反义RNA抑制c-myc表达增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性

发布时间：2017-12-15 23:34

  本文关键词：反义RNA抑制c-myc表达增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性

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【摘要】：目的：通过重组反义c-myc腺病毒的制备及鉴定,并转染骨肉瘤MG-63细胞(P53缺失型)和U20S细胞(P53野生型),通过对以上两种骨肉瘤细胞进行重组反义c-myc腺病毒基因干扰后,使骨肉瘤细胞产生低表达c-myc,再通过使用不同浓度的顺铂作用不同时间,研究顺铂对骨肉瘤细胞凋亡产生的影响。方法：重组反义c-myc腺病毒体外转染MG-63细胞和U20S细胞后12h、24h、48h后,构建反义c-myc的重组腺病毒(Ad-Asc-myc), c-myc基因表达测定及c-my蛋白表达测定后在体外感染骨肉瘤MG-63细胞和U20S细胞,并与浓度为2.0、5.0μg/ml的顺铂作用2h、4h、8h后,采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测干扰水平；再通过瑞氏染色和MTT检测,从形态学和统计学上检验不同浓度的顺铂作用于c-myc低表达的骨肉瘤细胞对MG-63细胞和U20S细胞凋亡作用。结果：构建培养的腺病毒Ad-Asc-myc载体体外感染MG-63细胞和U20S细胞48h后,可明显降低骨肉瘤细胞c-myc蛋白的表达水平；同时,顺铂对低c-myc表达的骨肉瘤MG-63细胞和U20S细胞的抑制作用均明显增强。结论：抑制骨肉瘤细胞c-myc的表达可以增强骨肉瘤对顺铂化疗的敏感性,但与顺铂浓度及作用时间统计学无明显意义。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R738.1

【参考文献】

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本文编号：1293871