MTA1参与化疗应激反应促进乳腺癌细胞转移的作用研究

发布时间：2017-11-13 22:32

  本文关键词：MTA1参与化疗应激反应促进乳腺癌细胞转移的作用研究

  更多相关文章： 乳腺癌 表柔比星 化疗 转移 转移相关蛋白1

【摘要】：研究背景:乳腺癌是目前女性中发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。随着乳腺癌研究的深入和治疗手段的发展,该病的预后正不断改善。多数乳腺癌患者在治疗后可获得明显缓解,即使Ⅲ期乳腺癌患者五年生存率亦可达到70%左右。但即便如此,患者的长期生存依然很难做到,而导致乳腺癌患者死亡的首要因素就是肿瘤的转移。因此控制肿瘤转移是乳腺癌治疗相关的研究中亟待解决的问题。化疗是乳腺癌治疗的常规手段之一,在临床上有着广泛的应用。化疗药物通过其细胞毒性作用杀伤肿瘤细胞,通常用作乳腺癌患者手术前后的辅助治疗,或者作为保守治疗方法应用于不能接受手术的患者。但既往有研究表明,化疗具有潜在的促进肿瘤转移的效应。我们认为损伤性的环境因素可以引起肿瘤的应激反应,促使肿瘤转移以逃避不利环境。化疗作为一种强烈的损伤因素,对于肿瘤来说显然是一种强烈的应激信号,是否具有刺激肿瘤转移的效应,值得探讨。转移相关蛋白1(Metastasis-associated protein 1,MTA1)是一个与乳腺癌转移密切相关的重要分子,其过表达常见于包括乳腺癌在内的多种人类恶性肿瘤,且往往预示着肿瘤的高级别、高转移倾向和不良预后。更重要的是,MTA1是一种应激反应蛋白,其表达明显受到环境因素的调控。损伤性条件如缺氧、紫外线、电离辐射和炎症等均可诱导MTA1的表达,而化疗对乳腺癌细胞中MTA1表达水平的影响,尚未见文献报道。因此我们希望通过实验,观察化疗对乳腺癌转移潜能的影响,分析在此过程中MTA1表达水平的变化及其发挥的作用,将MTA1与化疗后乳腺癌细胞生物学行为的改变联系起来。目的通过观察化疗药物表柔比星处理前后乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,分析化疗对乳腺癌转移潜能的影响。通过比较表柔比星处理前后乳腺癌细胞中MTA1的表达水平,以及在抑制MTA1表达后观察表柔比星处理效应的变化,分析MTA1在化疗造成的乳腺癌细胞的生物学行为改变中发挥的作用。通过对乳腺癌小鼠模型给予表柔比星处理,观察体内化疗对乳腺癌肺转移的影响。方法1.对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231给予半数抑制剂量的表柔比星处理6h或12h,用划痕实验和transwell实验分析化疗对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。2.提取表柔比星处理组和未处理组细胞的总RNA和蛋白,通过Real-time PCR和Western blot分析表柔比星处理对乳腺癌细胞中MTA1表达水平的影响。3.用无意义的NC si RNA或MTA1特异性si RNA转染MCF-7和MDA-MB-231细胞,通过Real-time PCR和Western blot分析转染si RNA对细胞内MTA1表达水平的影响。4.将MCF-7和MDA-MB-231细胞各分为四组,Control组为正常对照,Epi组接受6h表柔比星处理,Epi+NC si RNA组预转染NC si RNA后接受6h表柔比星处理,Epi+MTA1 si RNA组预转染MTA1特异性si RNA后接受6h表柔比星处理。通过划痕实验和transwell实验观察细胞的迁移和侵袭能力,观察MTA1抑制后表柔比星对乳腺癌细胞转移潜能的影响是否发生改变。5.建立小鼠4T1乳腺癌模型,实验组小鼠给予3mg/kg较低剂量表柔比星化疗,对照组小鼠给予生理盐水,每周给药1次,持续3周。比较两组小鼠肺表面转移灶数量,分析动物体内化疗对乳腺癌转移潜能的影响。结果:1.划痕实验中,表柔比星6h处理组的MCF-7和MDA-MB-231细胞,与对照组相比划痕愈合距离显著增加。Transwell实验中,6h处理组的MDA-MB-231细胞与对照组相比穿膜细胞数显著增加。12h处理组细胞中没有观察到这些效应。MCF-7细胞难以有效穿膜,transwell实验并未取得有意义的结果,后续实验不再考察MCF-7细胞的侵袭性。2.表柔比星处理后的MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞均表现出MTA1 m RNA水平和蛋白水平的增高。3.与对照组和无意义NC si RNA组细胞相比,转染MTA1特异性si RNA可以显著降低MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞中MTA1的m RNA水平和蛋白水平。4.在MCF-7和MDA-MB-231细胞的划痕实验中,与Control组细胞相比,Epi组/Epi+NC si RNA组细胞的划痕愈合距离显著增加;与Epi组细胞相比,Epi+MTA1si RNA组的划痕愈合距离显著减少。在MDA-MB-231细胞的transwell实验中,Epi组/Epi+NC si RNA组穿膜细胞数显著多于Control组,Epi+MTA1 si RNA组穿膜细胞数显著少于Epi组。5.在4T1乳腺癌小鼠的体内实验中,相比于对照组,给予表柔比星化疗的实验组小鼠有更多的肺表面转移灶形成。结论1.表柔比星处理可以在体外实验中增加乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,这一效应受到药物处理时间的制约。处理时间过长会导致细胞严重损伤,无法观察到该效应。2.表柔比星处理可以显著提高乳腺癌细胞中MTA1的表达,而MTA1特异性si RNA可以有效抑制乳腺癌细胞中MTA1的表达。3.抑制MTA1可以部分抑制表柔比星处理引起的乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的增加。提示MTA1是表柔比星处理后肿瘤应激反应过程中的一个效应分子。4.小鼠体内低剂量表柔比星化疗可以促进4T1乳腺癌的肺转移。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄啸原;用“印度阅兵”形容乳腺癌合适吗?[J];诊断病理学杂志;2001年02期

2 张嘉庆,王殊,乔新民;乳腺癌的现状和远景[J];中华外科杂志;2002年03期

3 张维彬,汪波,石灵春;中医药在现代乳腺癌治疗中的运用[J];中国中西医结合急救杂志;2002年01期

4 薛志勇;食物与乳腺癌[J];山东食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建军,郑国华;乳腺癌相关标志物的研究进展[J];山东医药;2002年33期

6 陆尚闻;;男人也患乳腺癌[J];环境;2003年12期

7 ;新技术清晰拍摄早期乳腺癌细胞[J];上海生物医学工程;2005年04期

8 田富国;郭向阳;张华一;;乳腺癌诊治研究新进展[J];肿瘤研究与临床;2005年S1期

9 马涛,谷俊朝;血管内皮生长因子与乳腺癌的临床研究进展[J];国外医学(外科学分册);2005年01期

10 郭庆良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相关性研究进展[J];国外医学.外科学分册;2005年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治疗融合蛋白[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

2 郭红飞;;中医治疗乳腺癌的策略[A];江西省中医、中西医结合肿瘤学术交流会论文集[C];2012年

3 庞朋沙;伍会健;;乳腺癌治疗靶标的研究进展[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

4 陆劲松;邵志敏;吴炅;韩企夏;沈镇宙;;新型维甲酸抑制乳腺癌细胞的生长及诱导凋亡的机制研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 刘爱国;胡冰;;乳腺癌临床治疗进展[A];安徽省抗癌协会第四次代表大会暨乳腺癌、肺癌专业委员会成立会议、安徽省肿瘤防治进展学术研讨会论文汇编[C];2001年

6 张嘉庆;王殊;乔新民;;乳腺癌的现状和远景[A];第一届全国中西医结合乳腺疾病学术会议论文汇编[C];2002年

7 刘清俊;;乳腺癌综合治疗的新进展[A];山西省抗癌协会第六届肿瘤学术交流会论文汇编[C];2003年

8 邵志敏;;21世纪乳腺癌治疗的展望[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年

9 陈松旺;张明;;乳腺癌治疗的回顾与展望[A];西部地区肿瘤学学术会议论文汇编[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凯阳;王兆钺;阮长耿;;组织因子途径抑制物-2在乳腺癌细胞中的表达研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;血检有望揭示乳腺癌治疗效果[N];医药经济报;2004年

2 记者 郑晓春;乳腺癌细胞扩散基因被找到[N];科技日报;2007年

3 中国军事医学科学院肿瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新疗法[N];中国妇女报;2002年

4 王艳红;抑制ＤＮＡ修补可消灭乳腺癌细胞[N];医药经济报;2005年

5 詹建;乳腺癌饮食 两个时期不一样[N];中国中医药报;2006年

6 辛君;乳腺癌扩散基因“浮出水面”[N];大众卫生报;2009年

7 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年

8 记者 吴春燕　通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年

9 王乐　沈基飞;我科学家发现导致乳腺癌耐药的新标志物[N];科技日报;2011年

10 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 柴红燕;疾病状态下CYP4Z1和4A的生物学行为及其药物干预研究[D];武汉大学;2012年

2 李凯;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白调控乳腺细胞的分化并影响乳腺癌的预后[D];复旦大学;2014年

3 江一舟;乳腺癌新辅助化疗前后基因变异检测及其功能论证[D];复旦大学;2014年

4 马邵;酪氨酸去磷酸化增强表皮生长因子受体在乳腺癌治疗中靶向性的研究[D];山东大学;2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基转移酶PRMT7诱导乳腺癌细胞发生表皮—间质转换及转移的作用机制研究[D];东北师范大学;2015年

6 侯培锋;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上调缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)诱发高致瘤性干细胞样乳腺癌细胞机制研究[D];福建医科大学;2014年

7 李丽丽;分泌蛋白SHON调控乳腺癌细胞EMT的分子机制研究[D];东北师范大学;2015年

8 陈丽艳;PI3K抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乳腺癌协同杀伤作用的分子机制研究[D];延边大学;2015年

9 朴俊杰;乳腺癌差异基因筛选及PAIP1对其生物学行为的影响[D];延边大学;2015年

10 余科达;功能性论证雌醌代谢酶基因多态性与乳腺癌发生易感性的关联[D];复旦大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杜文英;乳腺癌分子亚型的临床与病理特点[D];郑州大学;2011年

2 贾晓菲;彩色多普勒超声与乳腺癌病理及免疫组化指标的相关性研究[D];内蒙古大学;2015年

3 靳文;乳腺癌全基因组DNA甲基化修饰的研究[D];内蒙古大学;2015年

4 吴坤琳;TLR4/MyD88信号通路对乳腺癌侵袭性影响的实验研究[D];福建医科大学;2015年

5 葛广哲;树，

本文编号：1182731