联合调节CDH1和KSP基因表达抑制肺癌A549细胞的增殖和侵袭

发布时间：2017-11-13 19:29

  本文关键词：联合调节CDH1和KSP基因表达抑制肺癌A549细胞的增殖和侵袭

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【摘要】：目的:探讨联合下调纺锤体驱动蛋白基因(KSP)和上调CDH1基因的表达对肺癌A549细胞增殖和侵袭的影响。方法:通过转染试剂,将靶向KSP基因的si RNA和靶向CDH1基因启动子的sa RNA转染到A549细胞中。按照转染混合物的不同和对比对照组将细胞划分为五组,分别是A组、B组、C组、D组和E组。MTT法检测细胞增殖能力。荧光定量PCR法检测KSP和CDH1基因m RNA的表达变化情况。通过免疫印迹(Western Blot)法检测细胞内KSP和E-钙黏蛋白的表达情况,通过Transwell侵袭实验进行A549细胞侵袭能力的检测。结果:si RNA和sa RNA处理A549细胞后,细胞增殖能力和穿过基底膜的A549细胞个数显著减少(p0.05),荧光定量PCR结果显示,si RNA显著下调KSP的m RNA的表达(p0.05);sa RNA显著上调CDH1基因m RNA的表达(p0.05)。蛋白质免疫印迹检测结果显示,KSP蛋白表达量显著降低(p0.05);E-钙黏蛋白的表达量显著升高(p0.05)。并且联合转染对细胞的增殖和侵袭的抑制效果更明显(p0.05)。结论:si RNA能够显著下调KSP基因的表达,sa RNA能够显著的上调CDH1基因的表达;而si RNA和sa RNA联合应用时的效果明显优于si RNA或sa RNA单基因调控的效果,这也表明KSP和CDH1两种基因可能在细胞信号转导网络中存在联系。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2

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本文编号：1182090