乳腺癌MCF-7抗原负载的DC联合CIK细胞对乳腺癌MCF-7细胞株体内外作用的研究
发布时间：2017-11-15 05:08
本文关键词：乳腺癌MCF-7抗原负载的DC联合CIK细胞对乳腺癌MCF-7细胞株体内外作用的研究
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【摘要】：背景:乳腺癌是目前导致女性癌症死亡的主要原因之一。目前,针对乳腺癌的临床手段主要为手术、放疗、化疗、内分泌治疗以及分子靶向治疗等多种治疗方式。虽然乳腺癌总体治疗效果很好,但有部分患者在接受规范化治疗后,仍会出现复发转移,所以对于乳腺癌的长线治疗仍然是一项具有挑战性的工作,寻找新的乳腺癌治疗策略刻不容缓。近年来,逐步有研究发现以抗原—抗体免疫反应着手,通过调节抗肿瘤的免疫反应可以利用免疫系统鉴别和消灭肿瘤的能力,从而避免肿瘤复发和转移,但其于乳腺癌治疗方面并没有被完全认识。本实验拟利用提取乳腺癌MCF-7冻融抗原,联合来源于健康人外周血的DC与CIK细胞,并共同作用于乳腺癌MCF-7细胞,观察其在对于乳腺癌细胞活性,侵袭能力及细胞种植成瘤方面的影响。目的:通过对健康人外周血来源的DC进行乳腺癌MCF-7冻融抗原负载,联合CIK细胞作用,观察其在对于乳腺癌细胞活性、侵袭能力及细胞种植成瘤能力的影响,从而为乳腺癌新型细胞免疫治疗提供依据。方法:采用循环冻融法制备人乳腺癌MCF-7无菌冻融抗原。在严格无菌条件下采取健康人50ml外周静脉血,采用梯度密度区带离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),通过细胞因子rh GM-CSF和rh IL-4定向诱导,中间分组加入冻融抗原进行负载后运用TNF-α促进DC细胞成熟,并通过rh IFN-γ、rh IL-2诱导成熟的CIK细胞,两种细胞分组联合作用。以普通乳腺癌MCF-7细胞做对照,用CCK8、Transwell方法及裸鼠体内实验,联合肿瘤细胞种植皮下成瘤,分析抗原负载后对乳腺癌细胞毒作用的改变、细胞侵袭能力及成瘤能力的影响,最终评估MCF-7细胞冻融抗原负载的DC联同CIK细胞在乳腺癌治疗中的作用。结果:(1)乳腺癌细胞可于反复冻融状态下发生裂解并释放抗原。(2)CCK8实验结果显示:在DC细胞联合CIK细胞对乳腺癌细胞的体外杀伤作用中,DCM CF-7+CIK组在各效靶比下对于乳腺癌MCF-7细胞e笊鄙寺示罡，
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