核特异性抗原阳性的红色荧光细胞。且新生组织微细血管数,羊膜组(19.56±6.00)及羊膜联合rhEGF组(19.42±5.05)显著高于对照组(7.38±1.80)和rhEGF组(8.08±1.34)(p0.0]),rhEGF组与对照组织微细血管数无明显差异。④第3d,羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组、rhEGF凝胶组SDF-1表达量分别为192.63±17.39ng/L、157.76±8.69ng/L和199.21±27.77ng/L,显著高于对照组(146.97±9.40ng/L,P0.05)和正常皮肤组织含量,羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组又显著高于rhEGF凝胶组(P0.05)；第8、18d已趋于正常皮肤组织水平。⑤第8d,羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶、rhEGF凝胶组新生组织TGF-β含量分别为3441.50±125.27、3071.25±221.04和3504.00±134.41,显著高于对照组(2912.50±181.68,P0.05),羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组TGF-p含量则明显高于rhEGF凝胶组(P0.05)。⑥第8d,羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组新生组织EGF含量明显高于rhEGF凝胶组(200.73±7.27)和对照组(198.39-+8.52)(P0.05)；第18d,羊膜组、羊膜联合rhEGF凝胶组和rhEGF凝胶组新生组织EGF含量则显著低于对照组(P0.05)。⑦第8、18d,羊膜、羊膜联合rhEGF凝胶组和rhEGF组新生组织bFGF含量高于正常皮肤含量,但3组间无明显差异(P0.05)。结论：羊膜及其联合rhEGF凝胶治疗皮肤Ⅲ度烧伤,明显提高愈合率,缩短痊愈时间,改善创面组织病理学改变,其作用机制涉及抑制炎症反应,促进新生血管形成,提高创面组织SDF-1、TGF-β和EGF水平,羊膜治疗Ⅲ度烧伤的疗效及其更接近完美愈合的作用优于传统的凡纱覆盖包扎与rhEGF凝胶治疗。
【关键词】：羊膜 rhEGF凝胶 Ⅲ度烧伤 皮肤再生 生长因子
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08;R644
【目录】：

• 英文缩略词3-5
• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-19
• 1.1 材料12-14
• 1.2 实验方法14-18
• 1.3 统计学处理18-19
• 2 结果19-29
• 2.1 Ⅲ度烧伤组织病理学检查19
• 2.2 创面大体观察19-21
• 2.3 皮肤组织病理学检查21
• 2.4 皮肤Masson染色21-23
• 2.5 人细胞核特异性抗原检测23-24
• 2.6 CD31阳性微小血管密度24-25
• 2.7 烧伤创面组织bFGF、SDF-1、TGF-β、EGF含量变化25-29
• 3 讨论29-33
• 4 结论33-34
• 参考文献34-37
• 综述 人羊膜应用的研究进展37-48
• 参考文献42-48
• 致谢48-49
• 作者简介49

【参考文献】

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本文编号：564717