IFN-γ调节CIK对T细胞亚群的影响及抗肿瘤作用的评价

发布时间：2017-10-13 19:44

  本文关键词：IFN-γ调节CIK对T细胞亚群的影响及抗肿瘤作用的评价

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【摘要】：目的:通过研究CIK细胞诱导培养过程中T细胞激活与调节方式,探索CIK细胞的实质,为CIK细胞免疫治疗效果的提升以及应用范围的延伸提供理论依据。方法一、利用流式细胞术分析CIK细胞诱导培养过程中T细胞凋亡的情况。二、通过分析CIK细胞诱导培养过程中不同的免疫调节因子对T细胞的调节作用。三、对比不同实验组TCRBV亚家族表达谱、细胞分化比例,靶细胞杀伤实验衡量CIK的胞毒活性。结果:一、IFN-γ使CIK诱导培养过程中CD3+CD4+细胞比例降低。二、IFN-γ在CIK诱导培养过程中抑制Treg细胞,提高CD3+CD56+细胞分化比例,并最终提高CIK抗肿瘤能力。三、体外诱导的CIK细胞对肿瘤患者表达偏移的TCRBV亚家族有纠正作用,能够使T细胞库中数量减少或被抑制的T细胞重新激活并增殖。结论:在CIK细胞的诱导培养过程中T细胞受到了免疫调节,其中IFN-γ对Treg细胞的抑制可能是调节的机制之一;体外诱导培养CIK细胞对T细胞多样性的恢复有促进作用,这对肿瘤患者免疫功能的恢复可能起到重要作用。
【关键词】：CIK Treg TCR TCRBV
【学位授予单位】：广东药学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R73-36
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 第一部分 CIK诱导培养过程中的细胞凋亡10-18
• 引言10
• 1 材料10-11
• 1.1 样本10
• 1.2 试剂10-11
• 1.3 仪器11
• 2 方法11-13
• 2.1 PBMC分离与CIK诱导培养11-12
• 2.2 流式细胞术分析CIK细胞亚群12
• 2.3 细胞凋亡分析12-13
• 3 结果13-16
• 3.1 CIK诱导培养初期细胞数减少13
• 3.2 CIK诱导培养初期部分细胞凋亡13-14
• 3.3 IFN-γ使T细胞群（CD3+）比例降低14-15
• 3.4 IFN-γ对CD4+T细胞的抑制作用15-16
• 4 小结16-18
• 第二部分 CIK诱导培养过程中Treg细胞受到抑制18-27
• 引言18
• 1 材料18-19
• 1.1 样本18
• 1.2 试剂18
• 1.3 仪器18-19
• 2 方法19-22
• 2.1 PBMC分离19-20
• 2.2 细胞的诱导培养20
• 2.3 流式细胞术分析CD4+CD25+细胞比例20
• 2.4 CIK细胞总RNA提取20-21
• 2.5 反转录合成cDNA第一股链21-22
• 2.6 荧光定量PCR与分析FoxP3 基因表达22
• 3 结果22-25
• 3.1 IFN-γ 提高CIK细胞群中CD3+CD56+细胞的比例22-23
• 3.2 IFN-γ 降低CIK细胞群中CD4+CD25+细胞的比例23-24
• 3.3 Fox P3 基因转录水平的差异24-25
• 3.4 CIK胞毒活性25
• 4 小结25-27
• 第三部分 CIK对T细胞平衡的调节27-34
• 引言27
• 1 材料27-28
• 1.1 样本27
• 1.2 试剂27
• 1.3 仪器27-28
• 2 方法28-31
• 2.1 流式细胞分析与细胞分选28
• 2.2 CD3+CD56+细胞分化比例分析28-29
• 2.3 K562 靶细胞杀伤实验29
• 2.5 总RNA提取29-30
• 2.6 TCRBV亚家族RT-PCR30
• 2.7 TCRBV亚家族表达分析30-31
• 3 结果31-33
• 3.1 PBMC与CIK细胞TCRBV基因亚家族表达差异31-33
• 4 小结33-34
• 讨论34-38
• 参考文献38-42

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本文编号：1026768