肝癌干细胞靶向治疗的研究

发布时间：2018-01-02 21:33

  本文关键词：肝癌干细胞靶向治疗的研究　出处：《北京协和医学院》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 肝癌 肿瘤干细胞 单克隆抗体 28C10 HSP900α

【摘要】：肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,复发、转移和耐药是导致其高死亡率的根本原因。研究表明肿瘤干细胞是肿瘤组织中一小部分具有干细胞特性的癌细胞,它具有自我更新和多向分化的能力,是肿瘤发生、转移、复发和耐药的根源。目前现有的治疗手段主要杀灭了敏感的肿瘤子代细胞,而对肿瘤干细胞作用甚微,最终导致了肿瘤患者的复发和转移,因此若能靶向肿瘤干细胞治疗肿瘤将会成肿瘤治疗的最有效的手段。通过杂交瘤融合技术获得库容量为2246株杂交瘤单克隆抗体的人肝癌干细胞单抗库,通过产量测定、细胞ELISA检测、功能筛选及Western Blot特异性检测确定28C10为研究单抗。活细胞与固定细胞免疫荧光的检测发现,单抗28C10识别的靶抗原在Be17402-V13 和 MHCC97-L细胞的细胞膜和细胞浆中均有分布；活细胞流式检测初步证实单抗28C10识别肝癌干细胞。采用免疫组化的方法研究了单抗28C10识别临床肝癌患者组织的情况,分析发现单抗28C10的靶抗原在72.0%人肝癌组织中特异性表达。分选MHCC97-L细胞中28C10识别阳性的细胞进行相关体能外肿瘤干细胞特征研究,结果表明28C10+的细胞显现出比28C10-和模拟分选亲本细胞更强的成球能力、侵袭能力、耐药性及裸鼠致瘤能力,证明了单抗28C10是可以识别肝癌干细胞的单抗。体外功能实验结果表明,单抗28C10可明显抑制肝癌细胞系Be17402-V13 和 MHCC97-L的自我更新能力、侵袭能力和耐药能力。裸鼠体内的抗体治疗实验显示,单抗28C10单独应用时可抑制肝癌移植瘤的生长,高剂量对移植瘤体积的抑制率为67.7%；低剂量抗体与化疗药物联合应用时抑制率达到70.1%,显示出化疗药物与单抗联合的优势。分离单抗28C10的靶抗原,经质谱鉴定其靶抗原为HSP90a。通过免疫荧光激光共聚焦、WB和免疫共沉淀初步证明了HSP90a确是单抗28C10的靶抗原。进而采用免疫组化的方法研究了HSP90a识别临床肝癌患者组织的情况,分析发现单抗HSP90a在82.52%人肝癌组织中特异性达,阳性表达明显高于正常肝组织、肝炎和肝硬化,差异具有统计学意义(P0.05),且HSP90a在肝癌组织中的表达与病理分级相关。综上所述,单抗28C10不仅可以识别肝癌干细胞,还具有抑制肝癌干细胞侵袭、成球和耐药的能力,且有明显的体内抑制人肝癌移植瘤生长的功能；鉴定单抗28C10的靶抗原为HSP900,并进行了初步的验证,说明HSP90α+细胞具有肿瘤干细胞的特征,具有作为肝癌干细胞治疗靶点的潜力。
[Abstract]:A monoclonal antibody against hepatocellular carcinoma ( HCC ) was identified by monoclonal antibody 28C10 . The results showed that the single anti - 28C10 antibody could inhibit the growth of hepatoma cell line Be17402 - V13 and MHCC97 - L .

【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 宋凯;杨硕菲;吴俊华;江春平;;肝癌干细胞的研究进展[J];世界华人消化杂志;2009年36期

2 严威;吴国洋;;肝癌干细胞分离鉴定研究进展[J];肝胆外科杂志;2010年03期

3 李广权;陈伟强;;肝癌干细胞的研究现状[J];医学综述;2013年03期

4 张朵;朱海英;马凤云;胡以平;;肝癌干细胞的研究现状[J];生命的化学;2006年01期

5 陈丽;戴广海;;肝癌干细胞研究现状[J];临床肿瘤学杂志;2008年12期

6 唐飞;吕洪敏;向慧玲;;肝癌干细胞的研究现状[J];实用肝脏病杂志;2008年02期

7 张伟;陈孝平;;肝癌干细胞的研究进展[J];临床外科杂志;2008年09期

8 张华;高志红;许田英;朱建凤;文家斌;张阳;;常规化疗对肝癌干细胞的作用[J];胃肠病学和肝病学杂志;2009年06期

9 徐文;曹璐;殷正丰;;肝癌干细胞研究进展与方向[J];癌症;2009年09期

10 孙力超;赵璇;遇珑;韩璐璐;刘彤;胡海;孙立新;杨治华;冉宇靓;;抗肝癌干细胞功能性单克隆抗体的研制[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2010年02期

相关会议论文 前4条

1 单娟娟;钱程;;悬浮条件培养法富集肝癌干细胞[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

2 尹川;谢渭芬;;肝癌干细胞及其分化治疗[A];第九次全国消化系统疾病学术会议专题报告论文集[C];2009年

3 殷胜勇;陈新华;胡晨;;CD133阳性肝癌干细胞在肝癌肝移植术后肿瘤复发中的作用及纳秒脉冲进行干预的初步实验研究[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

4 杜智;宋文芹;张世光;高英堂;朱争艳;王毅军;只丹琮;;人原发性肝癌细胞建系及其生物学特性的初步鉴定[A];天津市生物医学工程学会2007年学术年会论文摘要集[C];2007年

相关重要报纸文章 前1条

1 本报记者 王雪敏;肝癌干细胞及其分化治疗[N];医药经济报;2010年

相关博士学位论文 前10条

1 雷增杰;组蛋白去甲基化酶LSD1促进肿瘤细胞“干性”和侵袭转移的机制研究[D];第三军医大学;2015年

2 张克志;三氧化二砷抑制GLI1表达诱导肝癌干细胞分化延长术后生存期的实验研究[D];复旦大学;2014年

3 刘辉琦;肝癌干细胞相关功能性基因的研究[D];北京协和医学院;2015年

4 戎晓祥;CIK细胞对肝癌干细胞的杀伤作用及其相关机制研究[D];南方医科大学;2015年

5 朱平平;肝癌干细胞相关基因和长链非编码RNA调控自我更新的分子机制研究[D];中国科学技术大学;2016年

6 罗勇利;Nanog~-非肝癌干细胞维持Nanog~+肝癌干细胞自我更新作用的分子机制研究[D];第三军医大学;2016年

7 刘春刚;Sox9调控肝癌干细胞对称非对称分裂影响自我更新及肿瘤发生的研究[D];浙江大学;2016年

8 刘颜敏;超声靶向微泡介导CD133-shRNA转染对CD133~+肝癌干细胞生物学特性及上皮间质转化的影响[D];重庆医科大学;2016年

9 朱新锋;全反式维甲酸诱导分化肝癌干细胞作用研究[D];昆明医科大学;2016年

10 王雪;长链非编码RNA对肝癌干细胞的调控作用及分子机制[D];第二军医大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 马俊明;人肝癌组织中肝癌干细胞的分离培养与鉴定[D];宁夏医科大学;2015年

2 巩志荣;靶向肝癌细胞和肝癌干细胞的共载盐霉素钠和阿霉素纳米脂质体的体内外研究[D];第二军医大学;2015年

3 冯川;内皮细胞条件培养液对肝癌细胞癌干细胞表型及肝癌干细胞迁移的影响[D];重庆大学;2015年

4 王璐;抑瘤素M与盐霉素联用对肝癌干细胞作用的研究[D];吉林大学;2016年

5 陆世东;CD90阳性细胞筛选及PI3K/AKT通路对其干细胞样特性影响的初步研究[D];广西医科大学;2016年

6 杨帅;基于耐药和单细胞全克隆构建肝癌干细胞体外富集模式的实验研究[D];广西医科大学;2016年

7 何永燕;抗人肝癌干细胞功能性单抗的研究[D];广西医科大学;2016年

8 杨婧;肝癌干细胞靶向治疗的研究[D];北京协和医学院;2016年

9 曹璐;球培养法富集肝癌干细胞样亚群及其特征鉴定[D];第二军医大学;2010年

10 杨军;肝癌干细胞特异性标志物的实验研究及其临床病理联系[D];中南大学;2009年

，

本文编号：1371019