顺铂联合碘伏对体外培养人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

发布时间：2017-12-08 04:23

  本文关键词：顺铂联合碘伏对体外培养人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

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【摘要】：目的:顺铂(DDP)作用机制特殊,对于多种恶性实体瘤的治疗疗效显著且价格低廉,因而在临床的应用得到极大推广。然部分患者先天或后天在肿瘤治疗过程中呈现出对顺铂的耐药性以及交叉耐药性,加之剂量相关性毒性不良反应等问题阻碍了顺铂在临床的发展应用。而碘伏从进入临床应用以来,多以消毒准备工作为主,其应用价值有待开发。为进一步探索碘伏的临床价值,并进一步使顺铂的应用能带来更好效益,该实验通过对比研究顺铂单药及与碘伏联合对体外培养人胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用,并对其可能的作用机制进行探讨。方法:以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象展开本实验,MTT比色法用于检测浓度梯度的顺铂、碘伏单药及联合应用不同时间后药物对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制率;倒置相差显微镜用于初步观察药物作用后人胃癌细胞SGC-7901形态的改变;荧光显微镜对于经药物作用且AO/EB染色后的人胃癌细胞SGC-7901凋亡的形态学变化进行观察;流式细胞仪用来检测人胃癌SGC-7901细胞周期分布的改变及凋亡率的变化;Western blot检测Caspase-3蛋白的表达;ELISA试验用于定量测定人胃癌细胞SGC-7901培养上清中IL-8的含量。结果:1、MTT测定结果显示:碘伏对人胃癌细胞SGC-7901体外增殖的抑制作用表现为在一定浓度范围内随药物浓度(1、3、6、9?g/ml)的增高及作用时间的延长(24、48、72 h)抑制效果越明显,其抑制作用与药物浓度和作用时间具有相关性(P0.05);顺铂对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用亦与药物浓度和作用时间具有相关性(P0.05);以1、2、4?g/ml的顺铂联合3?g/ml碘伏分别作用相应时间(24、48、72 h)后抑制作用较两单药分别作用的效果更显著(P0.05),结果提示碘伏可以提高胃癌细胞顺铂化疗的敏感性。2、倒置显微镜及荧光显微镜下均可观察到胃癌细胞凋亡的形态学改变。3、流式细胞仪分析细胞周期分布的结果显示,顺铂和碘伏两单药分别以及联合作用48小时后细胞周期有S期阻滞,1、2、4?g/ml顺铂阻滞细胞于S期的比例分别为28.32%、37.12%、45.06%,3?g/ml碘伏阻滞细胞于S期的比例为25.63%,与同步进行对照组的21.01%比较差异具有显著性(P0.05)。2?g/ml顺铂联合3?g/ml碘伏作用48h后S期的比例为43.89%,明显高于两药单独作用,差异具有统计学上的显著性意义(P0.05)。4、流式细胞仪对细胞凋亡进行检测,结果显示,1、2、4?g/ml顺铂孵育细胞48h后,凋亡率分别为8.25%、16.51%、29.02%,3?g/ml碘伏组为7.62%,与同步进行对照组的3.22%比较差异显著均具有统计学意义(P0.05)。联合用药组细胞凋亡率为27.28%,显著高于两药单独作用,差异也具有统计学上的显著性意义(P0.05)。5、Western blot检测结果显示,顺铂、碘伏单独及联合作用均能上调Caspase-3的表达,且联合用药组Caspase-3的表达水平更高。6、Elisa试验检测结果显示,顺铂和碘伏两单药分别作用胃癌细胞48 h后上清液IL-8的表达量为274.54 pg/ml、190.92 pg/ml、115.20 pg/ml、293.48 pg/ml,较同步进行对照组的331.34 pg/ml明显降低(P0.05)。联合用药组表达水平更低为138.72pg/ml,与对照组及两药单独作用相比,差异均具有统计学上的显著性意义(P0.05)。结论:1、顺铂、碘伏单独及联合应用均可以抑制胃癌细胞的体外生长增殖,其作用随药物浓度的增大及作用时间的延长抑制效果越明显。2、顺铂、碘伏单独及联合应用均可以下调细胞因子IL-8的表达,作用机制可能与药物抑制细胞的增殖有关。3、顺铂、碘伏单独及联合应用均可以诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,作用机制可能与上调胃癌细胞SGC-7901内Caspase-3蛋白的表达有关。
【学位授予单位】：延安大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2

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本文编号：1265020