小白菊内酯干预Jurkat细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制

发布时间：2017-11-10 07:01

  本文关键词：小白菊内酯干预Jurkat细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制

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【摘要】：目的:通过体外模拟骨髓微环境,观察急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓基质细胞(BMSCs)对Jurkat细胞的粘附作用及小白菊内酯(PTL)对此粘附作用的干预效果,并探讨其可能的作用机制。方法:采集2013年10月-2014年3月于桂林医学院附属医院住院经FAB分型及MICM分型确诊为急性淋巴细胞白血病并经治疗后缓解的6例患者髂后上棘骨髓液,体外分离培养BMSCs。Jurkat细胞复苏后传代培养,取生长状态良好的细胞用于实验,建立BMSCs与Jurkat细胞共培养模型。设置Jurkat细胞组、BMSCs组、BMSCs+Jurkat细胞组、BMSCs+Jurkat细胞+PTL 4μmol/L组、BMSCs+Jurkat细胞+PTL 8μmol/L组、BMSCs+Jurkat细胞+PTL 12μmol/L组、BMSCs+Jurkat细胞+PTL 16μmol/L组。通过MTT法分别检测加入PTL前、后两者共培养24h、48h的粘附率,观察BMSCs对Jurkat细胞的粘附作用及PTL的干预效果;通过ELISA法测定PTL干预前、后两者共培养上清液中可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)的表达;采用RT-PCR法检测PTL干预前、后共培养模型中BMSCs VCAM-1 mRNA的相对表达量。结果:MTT法结果显示,药物作用24h后,对照组和PTL各浓度组(4μmol/L,8μmol/L,12μmol/L,16μmol/L)的粘附率分别为59.64%±4.32%、39.10%±3.80%、28.52%±4.74%、21.01%±3.55%、13.92%±1.88%,对照组与PTL各浓度组相比差异有统计学意义(F=133.21,P0.01),各浓度组之间比较均P0.01;随着作用时间延长,48h后对照组和PTL各浓度组的粘附率分别为67.37%±5.02%、30.21%±0.49%、22.43%±1.76%、14.71%±0.65%、8.00%±1.19%,对照组与PTL各浓度组相比差异有统计学意义(F=533.70,P0.01),各浓度组之间比较均P0.01。ELISA法结果显示药物作用24h后PTL各浓度组共培养上清液中sVCAM-1浓度显著低于对照组(F=545.56,P0.01),PTL呈浓度依赖性抑制BMSCs分泌sVCAM-1(R=-0.99,P0.01),PTL16μmol/L组上清液中sVCAM-1浓度基本降至单独培养的BMSCs组水平,两组之间差异没有统计学意义(P0.05)。RT-PCR结果显示PTL各浓度组BMSCs VCAM-1 mRNA相对表达量显著低于对照组(F=7006.15,P0.01),PTL呈浓度依赖性抑制BMSCs VCAM-1 mRNA表达(R=-0.99,P0.01),PTL16μmol/L组VCAM-1 mRNA表达基本降至单独培养的BMSCs组水平,两组之间差异没有统计学意义(P0.05),与ELISA结果相一致。结论:小白菊内酯在体外呈剂量依赖性抑制BMSCs对Jurkat细胞的粘附,其作用机制可能与抑制BMSCs VCAM-1的表达有关。
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.71

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本文编号：1165540