microRNA在三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231肿瘤干细胞中的表达谱研究

发布时间：2017-12-18 00:15

  本文关键词：microRNA在三阴乳腺癌细胞株MDA-MB-231肿瘤干细胞中的表达谱研究

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【摘要】：目的:应用miRNA芯片技术筛选干细胞培养基成球培养法(spheroid)及贴壁细胞培养法(attachment)两种方式培养的细胞系MDA-MB-231差异表达的microRNAs(miRNAs),发现三阴乳腺癌(TNBC)干性相关的miRNAs。材料与方法:应用spheroid培养法筛选TNBC干细胞,应用miRNA芯片技术筛选spheroid及attachment两种方式培养细胞系MDA-MB-231差异表达的mi RNAs。运用靶基因预测软件预测差异表达miRNAs可能调控的靶基因。结果:1.通过miRNA的芯片检测及SAM软件,MDA-MB-23l细胞系在无血清培养条件下形成的悬浮球体细胞与贴壁细胞之间有157个miRNAs的表达存在程度不等的差异,其中差异在两倍以上的miRNAs有111个,且皆在悬浮球细胞中表达上调,46个miRNAs在悬浮球细胞中低表达,而在贴壁细胞中表达增高,但是差异倍数皆≤0.5。2.将基因芯片检测结果进行生物信息学分析,发现有5个miRNAs(hsa-miR-297、hsa-miR-3188、hsa-miR-4793-3p、hsa-mi R-34a-5p、hsa-mi R-6768-5p)表达差异非常明显,而且这些miRNAs广泛参与肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡等各种生物学功能。每一个miRNA都对应几十甚至数百个靶基因,而且许多靶基因与干性相关的信号通路有关系,这些信号通路有Wnt/b-catenin、MAPK、NOTCH等。结论:1.通过miRNA的芯片检测及生物信息学分析,发现并确定了三阴乳腺癌CSC中hsa-miR-297、hsa-miR-3188、hsa-miR-4793-3p、hsa-miR-34a-5p、hsa-miR-6768-5p基因呈差异表达并发挥重要作用,进一步的分析提示其可能参与了干细胞调控的相关信号通路。2.miRNA在MDA-MB-23l细胞系肿瘤干细胞中存在特异性的表达谱,研究miRNA在MDA-MB-23l细胞系中特异性的表达谱将为深入研究TNBC的发生、发展以及制定针对TNBC干细胞的治疗策略提供新的方法。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
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本文编号：1302103