铁皮石斛对乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究

发布时间：2017-12-27 13:09

本文关键词：铁皮石斛对乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究　出处：《吉林大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升的趋势。乳腺癌中99%发生在女性，，目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤，是女性最常见的恶性肿瘤疾病之一，其发病具有较为明显的遗传性倾向。原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，进而危及生命。周期蛋白依赖性激酶（CDK）(cyclin-dependent kinases)是与细胞周期进程相对应的一个丝氨酸/苏氨酸激酶家族。在不同的CDK分子结构中，均含有一段相似的激酶结构域，这一区域有一段保守序列，即PSTAIRE（脯丝苏丙异亮精谷），是介导激酶与周期蛋白（cyclin）结合的区域。 CDK与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性，所以被称为细胞周期蛋白依赖性激酶。CDK通过对丝氨酸/苏氨酸蛋白的化学作用驱动细胞周期，它们和周期蛋白cyclin协同作用结合形成异二聚体，其中CDK为催化亚基，cyclin为调节亚基，是细胞周期调控中的重要因子。不同的cyclin-CDK复合物催化不同的底物磷酸化，而实现对细胞周期不同时相的推进和转化作用。它们沿细胞周期时相交替活化并磷酸化相应底物，激活的CDK1可将靶蛋白磷酸化而产生相应的生理效应，如将核纤层蛋白磷酸化导致核纤层解体、核膜消失，将H1磷酸化导致染色体的凝缩等等。这些效应的最终结果使每一个细胞周期得以有条不紊地不断进行。因此，CDK激酶和其调节因子又被称作细胞周期引擎。CDK的活性依赖于其正调节亚基cyclin的顺序性表达和其负调节亚基CDI（dependent kinase inhibitor，CDK抑制因子）的浓度。同时，CDK的活性还受到癌基因和抑癌基因的调节。可以推断人乳腺癌细胞中CDK的活性升高是癌细胞得以高速分裂增殖的原因之一，因此CDK是抑制乳腺癌细胞增殖的一个靶点，探究针对CDK的抑制剂是治疗乳腺癌的一个有效思路。铁皮石斛（Dendrobium candidum）是一种中药，其已知的药理作用有促进腺体分泌和脏器运动、降血糖作用以及增强机体免疫力等。近来一些研究表明铁皮石斛中含有多种活性的酚类和菲类化合物，而它们可以降低多种恶性增殖细胞的增殖速率。由此我们推断它可能具有抑制乳腺癌细胞增殖的功效。在使用铁皮石斛提取物与人乳腺癌细胞作用后发现其可以较为明显的抑制乳腺癌细胞的增殖。将培养好的乳腺癌细胞连同培养基一起转到96孔板中，每孔5000个细胞左右，加入铁皮石斛提取物共同孵育不同时间，可以检测到相比于对照组正常增殖的癌细胞而言，加入不同浓度铁皮石斛提取物的实验组其癌细胞数量明显降低。这说明铁皮石斛确实具有抑制乳腺癌细胞增殖的作用。我们进一步推测铁皮石斛可能同样影响了乳腺癌细胞中CDK的表达水平，我们将细胞中的mRNA逆转录成cDNA，通过RT-qPCR的方法，设计特定的引物并加入荧光分子探针，使对应CDK的cDNA每进行一次扩增都会因为插入了荧光分子探针而使检测到的荧光信号增强。这样通过对比荧光强度就可以得知给药后CDK的mRNA在细胞中表达量的变化，结果表明铁皮石斛确实能够较为明显的下调乳腺癌细胞中多种CDK蛋白的表达水平。
[Abstract]:Breast cancer is a malignant tumor occurring in the gland epithelial tissue of the mammary gland. The incidence of breast cancer is increasing year by year. Breast cancer accounts for 99% of women. At present, breast cancer has become a common tumor that threatens women's physical and mental health. It is one of the most common cancer diseases in women, and its incidence has a more obvious genetic tendency. In situ breast cancer is not fatal; but because of the loss of normal cell characteristics, breast cancer cells are loosely connected and easy to fall off. Once the cancer cells fall off, free cancer cells can spread all over the body with blood or lymph, forming metastasis and endangering life.
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9

【参考文献】