C1QBP在肾癌发展进程中的作用

发布时间：2017-10-15 01:40

  本文关键词：C1QBP在肾癌发展进程中的作用

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【摘要】：目的:肾癌在泌尿系统肿瘤中很常见,在我国有很高的发病率,是一种严重威胁人类健康的疾病。而肿瘤的发展与肿瘤细胞的增殖、趋化、侵袭以及黏附能力均有重要关系。肾癌靶向治疗尚有许多未知领域需要进一步探索。因此,目前亟需进一步探讨肾癌的发展机制并探索新的生物靶点。以往的研究显示C1QBP在多种恶性肿瘤中的表达增多,同时也有报道显示C1QBP在宫颈癌中低表达,说明C1QBP在肿瘤中的表达及对肿瘤生物学行为的调节有组织特异性,但目前有关C1QBP在肾癌中的研究尚未见报道。因此,本研究将检测C1QBP在肾癌中的表达情况,探讨C1QBP在肾癌发展中对肾癌细胞增殖、趋化、侵袭以及黏附能力的影响,初步明确C1QBP在肾癌发展中的作用。方法:采用Western Blotting、Realtime PCR、免疫组化的方法比较C1QBP在肾癌及癌旁组织中的表达水平;统计学分析C1QBP表达与临床病理参数之间的相关性。应用Realtime PCR的方法检测C1QBP在正常肾上皮细胞和肾癌细胞系中的表达水平。应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术构建C1QBP稳定降表达的人肾癌786-0细胞系,用Western Blotting和Realtime PCR的方法验证C1QBP表达水平。通过CCK8实验、趋化运动实验、Matrigel侵袭实验和细胞黏附实验分别检测C1QBP降表达对人肾癌786-0细胞系的增殖能力、EGF诱导的趋化运动能力、侵袭能力和EGF诱导的黏附能力的影响。通过基因芯片检测,分析C1QBP降表达对人肾癌786-0细胞系基因表达的影响,Realtime PCR验证差异基因表达。通过Western Blotting检测分析C1QBP调控肾癌黏附功能的分子机制。SCID小鼠体内实验研究C1QBP降表达对人肾癌786-0细胞系生长和转移的影响,并通过免疫组化检测C1QBP降表达对增殖相关抗原PCNA表达水平的影响。结果:1.肾癌组织中C1QBP的RNA及蛋白表达量低于癌旁组织,且C1QBP表达与患者临床组织学分期和术后生存率显著相关。2.C1QBP在肾癌细胞中的表达低于肾上皮细胞,且随着肾癌细胞恶性程度的增加C1QBP表达逐渐降低。3.应用慢病毒介导的RNA干扰技术成功建立C1QBP稳定降表达的肾癌786-0细胞系,Western Blotting和Realtime PCR验证C1QBP蛋白和基因表达均明显下降。4.C1QBP降表达的肾癌786-0细胞系与对照组相比增殖能力、EGF诱导的趋化运动能力、细胞侵袭能力和EGF诱导的黏附能力均明显增强。5.通过基因芯片分析,C1QBP敲除会影响细胞黏附相关基因的表达,通过Realtime PCR进一步检测了8个与黏附相关的基因,其中L1CAM在786-0-shC1QBP细胞中的表达显著增加。6.C1QBP敲除后肾癌细胞中β-catenin表达增高,GSK3蛋白磷酸化水平也增高。7.C1QBP降表达促进种植瘤生长和转移,并且种植瘤中PCNA表达明显高于对照组。结论:1.与癌旁组织相比,C1QBP在肾癌组织标本中表达较低,且与肿瘤病人的组织学分期和术后生存率相关,此外随着肿瘤细胞恶性程度增高C1QBP表达水平降低。2.通过降低C1QBP的表达,可以促进肾癌细胞的增殖、趋化、侵袭能力。3.C1QBP降表达可以增强肾癌细胞的黏附能力,可能是通过激活Wnt通路相关蛋白,上调LICAM发挥生物学作用。4.C1QBP降表达可以促进肾癌细胞在免疫缺陷小鼠体内的增殖能力和转移能力,表明C1QBP是调节肾癌发展的一个非常关键的因子。C1QBP不但可以成为肾癌诊断和预后的新的标记物,更有望为肾癌的治疗提供新的分子靶点。
【关键词】：C1QBP 肾癌 增殖 趋化运动 侵袭 黏附
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.11
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-11
• 前言11-18
• 研究现状、成果11-16
• 研究目的、方法16-18
• 对象和方法18-41
• 结果41-52
• 讨论52-56
• 结论56-57
• 参考文献57-63
• 发表论文和参加科研情况说明63-64
• 综述 C1QBP在感染炎症和癌症中的作用64-79
• 综述参考文献73-79
• 致谢79-80
• 个人简历80

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本文编号：1034361