单中心连续100例肺癌术后EGFR基因突变检测结果分析

发布时间：2017-11-02 09:01

  本文关键词：单中心连续100例肺癌术后EGFR基因突变检测结果分析

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【摘要】：目的:收集单中心连续100例肺癌根治术后患者的组织病理标本,进行EGFR基因突变检测。本研究探讨原发性支气管肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变特点(突变位点及频率),及其与临床特征(病理类型、性别、吸烟情况、临床分期、分化程度)的关系。方法:收集湖南省肿瘤医院胸外二科连续100例原发性支气管肺癌住院患者的手术标本,经福尔马林溶液固定及石蜡包埋后,切取10-15片石蜡包埋白片。依据顺序流程采用二甲苯及不同浓度梯度的乙醇溶液脱蜡。按QIAamp DNA FFPE Tissue试剂盒的说明书步骤进行DNA提取。B-500超微量分光光度计测定DNA纯度,依A260/A2801.8的标准进行样本质控。采用EGFR基因突变检测试剂盒对样本的EGFR 18、19、20、21号外显子进行PCR扩增并测序。测序采用PyroMark Q24焦磷酸测序仪进行。将测得的序列与Genbank中EGFR基因野生型标准序列进行对比。确定突变位点及位点突变频率后,将所得结果进行汇总,并用卡方检验对突变与临床特征的关系进行统计学分析。P0.05有统计学意义。结果:100例中检测到EGFR基因突变33例(33%,33/100),其中外显子19号位突变19例;外显子21号位突变14例,未检测到其他位点突变患者。腺癌突变32例(47.76%,32/67);鳞癌突变1例(4.17%,1/24);其余病理类型均未检测到突变。男性突变率为16.39%(10/61),女性突变率为58.97%(23/39),χ2检验发现不同性别的突变率差异有统计学意义(P=0.0000130.05);既往吸烟的患者突变9例(15.52%,9/58),不吸烟者突变24例(57.14%,24/42),吸烟组与不吸烟组的突变率有统计学差异(P=0.0000150.05);女性不吸烟腺癌患者有22例发生突变(70.97%,22/31)。临床分期I、II、III、IV期突变率分别为41.30%(19/46)、26.32%(5/19)、20.83%(5/24)、57.14%(4/7)。分化程度上,高分化、高中分化、中分化、中低分化、低分化突变率分别为57.14%(4/7)、55.00%(11/20)、32.35%(11/34)、14.29%(3/21)、28.57%(4/14)。结论:EGFR突变主要集中在外显子19和21号位,EGFR基因突变与病理类型、性别和吸烟史相关,与临床分期无关,与病理分化程度似可见相关性。揭示EGFR基因突变特点以及与临床特征的关系有助于在临床中推荐可能出现EGFR突变患者进行基因检测,使这部分患者有可能在TKI靶向药物中获益。
【关键词】：肺癌 表皮生长因子受体 EGFR突变 焦磷酸测序
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料和方法13-19
• 2.1 标本收集与临床资料统计13
• 2.2 实验步骤13-17
• 2.2.1 标本获取与固定13
• 2.2.2 组织样本石蜡包埋13-14
• 2.2.3 脱蜡及DNA提取14-15
• 2.2.4 RT-PCR扩增15-16
• 2.2.5 焦磷酸测序16-17
• 2.3 统计学分析17-19
• 第3章 结果19-23
• 3.1 病例临床特征19
• 3.2 EGFR基因突变特点19
• 3.3 EGFR基因突变与临床特征的关系19-23
• 3.3.1 EGFR基因突变与病理类型的关系19
• 3.3.2 EGFR基因突变与性别及吸烟史的关系19-20
• 3.3.3 EGFR基因突变与分期及分化程度的关系20-23
• 第4章 讨论23-27
• 第5章 结论27-29
• 参考文献29-35
• 第6章 综述 EGFR-TKI 术前新辅助靶向治疗35-43
• 参考文献40-43
• 攻读硕士期间的科研成果43-45
• 致谢45

【参考文献】

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本文编号：1130840