激活素A通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡

发布时间：2017-12-17 22:03

  本文关键词：激活素A通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡

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【摘要】：激活素A(activin A)最早是由卵巢中分离的糖蛋白,属于转化生长因子β(transforming growth factor β,TGFβ)超家族成员,是一种多功能生长和分化因子,具有广泛的生物学作用,在胚胎初期形成、造血细胞增殖和分化以及肿瘤细胞凋亡等方面发挥重要作用。细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(programmed celldeath, PCD),是机体在正常生长发育或病理状态下由相关基因调控的一个复杂性细胞主动性死亡方式,是机体清除老化、受损及突变细胞,维持机体正常发育所必需的一种重要机制,细胞凋亡异常与机体多种疾病有关,如神经性及神经发育相关性疾病、各种肿瘤的发生等。细胞凋亡途径主要分为三种：死亡受体途径,线粒体途径及近些年发现的内质网应激途径。有关研究显示激活素A可通过线粒体途径诱导B细胞凋亡,但激活素A能否通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡仍缺乏相关研究报导。本研究以小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞和人肺腺癌细胞系A549细胞为研究对象,探讨激活素A对小鼠及人肺腺癌细胞增殖以及凋亡的影响；同时分析小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞内质网应激途径相关蛋白Caspase12,Chop和GADD34的表达：并采用表达GADD34 shRNA慢病毒感染Lewis细胞,建立敲低GADD34基因表达的Lewis细胞系(shGADD34/Lewis),进一步确定激活素A可否通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡。研究首先采用MTT、BrdU法以及CSFE荧光标记法检测细胞增殖,通过Annexin-V/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡情况,结果显示,激活素A可以明显抑制体外培养小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞增殖,诱导Lewis细胞凋亡；研究还显示激活素A也能抑制人肺腺癌细胞系A549细胞增殖,并诱导A549细胞凋亡。实验进一步采用RT-PCR检测小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞内质网应激途径相关蛋白Caspase12、Chop以及GADD34mRNA表达,结果显示激活素A作用Lewis细胞12h,可以明显促进Caspase12、Chop及GADD34 mRNA表达。最后,为了进一步确定激活素A通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡,实验采用表达GADD34 shRNA慢病毒感染Lewis细胞,建立敲低GADD34基因表达的Lewis细胞系(shGADD34/Lewis)及对照病毒感染的Lewis细胞系(shcon/Lewis),研究发现敲低GADD34基因表达可以明显削弱激活素A对Lewis细胞增殖的抑制作用及诱导细胞凋亡作用。上述结果表明,激活素A具有抑制小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞和人肺腺癌细胞系A549细胞增殖,以及诱导Lewis细胞及A549细胞凋亡作用；激活素A可以促进小鼠肺腺癌细胞系Lewis细胞内质网应急途径相关蛋白Caspas12、 Chop和GADD34 mRNA表达；敲低GADD34基因表达可以明显削弱激活素A对Lewis细胞增殖的抑制作用及诱导细胞凋亡作用。因此,激活素A可以通过内质网应激途径诱导肺腺癌细胞凋亡,提示激活素A具有进一步开发成诱导肺腺癌凋亡的治疗药物的潜能。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2

【参考文献】

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1 陈月桥;王丽;武建华;;细胞凋亡信号传导途径研究进展[J];中国实用医药;2007年33期

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本文编号：1301698