BRCA1介导PIG3表达调控的分子机制

发布时间：2017-10-28 12:30

  本文关键词：BRCA1介导PIG3表达调控的分子机制

  更多相关文章： PIG3 BRCA1 p53 prohibitin 乳腺癌

【摘要】：研究背景与目的：乳腺癌易感基因1(The breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)是1990年Hall等首次在乳腺癌家族中发现的抑癌基因,定位于染色体17q21。其发生遗传突变与遗传性乳腺癌或卵巢癌的发生密切相关。BRCA1在细胞内参与多种生理过程,包括DNA损伤修复、细胞周期检验点的控制、转录调控、染色体重塑和凋亡。文献报道：BRCA1能够调节P53的转录,BRCA1的氨基端残基(224-500)与p53的羧基端残基(300-393)相互作用,增加p53反应启动子P21、bax的转录活性从而诱导肿瘤细胞凋亡。PIG3(p53 inducible gene 3)是近年来发现的受p53调控的下游靶基因,参与p53起始的凋亡过程。但对于BRCA1是否能够调控PIG3诱导的凋亡以及具体机制目前仍未明确。本研究旨在探寻BRCA1对PIG3的调控作用,并初步探讨其调控的分子机制以及与乳腺癌患者总生存期(OS)的关系。为深入理解BRCA1发挥的生物学作用及其成为乳腺癌患者临床预后预测指标提供依据。方法：本实验选择四株乳腺癌细胞株MCF-7、T47D、SK-BR-3(p53野生型),和MDA-MB-157(p53缺失型)；两株结肠癌细胞：HCT116p53+/+细胞(p53野生型),HCT116p53-/-(p53缺失型)；149例乳腺癌患者组织芯片为研究对象。1.通过对149例乳腺癌患者组织芯片的免疫组化染色实验,检测乳腺癌组织中BRCA1 、PIG3表达的情况,利用相关统计学分析法分析BRCA1与PIG3表达之间的关系以及BRCA1和/或PIG3表达水平与乳腺癌患者OS的关系。2.通过基因转染、MTT、流式细胞术检测BRCA1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响。3.通过染色体免疫共沉淀、荧光素酶报告基因、免疫印迹实验,观察PHB1与PIG3启动子区(TGYCC)15的结合情况及PHB1对PIG3表达的影响。4.通过RT-PCR、蛋白免疫印迹、细胞免疫荧光实验,探讨BRCA1调控PIG3表达的分子机制。结果：1.149例乳腺癌患者肿瘤组织标本的免疫组化结果表明,BRCA1和/或PIG3高表达的乳腺癌患者OS显著延长(所有P0.05)。乳腺癌组织中BRCA1与PIG3的表达相关,且呈正相关关系(r=0.678,P0.001)。2.在p53野生型的乳腺癌细胞中,BRCA1抑制细胞的增殖,同时促进细胞的凋亡(P0.05),但在P53缺失型乳腺癌细胞中,BRCA1对细胞增殖、凋亡作用不显著,无统计学差异(P0.05)。3.在p53野生型的乳腺癌细胞中,BRCA1能够上调PIG3的表达(P0.05),但在p53缺失型乳腺癌细胞中,BRCA1不能上调PIG3的表达(P0.058)。4.染色体免疫共沉淀、荧光素酶报告基因实验结果表明,PHB1能够与PIG3启动子区(TGYCC)15结合,并且这种结合不依赖于p53及凋亡的刺激,激活PIG3的转录(P0.05)。5.通过瞬时转染PHB1过表达质粒和PHB1干涉质粒,利用蛋白免疫印迹实验发现PHB1能通过p53依赖或非依赖的方式上调PIG3的表达(P0.05)。6.无论是在p53野生型还是p53缺失型乳腺癌细胞中,过表达BRCA1后,BRCA1对PHB1的表达都无显著影响(P0.05)。结论：BRCA1通过调控p53而上调PIG3的表达,从而抑制乳腺癌细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。研究表明BRCA1和/或PIG3高表达与乳腺癌患者总生存期(OS)的延长相关。
【关键词】：PIG3 BRCA1 p53 prohibitin 乳腺癌
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 缩略词5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-18
• 一、实验材料18-21
• 二、实验方法21-32
• 三、实验结果32-44
• 四、讨论44-47
• 五、结论47-48
• 参考文献48-54
• 综述54-63
• 参考文献58-63
• 作者简介63-64
• 致谢64-65

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 许奕;BRCA1的研究进展[J];北京医学;2005年01期

2 李云青,肖翠英,张思仲;BRCA1基因研究的新进展[J];肿瘤;2001年01期

3 范文红,詹启敏;BRCA1和基因组稳定性[J];癌症;2003年03期

4 严景华,叶棋浓,朱建华,钟红君,郑回勇,黄翠芬;BRCA1相互作用蛋白的分离及鉴定[J];遗传学报;2003年12期

5 徐红先,周冬仙,熊文,邵超鹏;一种新的BRCA1等位基因[J];公共卫生与预防医学;2005年02期

6 周冬仙;熊文;徐红先;邵超鹏;;A Novel Frequent BRCA1 Allele in Chinese Patients with Breast Cancer[J];华中科技大学学报(医学英德文版);2006年05期

7 任婕;魏敏杰;金锋;杨栋;林哲珠;马文峰;金万宝;;散发性乳腺癌组织中BRCA1基因启动子甲基化与蛋白表达的相关性[J];中华肿瘤防治杂志;2007年03期

8 Rajasekaran R;George Priya Doss;Sudandiradoss C;Ramanathan K;Rituraj Purohit;Rao Sethumadhavan;;Computational and Structural Investigation of Deleterious Functional SNPs in Breast Cancer BRCA2 Gene[J];生物工程学报;2008年05期

9 靳翠平;岳天孚;;BRCA1基因与遗传性卵巢癌的相关研究[J];国际妇产科学杂志;2008年02期

10 ;Potentiality of phosphorylation of BRCA1 at Ser 1524 to activate p21 in response to X-ray irradiation[J];Nuclear Science and Techniques;2008年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 Tatyana Grushko;Olufunmilayo I Olopade;;BRCA1 Promoter Hypermethylation is Associated with Expression and Copy Number of BRCA1 in Sporadic Breast Cancer[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年

2 禹立霞;谢丽;沈洁;魏嘉;钱晓萍;丁慧;刘宝瑞;;BRCA1 mRNA在常见肿瘤中的表达水平[A];2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2013年

3 魏敏杰;任婕;赵海山;金万宝;;散发性乳腺癌组织BRCA1基因启动子甲基化与蛋白表达的相关性[A];药物相关蛋白质组学专题研讨会论文集[C];2006年

4 任婕;王麟;金锋;米小轶;魏敏杰;;BRCA1和相关蛋白在乳腺癌中的表达与相关分析[A];两岸三地药理学与临床药理学术会议论文集[C];2008年

5 Carlota Costa;Jose Javier Sanchez;Ana Gimenez-Capitan;Teresa Moran;Susana Benlloch;Miquel Taron;Rafael Rosell;;BRCA1,RAP80 and SUMO ligases (PIAS1 and PIAS4) mRNA expression levels and survival in advanced gastric cancer patients receiving second-line docetaxel chemotherapy[A];2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2011年

6 任婕;魏敏杰;;散发性乳腺癌组织中BRCA1表达和影响因素分析[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年

7 魏敏杰;任婕;金锋;金万宝;;BRCA1蛋白在散发性乳腺癌组织中的表达[A];药物相关蛋白质组学专题研讨会论文集[C];2006年

8 ;The mechanism of BRCA1 participate sporadic breast carcinomas genesis[A];两岸三地药理学与临床药理学术会议论文集[C];2008年

9 孙喜文;李志高;马玉彦;;BRCA2 N372H多态性和危险因素暴露交互作用与散发性乳腺的关系[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

10 任婕;魏敏杰;金锋;赵海山;姚维范;冯婉玉;;在不同亚群的散发性乳腺癌组织中BRCA1蛋白的表达[A];两岸三地药理学与临床药理学术会议论文集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前8条

1 冯卫东;“综合杀伤力”将成新癌症药物开发方式[N];科技日报;2009年

2 王伦　刘晨;高危人群应做BRCA1检测[N];健康报;2007年

3 编译 王迪;BRCA基因专利被判无效[N];医药经济报;2013年

4 王迪;BRCA1/BRCA2 基因变异提高乳腺癌发病风险[N];医药经济报;2003年

5 麦迪信;BRCA2携带者易患前列腺癌[N];医药经济报;2002年

6 张田勘;法国对美国基因专利说“不”[N];中国医药报;2002年

7 董欢霁;诊断乳腺癌 基因检测不可靠？[N];医药经济报;2006年

8 记者 班玮;预防性双乳切除并非一定必要[N];新华每日电讯;2009年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王雁;Ras相关Aurora kinases和Stanniocalcin 2在卵巢癌发生和进展中的作用及机理研究[D];复旦大学;2014年

2 杨纾旖;BRCA1/2和VDR热点突变区域的基因多态性与新疆哈萨克族乳腺癌的相关性研究[D];新疆医科大学;2015年

3 陶陶;高危家族卵巢癌和散发性卵巢癌患者BRCA1/2基因突变的研究及临床意义探讨[D];中国协和医科大学;2010年

4 曹文明;中国乳腺癌高危人群BRCA1/BRCA2基因的胚系突变研究[D];浙江大学;2013年

5 吴涛;新疆高风险遗传性乳腺癌BRCA1/2基因突变、启动子甲基化检测及相关因素分析研究[D];新疆医科大学;2013年

6 凌泓;BRCA1相关基因单核苷酸多态性与三阴性乳腺癌易感性的研究[D];复旦大学;2013年

7 任婕;乳腺癌易感基因BRCA1沉默与散发性乳腺癌发病相关性的研究[D];中国医科大学;2006年

8 王金华;人乳腺癌细胞MCF-7中BRCA2启动子的研究[D];中国协和医科大学;2009年

9 吕韵哲;[D];复旦大学;2006年

10 魏雷震;活细胞中BRCA1蛋白对DNA链损伤修复功能的原位分析[D];中国医科大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 汪洋;BRCA1和TopBP1表达与非小细胞肺癌含铂方案疗效的相关性研究[D];浙江大学;2015年

2 翟梦星;荷斯坦奶牛BRCA2基因、STAT3基因SNPs检测及其与乳房炎和产奶性状的关联分析[D];西北农林科技大学;2015年

3 窦晓梦;P53、Livin、ERCC1、BRCA1、PARP 在上皮性卵巢癌中表达及其对卵巢癌化疗耐药、临床预后的影响[D];河北医科大学;2015年

4 杜阳;分析ERCC1、BRCA1和GSTP1基因表达对非小细胞肺癌疗效及预后的影响[D];山西医科大学;2015年

5 余智;BRCA2回复突变与NACT-IDS后卵巢癌铂类抵抗的初步研究[D];四川医科大学;2015年

6 朱安娜;BRCA1/2突变与中国汉族女性乳腺癌发病关系及中外显性遗传多态性与其关联性研究[D];南方医科大学;2015年

7 魏金玉;BRCA1基因功能性遗传突变与中国人群食管鳞癌患病风险的相关性研究[D];北京化工大学;2015年

8 郭端英;KRAS和BRCA1/2基因突变状态对卵巢上皮癌患者预后的影响[D];南方医科大学;2014年

9 廖莹;遗传性卵巢癌家族BRCA1/2和MSH2基因突变的分析研究[D];南昌大学医学院;2015年

10 张艳苓;中央坏死性乳腺癌临床病理特征的研究[D];蚌埠医学院;2015年

，

本文编号：1108278