细胞自噬在精氨酸酶治疗头颈部鳞状细胞癌中作用及机制的研究

发布时间：2017-10-10 01:22

  本文关键词：细胞自噬在精氨酸酶治疗头颈部鳞状细胞癌中作用及机制的研究

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【摘要】：目的：头颈部鳞状细胞癌是威胁人类健康的常见的恶性肿瘤之一,每年新发病例在持续增加,我国是世界上高发国家。尽管对头颈部肿瘤的治疗方法如手术治疗、放化疗不断改善,其五年生存率并未得到明显的提高。因此,有必要为头颈部肿瘤的治疗寻找新方法。有研究报道,精氨酸剥夺可以作为恶性实体瘤的治疗手段。重组人精氨酸酶(rhArg)是一种可以在人体内降解精氨酸的酶,有报道显示,它可以治疗某些精氨酸缺陷型的肿瘤,例如肝癌、肺癌和黑色素瘤。然而,它对于头颈部肿瘤的作用未见报道。自噬是通过降解损伤的细胞器和蛋白质,将降解产物循环利用的一个过程,以此来维持细胞稳态和细胞形态的完整性。研究表明,当细胞遭受缺氧、代谢紊乱以及细胞应激压力时可以诱导自噬的发生。自噬在肿瘤的形成及发展过程中起着复杂的作用。自噬既可以在肿瘤发展中起保护性的作用,也有研究报道称,自噬可以在肝癌细胞、乳腺癌细胞及卵巢癌细胞中导致肿瘤细胞发生自噬性细胞死亡。自噬在rhArg作用于头颈部肿瘤的作用未见报道。方法：我们利用MTT法检测rhArg对头颈部恶性肿瘤细胞如鼻咽癌细胞系(C666-1)、喉癌细胞系(Tu212)以及下咽癌细胞系(FaDu)的细胞毒性；单独作用及联合自噬抑制剂CQ和Baf Al对喉癌细胞系Tu212细胞的杀伤作用。利用透射电子显微镜(TEM)观察rhArg诱导Tu212细胞的自噬体产生。以Western blot法检测在C666-1、FaDu及Tu212细胞中ASS和OTC的表达情况；检测rhArg联合CQ和Baf Al对喉癌细胞系Tu212细胞的杀伤作用及自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ的表达。利用流式细胞术检测联合自噬抑制剂CQ和rhArg对下咽癌FaDu细胞凋亡的影响。采用激光共聚焦显微镜(Confocal microscopy)检测自噬流的产生情况。还对自噬相关信号通路进行初步解析。结果：本课题首次发现了rhArg对C666-1细胞、FaDu细胞及Tu212细胞的细胞毒性,因为这三种细胞OTC表达的缺失。首次发现了rhArg诱导了喉癌细胞Tu212发生自噬,并且同时检测到了自噬流的产生。自噬在rhArg作用于Tu212细胞中起着保护性作用,抑制自噬可以增强rhArg对Tu212细胞的毒性。Akt/mTOR信号通路和Erk1/2信号通路可能参与了rhArg诱导的Tu212细胞产生的自噬中的分子调控机制。RhArg可能作为一种对头颈部肿瘤的潜在治疗药物,联合应用自噬抑制剂和rhArg能增强rhArg对Tu212细胞的敏感性,提高其杀伤作用,为头颈部肿瘤的治疗提供了一条新思路。结论：1.rhArg对C666-1细胞、FaDu细胞及Tu212细胞的细胞毒性,因为这三种细胞OTC表达的缺失。2.rhArg诱导了喉癌细胞Tu212发生自噬和自噬流,抑制自噬可以增强rhArg对Tu212细胞的毒性。
【关键词】：重组人精氨酸酶 细胞自噬 头颈部鳞状细胞癌 细胞毒性
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.91
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 缩略词表9-10
• 第一章 引言10-15
• 第二章 RhArg对头颈部肿瘤细胞毒性的研究15-24
• 一、实验材料及仪器15-16
• 二、实验方法16-18
• 三、实验结果18-22
• 四、讨论22-23
• 五、实验结论23-24
• 第三章 细胞自噬在rhArg杀伤喉癌Tu212细胞中的作用研究24-40
• 一、实验材料及仪器24-25
• 二、实验方法25-28
• 三、实验结果28-37
• 四、讨论37-39
• 五、实验结论39-40
• 综述40-45
• 参考文献45-52
• 在读期间发表学术论文情况52-53
• 致谢53

【参考文献】

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1 Kuang-Rong Wei;Xia Yu;Rong-Shou Zheng;Xia-Biao Peng;Si-Wei Zhang;Ming-Fang Ji;Zhi-Heng Liang;Zhi-Xiong Ou;Wan-Qing Chen;;Incidence and mortality of liver cancer in China, 2010[J];Chinese Journal of Cancer;2014年08期

2 黄东宁;黄海欣;陆颖;;肿节风联合放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床观察[J];中国中西医结合杂志;2013年04期

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本文编号：1003533