KDR基因多态性与TACE治疗肝细胞癌预后的关系

发布时间：2017-10-27 20:07

  本文关键词：KDR基因多态性与TACE治疗肝细胞癌预后的关系

  更多相关文章： 肝细胞癌 基因多态性 肝动脉化疗栓塞术 KDR预后

【摘要】：背景和目的肝癌(Liver Cancer)是威胁人类生命健康的常见恶性肿瘤。2012年,全世界约有782500例新发肝癌、745500例肝癌死亡病例,而仅在中国地区,新发病例及死亡病人就占了其中50%,并且发病率、死亡率仍然逐年上升。肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma, HCC)占肝癌约80-90%。新生血管、淋巴管参与肿瘤生长,肝细胞癌是一种富血供的恶性肿瘤,约90%的肝细胞癌由肝动脉供血,血管生成在肝细胞癌的发生发展中起重要作用。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor)及其特异性酪氨酸激酶受体是最重要的血管内皮细胞调节因子之一。KDR (kinase insert domain receptor,激酶插入区受体)是血管内皮生长因子最重要的酪氨酸激酶受体,编码KDR蛋白的KDR基因位于第4号染色体q11-q12, KDR主要生物学作用有：1、调控内皮细胞增殖,2、调控内皮细胞的迁移,3、调控内皮细胞存活,4、调控内皮细胞通透性。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)作为新一代的遗传标记物,是指在DNA分子水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,SNP分布广泛,在人群中的发生频率大于1%,通常只有两种等位型,而且具有稳定的遗传特性,可以通过多种途径影响基因功能,为疾病发生提供遗传性病因。大量流行病学研究表明,遗传因素在肝细胞癌发病中亦起重要作用。目前有关肝细胞癌SNP的研究主要集中在易感性方面,关于KDR基因多态性与肝细胞癌治疗疗效、预后相关性的研究较少,本课题拟在前期工作的基础上,结合局部治疗在肝细胞癌治疗中的地位及目前遇到的问题,从基因分子水平上分析肝细胞癌的异质性,深入了解KDR基因多态性与肝细胞癌疗效的关系,寻找有意义的遗传标记物,为肝细胞癌的个体化治疗提供依据。材料与方法筛选2011年-2013年在广东省人民医院介入治疗科收治的肝细胞癌患者,要求入组患者符合肝细胞癌的临床诊断或病理诊断,就诊时一线接受经皮肝动脉化疗栓塞术治疗。所有患者在接受治疗前留取外周静脉血,使用EDTA抗凝管保存血液标本于-80℃,利用QIAamp DNA Blood mini kits (DNA提取试剂盒)提取人类基因组DNA,并用分光光度法检测DNA质量。肝动脉化疗栓塞术采用seldinger技术,数字减影血管造影(digital substraction angiography,DSA)下使用微导管超选择至肿瘤供血动脉,注入化疗药和碘化油的乳化剂,碘油栓塞后再予栓塞供血动脉。人类基因组单体型图计划(hapmap project)研究中构建了人类DNA序列中常见的多态位点模式,运用单体型分型的方法可以找出约50万个标签SNPs (tagger SNPs)来代表整个基因图谱之中的SNP集合。我们在国际人类基因组单体型图计划提供的SNP公共数据库中选取了KDR基因13个SNP位点。最后参考SNP位点所在的位置及国内外文献报道,再选取4个非同义突变位点(rs2305948, rs1870377, rs34231037和rs34038364),以及一个功能性位点rs2071559,采用高通量MassARRAY时间飞行质谱生物芯片系统检测入组患者KDR基因位点的单核苷酸多态性。统计患者的基线人口学及临床病理资料,使用修订版实体瘤疗效评价标准(modified response evaluation criterion in solid tumors,mRECIST)评价患者行TACE术后的疗效,将CR+PR+SD的患者定义为疾病控制组,PD的患者定义为疾病进展组。定义无进展生存期(progressionfree survival, PFS)为首次治疗之日到首次记录到肿瘤进展(PD)或因任何原因死亡,以先出现者为准。统计分析比较疾病控制组和疾病进展组两组间基本临床资料的差异,分析KDR基因位点多态性基因型频率分布,计算不同基因型肝细胞癌疾病进展的相对危险度。采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析,计数资料以率比较,组间比较用Pearson's x2检验；两组间用独立样本t检验比较或非参数秩和检验；采用Kaplan-Meier法进行两组间的生存分析,用log-rank方法进行组间生存率比较；采用非条件logistic回归分析计算不同基因型频率与所研究人群肝细胞癌疾病进展风险,以优势比(odds ratio, OR)及95%可信区间(confidence intervals, CIs)表示相对危险度,分析肝细胞癌和基因型的相关性。所有统计均为双侧检测,P0.05为差异有统计学意义。结果对所有获得满意基因分型的患者进行相关人口学特征及临床指标统计分析,一共192例患者,其中159例(82.8%)为男性,33例(17.2%)为女性。乙型病毒性肝炎HBV表面抗原阳性的患者有152例(79.2%),没有HCV阳性病人；所有HBsAg (+)且乙肝病毒拷贝数500拷贝/m1的患者均使用抗乙肝药物,如拉米夫定,恩替卡韦,替米夫定等,单药或联合用药。病人中位年龄为53岁,50岁以上的患者有126位。肝硬化患者98例(51.0%)。基线水平AFP高于400ng/ml的有124例(64.5%),低于400 ng/m1的有68例(35.4%)。原发肿瘤大小范围为直径3.4-13cm,平均直径为6.8cm,其中肿瘤直径大于5cm的有146例(76.0%),小于5cm的有46例(24.0%)。癌肿病灶数目为1-8个,中位数为2个,57.8%患者病灶数≥2。肝功能按照child-pugh分级,A级的有138例(71.8%),B级的有54例(28.1%),B级的患者中42例为7分,12例为8分,无9分或者肝功能C级的患者。肿瘤侵犯门静脉的患者61例(31.8%),无血管侵犯的患者131例(68.2%)。BCLC分期：110例(57.3%)患者为B期,82例(42.7%)患者为C期。对患者进行疗效评价,其中CR者0例,PR和SD分别为42和36例,PD者114例。疾病控制组与疾病进展组中患者年龄(50岁vs≥50岁)、性别、肿瘤数目(1个vs≥2个)、AFP水平(400ng/ml vs ≥400ng/ml)、有无肝硬化、有无淋巴结转移的分布相似,P0.05。疾病控制组与疾病进展组中患者的肿瘤分期、肿瘤直径和有无门静脉癌栓的分布有统计学差异,P0.05。BCLCB期患者在疾病控制组和进展组中的数目分别为56和54个,BCLCC期患者在疾病控制组和进展组中的数目分别为22和60个,分布有统计学差异(卡方值＝11.2,P＝-0.001)。肿瘤直径5 cm的患者在疾病控制组和进展组中的数目分别为49和97个,肿瘤直径≤5 cm的患者在疾病控制组和进展组中的数目分别为29和17个,分布有统计学差异(卡方值=12.6,P=0.001)。门静脉侵犯患者疾病控制组和进展组中的数目分别为33和28个,无门静脉侵犯患者在疾病控制组和进展组中的数目分别为45和86个,分布有统计学差异(卡方值＝6.728,P=0.009)。年龄、性别、AFP、肿瘤数目、肝功能与PFS无关(P0.05),肿瘤BCLC分期、肿瘤大小、门静脉侵犯与PFS有关(P0.05)。肿瘤直径5cm较肿瘤直径5cm的患者PFS长(18个月vs 11.5个月,P0.001)。无门静脉癌栓的患者较肿瘤侵犯门静脉的患者PFS长(13个月vs 10个月,P0.001)。肿瘤分期为B期的患者较肿瘤分期为C期的患者PFS长(13.5个月vs 11个月,P=0.011)。经卡方检验得出基因型频率分布符合哈迪温伯格遗传平衡定量,P值均大于0.05,说明样本具有一定的人群代表性。KDR基因rs2071559位点检测到CC、TT和CT三种基因型。CC基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为32.0%和27.2%；TT基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为26.9%和46.5%；CT基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为41.0%和26.3%(卡方值=8.079,P＝0.018)。KDR基因rs1870377位点检测到TT、TA和AA三种基因型。TT基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为20.5%和36.0%；TA基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为34.6%和36.0%；AA基因型在疾病控制组和进展组中的分布频率分别为44.9%和28.1%。三种基因型在疾病控制组与进展组间分布频率比较具有显著性统计学差异(卡方值=7.495,P＝0.024)。其余SNPs位点各基因型在疾病控制组与进展组间分布频率均相当,P值未见显著统计学差异(P0.05)。rs2071559、rs1870377两个位点的各基因型与基线水平的肿瘤大小、是否有门静脉侵犯、肿瘤分期均无明显相关性。采用log-rank方法检验患者各位点不同基因型间PFS的关系,rs2071559位点CC基因型和CT+TT基因型的中位PFS分别为15.0月和13.0月,P=0.006。rs1870377位点AA基因型和TT+TA基因型的中位PFS分别为15.0月和11.5月,P=0.001。其余SNP位点不同基因型的PFS比较无显著差异。非条件Logistic回归分析显示,KDR基因rs2071559位点CC基因型是肝细胞癌疾病进展的保护因素,携带CC基因型的患者其疾病进展的风险较携带另外两种基因型的患者低(OR=0.347,95% CI=0.136-0.875, P=0.028)。KDR基因rsl870377位点AA基因型是肝细胞癌疾病进展的保护因素,携带AA基因型的患者其疾病进展的风险较携带另外两种基因型的患者低(OR=0.131,95% CI=0.032-0.451, P=0.034).其余SNP位点与肝细胞癌疾病控制或疾病进展之间均未发现显著相关。纳入可能的混杂因素进行多因素logistic回归分析,结果示：巴塞罗那分期和位点是影响肝细胞癌预后的重要因素,巴塞罗那B期和rs2071559位点携带CC基因型的患者发生疾病进展的比率较低(OR=0.133,95% CI=0.021-0.513, P= 0.025; OR=0.415,95% CI= 0.218-0.677, P= 0.031).结论KDR基因rs2071559位点多态性和肝细胞癌患者接受肝动脉化疗栓塞的临床疗效有关。
【关键词】：肝细胞癌 基因多态性 肝动脉化疗栓塞术 KDR预后
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要3-8
• ABSTRACT8-15
• 第一章 前言15-18
• 第二章 材料与方法18-35
• 第一节 临床资料18-24
• 第二节 VEGRF-2基因候选多态位点的检测24-33
• 第三节 统计学方法33-35
• 第三章 结果35-52
• 第一节 研究人群的人口学资料和临床基本资料35-36
• 第二节 临床病理特征与预后的关系36-42
• 第三节 基因分型结果42-46
• 第四节 rs2071559、rs1870377与肝细胞癌主要临床病理参数的关系46-48
• 第五节 各基因SNP位点与肝细胞癌TACE疗效的关联分析48-52
• 第四章 讨论52-62
• References62-65
• 中英文缩写词65-66
• 攻读学位期间发表成果66-67
• 附录67-69
• 致谢69-70

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙意,程瑞雪;肝细胞癌发生的分子机理[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2001年02期

2 潘平,刘爱连,宋清伟,郎志谨,付维利,孙萌;动态增强磁共振在评价肝细胞癌微血管密度中的意义[J];中国医学计算机成像杂志;2001年05期

3 王莉,陆建平,王飞,刘崎,田建明;肝细胞癌射频治疗后的磁共振表现[J];中国医学计算机成像杂志;2001年05期

4 苏建家;实验性肝细胞癌研究状况[J];医学文选;2001年01期

5 C.Brunken,P.Steiner,X.Rogiers,谭凯;肝细胞癌的保守治疗——经皮乙醇注射和冷冻疗法[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2001年04期

6 周迈;高守利;崔国平;赵凌;华京晖;王心宇;;纤维板层肝细胞癌[J];世界华人消化杂志;2001年11期

7 董继俊,李建功,马兴久,郝敏,王鹏霄,吴力群;血清丙氨酸转氨酶变化与肝细胞癌手术患者预后的关系[J];山东医药;2002年17期

8 周志刚,高剑波,杨学华,刘恒芳,管生;肝细胞癌的螺旋CT征象与病理及临床分期间关系研究[J];实用放射学杂志;2002年03期

9 孙培春,吴刚,庞志刚,王广田;肝细胞癌术后复发时间及类型的临床分析[J];中国肿瘤临床;2002年04期

10 丛文铭,张树辉;肝细胞癌少见类型介绍[J];中华病理学杂志;2002年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱明华;祝峙;刘晓红;林静;曲建慧;陈颖;曹晓哲;王力;倪灿荣;;乙型肝炎病毒感染与肝细胞癌发生关系的分子病理学研究[A];中华医学会病理学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

2 张佳林;张成钧;刘永锋;钟嘉明;褚志强;程颖;;肝细胞癌病人外周血调节性T细胞变化及其临床意义[A];第十二届全国肝癌学术会议论文汇编[C];2009年

3 董辉;;肝细胞癌4q杂合性缺失特点[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

4 杭振镳;陈代云;魏方全;雷松;;肝细胞癌及癌旁组织流式细胞术DNA含量及倍体检测分析[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 陈冬峨;董长垣;郭蕊;严亚琼;彭飞;居颖;;肝细胞癌危险因素的风险研究[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年

6 郑红;;实时定量PCR法检测肝细胞癌中Survivin基因mRNA的表达[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年

7 顾春燕;肖锋;;精氨酸酶-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义[A];第7届全国疑难及重症肝病大会论文集[C];2013年

8 王楠娅;李薇;;肝细胞癌的营养与代谢因素[A];2014《中国国际肿瘤营养学论坛》暨第二届《全国肿瘤营养与支持治疗学术会议》论文汇编[C];2014年

9 李晓飞;郑宇;;乙型肝炎病毒X蛋白与肝细胞癌的关系研究进展[A];第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会论文汇编[C];2009年

10 李威;林莹;杜海军;吴宝安;曾永明;陈君填;郭毓文;李蔓红;曾毅;;Epstein-Barr病毒与肝炎病毒在肝细胞癌发生中的作用[A];肝脏病防治学术研讨会及新进展学习班专刊[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 中国抗癌协会临床肿瘤学协作专业委员会主任委员 秦叔逵;治疗肝细胞癌 别只盯着靶向药[N];健康报;2013年

2 记者 王丹 管九苹;肝细胞癌标志物研究获新进展[N];健康报;2013年

3 吴一福;四军医大唐都医院发现硒蛋白P与肝细胞癌发生有关[N];中国医药报;2007年

4 黎彬;肝癌研究重要进展——预测肝癌转移成为可能[N];中国医药报;2004年

5 钱文彩;α2δ1阳性细胞为新的肝细胞癌干细胞[N];中国医药报;2013年

6 新美;基础研究进展推动肝脏病学进步[N];中国医药报;2008年

7 周金莲;MIB-1和bcl-2表达预测肝癌发生[N];中国医药报;2004年

8 张金山;要灵活运用影像学提供的方法和手段[N];中国高新技术产业导报;2001年

9 李杰;不能手术切除肝细胞癌的治疗[N];科技日报;2006年

10 ;修复肝细胞 改善肝功能[N];人民日报海外版;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 乔森;乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌临床特征的相关性研究[D];华中科技大学;2006年

2 曾昭冲;肝细胞癌放射治疗—实验室研究及临床实践[D];复旦大学;2005年

3 黄新辉;巨大肝细胞癌根治术后近期复发转移的临床与相关蛋白组学初步研究[D];福建医科大学;2013年

4 余微波;染色体6q25.1区域单核苷酸多态与肝细胞癌发病风险及预后的关联研究[D];北京协和医学院;2014年

5 刘安文;MAP4K4在原发性肝细胞癌中的表达及生物学意义[D];南昌大学;2009年

6 杜国清;乙肝病毒和丙肝病毒在启东肝细胞癌发生中的作用[D];中国协和医科大学;1996年

7 齐鲁楠;广西壮族自治区乙肝病毒/黄曲霉毒素双暴露肝细胞癌分子生物学行为的研究[D];广西医科大学;2012年

8 袁宝珠;黄曲霉毒素B_1致肝细胞癌发生的分子机制研究[D];中国协和医科大学;1994年

9 乔兵兵;肝细胞癌分子标志物的筛选及其生物学功能研究[D];中南大学;2012年

10 张猛;NuSAP1在肝细胞癌中的表达及其与肝细胞癌复发的关系[D];南方医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王长征;退变结节与肝细胞癌超顺磁性氧化铁增强磁共振成像研究[D];大连医科大学;2008年

2 薛建锋;肝细胞癌中凝血酶敏感蛋白-1与微血管密度的研究[D];郑州大学;2003年

3 陈红;肝细胞癌弥散加权成像与肿瘤血管生成的相关性研究[D];川北医学院;2012年

4 刘元;第二代测序技术对于肝细胞癌的研究[D];第二军医大学;2012年

5 陈玉国;肝细胞癌及门脉高压患者围手术期病毒载量及肝功能变化的研究[D];吉林大学;2013年

6 杨志华;启动子区甲基化对肝细胞癌锌指蛋白331表达的调控[D];安徽医科大学;2013年

7 陈豪;自然杀伤细胞对肝细胞癌预后的影响[D];复旦大学;2008年

8 贾林梓;肝细胞癌及肝局灶性结节性增生染色体杂合性丢失的研究[D];第四军医大学;2009年

9 朱明杰;髓源抑制性细胞在肝细胞癌中的表达及临床意义[D];苏州大学;2012年

10 王瞿辉;血管内皮生长因子B及其变位剪切体在肝细胞癌中的表达及意义[D];天津医科大学;2011年

，

本文编号：1104990