OSW-1与线粒体DNA缺失对肝癌细胞PI3K信号通路的影响

发布时间：2017-10-20 13:49

  本文关键词：OSW-1与线粒体DNA缺失对肝癌细胞PI3K信号通路的影响

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【摘要】：目的：探讨OSW-1与线粒体DNA缺失对肝癌细胞PI3K信号通路的影响。方法：1、以SK-Hep-1细胞为对照组,建立线粒体DNA缺失的p0-SK-Hep-1细胞模型(实验组2),使用荧光实时定量PCR芯片比较两组细胞PI3K信号通路的表达差异。2、OSW-1干预SK-Hep-1 (实验组1)ρ0-SK-Hep-1(实验组3)细胞24小时后,使用荧光实时定量PCR芯片比较两组细胞P13K信号通路的表达差异。结果：1、SK-Hep-1细胞线粒体DNA缺失后细胞信号转导通路中基因：CASP9、 CD14、FOXO1、GJA1、GRB2、HSPB1、IGF1、MAPK3、PDPK1、PRKCA、 RPS6KA1、TLR4、TSC2表达上调；APC、CTNNB1表达下调。2、OSW-1作用于SK-Hep-1细胞后细胞信号转导通路中基因：FOS、GRB2、HSPB1、IRAK1、PDPK1、PRKCA、PRKCB、TLR4、TOLLIP、TSC2表达上调；APC、IGF1、IRS1、PDGFRA、PTPN11、SHC1表达下调。3、OSW-作用pO-SK-Hep-1细胞后细胞信号转导通路中基因：AKT1、CDC42、CDKN1B、FASLB、IRAK1、IRS1、PDGFRA、PDK2、PIK3R2、 PRKCB、SHC1、TIRAP、TOLLIP等表达上调。BAD、EIF2AK2、FOXO1、 IGF1、PABPC1、PAK1、PDK1、PDPK1、PIK3CG、RAC1、RASA1、RHOA、 SOS1、TLR4、WASL等表达下调。4、OSW-1作用于SK-Hep-1细胞组、OSW-1作用ρ0-SK-Hep-1细胞组都表达上调的基因有IRAK1、PRKCB;表达下调有IGF1、APC。结论：1、OSW-1和线粒体DNA缺失均能影响SK-Hep-1细胞P3K信号转导通路基因的表达。2、OSW-1靶向作用于SK-Hep-1细胞的线粒体,抑制其功能。3、OSW-1靶向抑制肝癌细胞IGF-1-PI3K-AKT信号传导通路；Grb2-p85-AKT信号转导通路；IRS1-PI3K-AKT-GLUT-4信号转导通路；PI3K-AKT-TSC1/TSC2-mTOR信号转导通路；TLR4-PI3K-AKT细胞信号转导通路,从而抑制肝癌细胞生长、增殖、能量代谢。
【关键词】：肝癌 OSW-1 PI3K信号通路 实时定量PCR芯片
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 缩略语表9-11
• 第一章 前言11-15
• 第二章 实验材料与方法15-27
• 2.1 主要实验材料15
• 2.2 实验试剂15-16
• 2.3 实验耗材和仪器16-17
• 2.4 实验溶液及培养基的配制17-18
• 2.5 SK-Hep-1细胞培养18-20
• 2.6 ρ~0SK-Hep-1细胞的培养和制备20-21
• 2.7 WST-8法绘制SK-Hep-1和p~0SK-Hep-1细胞生长曲线21
• 2.8 OSW-1对SK-Hep-1和p~0SK-Hep-1细胞PI3K信号通路基因表达水平的定21-25
• 2.9 采用ΔΔCt方法进行数据分析25-26
• 2.10 统计学处理26-27
• 第三章 实验结果27-32
• 3.1 OSW-1抑制SK-Hep-1细胞生长并致其死亡27
• 3.2 生长缺陷鉴定27-28
• 3.3 WST-8法绘制生长曲线28-29
• 3.4 变性琼脂糖凝胶电泳检测实验细胞RNA的纯度29-30
• 3.5 OSW-1对SK-Hep-1细胞的PI3K信号传导通路中基因表达的影响30
• 3.6 mtDNA缺失对SK-Hep-1细胞的PI3K信号传导通路中基因表达的影响30-31
• 3.7 OSW-1对p~0SK-Hep-1细胞的PI3K信号传导通路中基因表达的影响31-32
• 第四章 讨论32-41
• 第五章 结论41-42
• 参考文献42-47
• 致谢47-48
• 综述48-55
• 综述参考文献53-55

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