LncRNA-HOTAIR对大肠癌CCL244细胞增殖侵袭及辐射敏感性的影响
本文关键词:LncRNA-HOTAIR对大肠癌CCL244细胞增殖侵袭及辐射敏感性的影响
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【摘要】:目的:探究长链非编码RNA HOTAIR对大肠癌CCL244细胞增殖侵袭及辐射敏感性的影响。方法:应用实时荧光定量PCR方法检测53例大肠癌肿瘤组织、53例对应癌旁正常组织、四株大肠癌细胞(HCT116、CCL244、SW480、DLD-1)及正常肠粘膜细胞(FHC)中HOTAIR的相对表达量。通过瞬时转染将化学合成的人HOTAIR siRNA及阴性对照转染至大肠癌细胞CCL244中,实时荧光定量PCR验证下调效果。MTT法、克隆形成实验及细胞周期实验检测下调HOTAIR对细胞增殖的影响。细胞划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测下调HOTAIR对细胞侵袭迁移的影响。克隆形成联合辐照检测下调HOTAIR对细胞辐射敏感性的影响。流式细胞术检测下调HOTAIR对辐射诱导的细胞凋亡的影响。Western blot检测下调HOTAIR对细胞凋亡及迁移相关蛋白表达的影响。结果:相较于53例对应癌旁正常组织及正常肠粘膜细胞,在53例肿瘤组织及四株肿瘤细胞中HOTAIR高表达。瞬时转染siRNA显著降低CCL244细胞中HOTAIR表达量。下调HOTAIR抑制CCL244细胞生长增殖,抑制CCL244细胞侵袭迁移,促进辐射诱导的CCL244细胞凋亡,增强CCL244细胞的辐射敏感性,抑制迁移相关蛋白MMP2、MMP9的表达,抑制抗凋亡基因Bax的蛋白表达而促进促凋亡基因Bcl-2的蛋白表达。结论:HOTAIR在大肠癌肿瘤组织及细胞中高表达,下调HOTAIR可抑制大肠癌CCL244细胞的增殖侵袭并促进细胞的凋亡及辐射敏感性。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R735.34
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,本文编号:1253294
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