幽门螺杆菌裂解液诱导人胃癌SGC7901细胞多药耐药的研究

发布时间：2017-11-02 04:07

  本文关键词：幽门螺杆菌裂解液诱导人胃癌SGC7901细胞多药耐药的研究

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【摘要】：目的:明确幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori,H.p)能否诱导胃癌细胞对化疗药物产生多药耐药(multi drug resistance,MDR)。方法:本实验分为两部分,第一部分:选取合适浓度H.p裂解液和测定紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶三种化疗药物的IC50浓度(half maximal inhibitory concentration)。第二部分:探究将H.p裂解液与SGC7901细胞多药耐药的关系。对饥饿处理的SGC7901细胞加入不同浓度的H.p裂解液,用MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,噻唑蓝)比色法测得不同时间点的OD570(570nm optical density,570nm波长的吸光度值)值。绘制出SGC7901细胞生长曲线,筛选出与未加H.p裂解液的SGC7901细胞生长趋势相近的一组H.p裂解液浓度用于后续实验。根据紫杉醇、顺铂、5氟尿嘧啶的最佳血药浓度,将6个浓度的各化疗药分别与饥饿处理后的SGC7901细胞共同培养。于饥饿后第48h,测得上述各组的OD570值,计算三种化疗药物在不同浓度时对细胞的抑制率,用SPSS回归分析得出紫杉醇、顺铂、5氟尿嘧啶的IC50浓度(half maximal inhibitory concentration,半数抑制浓度)。探究将H.p裂解液与SGC7901细胞多药耐药的关系:实验分为空白组:SGC7901;对照组:SGC7901+IC50紫杉醇、SGC7901+IC50顺铂、SGC7901+IC505-氟尿嘧啶;H.p组:SGC7901+H.p裂解液+IC50紫杉醇、SGC7901+H.p裂解液+IC50顺铂、SGC7901+H.p裂解液+IC505-氟尿嘧啶。各药物及H.p裂解液均于饥饿处理SGC7901细胞后同时加入。于饥饿处理后第24h、第48h、第72h 3个时间点,用MTT法测得空白组、对照组和H.p组的细胞OD570值,比较对照组与H.p组间同种化疗药物对SGC7901细胞的抑制率变化。在饥饿处理后第72h时,检测三组SGC7901细胞中多药耐药相关蛋白P-gp(P-glycoprotein,P-糖蛋白)表达量。比较同种化疗药物在对照组、H.p组中P-gp蛋白表达相对灰度值改变。结果:1.随着H.p裂解液浓度降低,SGC7901细胞增殖能力升高,在5ug/ml H.p裂解液刺激下,SGC7901细胞生长曲线与未加SGC7901细胞生长曲线相似,故选取5ug/ml H.p裂解液体用于后续实验。2.随着药物浓度梯度升高,各化疗药物对SGC7901细胞抑制率升高,经回归曲线分析得出紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶的IC50浓度分别为6.591ug/ml、10.691ug/ml、39.683ug/ml。3.在IC50浓度下,紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶对各组SGC7901细胞的抑制率均随时间延长而升高;H.p组的三种化疗药物对SGC7901细胞抑制率分别与对照组比较明显降低,P0.05,有统计学意义。4.饥饿处理SGC7901细胞后第72h,三种化疗药物的对照组SGC7901细胞P-gp表达量分别与空白组比较均无明显差别,p0.05,无统计学意义;同种化疗药物的H.p组SGC7901细胞P-gp表达量分别与对照组比较均明显升高,P0.05,差异有统计学意义。结论:幽门螺杆菌裂解液可以诱导胃癌细胞产生多药耐药蛋白,降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性。
【关键词】：幽门螺杆菌 胃癌 多药耐药
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 主要英文缩略语索引11-12
• 前言12-14
• 实验材料与方法14-26
• 实验结果26-36
• 讨论36-40
• 结论40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-54
• 参考文献50-54
• 攻读学位期间的研究成果54-55
• 致谢55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 郭崇勇;柯卫锋;宋科瑛;王建丰;周凌;李克;;PI3K/AKT通路参与调控乳腺癌多药耐药和侵袭转移的研究[J];现代生物医学进展;2012年25期

2 帅晓明;韩高雄;陈俊华;王国斌;;胃癌体外药敏试验与多药耐药基因、多药耐药相关蛋白表达的关系[J];中华实验外科杂志;2006年10期

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本文编号：1129892